来源于患儿下呼吸道肺炎克雷伯菌的ESBLs检测及耐药性研究

邓锦有　梁小静　林桃

[摘要]目的 探讨来源于患儿下呼吸道肺炎克雷伯菌（KP）的产ESBLs情况及耐药性。方法 104株患儿下呼吸道KP收集在2013年7月～2015年7月期间。KP的鉴定采用全自动微生物分析仪；ESBLs的检测采用ESBLs检测试剂盒、药物敏感性试验采用琼脂稀释法；数据分析采用x2检验。结果 氨苄西林的耐药率高达100.00%（104株）；ESBLs的检出率为39.42%（41株）；头孢唑啉、头孢西丁、头孢呋辛、头孢他啶、头孢噻肟、氨曲南、左氧氟沙星在ESBLs阳性组的耐药率明显高于阴性组（P<0.05）；头孢唑啉、头孢他啶、头孢噻肟、头孢吡肟、左氧氟沙星在儿科重症监护病房的耐药率明显高于普通儿科病房和新生儿病房（P<0.05）。结论 来源于患儿下呼吸道KP的耐药形势严峻，特别是产ESBLs和儿科重症监护病房的KP。

[关键词]肺炎克雷伯茵；超广谱B-内酰胺酶；儿科；呼吸道感染

[中图分类号]R446.5 [文献标识码]B [文章编号]2095-0616（2016）06-28-04

根据卫生部全国细菌耐药监测网统计，肺炎克雷伯菌（klebsiella pneumoniae，KP）在儿童中的检出率排列第三，仅次大肠埃希菌和金黄色葡萄球菌，其可感染呼吸道、尿道等多个部位。KP的耐药机制与超广谱B-内酰胺酶（extended spectrum B-1actamase，ESBLs）关系密切。为了解KP的产EsBLs情况和耐药形势，本文对来源于的104例非重复KP进行药物敏感性和EsBLs检测，并从病房的种类分析KP的耐药性和产EsBLs特点，现报道如下。

1.材料与方法

1.1实验菌株

104株非重复KP来源于2013年7月～2015年7月廉江市人民医院儿科送检的标本；琼脂稀释法的质控株大肠埃希菌ATCC25922由廉江市人民医院检验科提供。

1.2细菌鉴定和ESBLs的检测

应用全自动微生物分析仪（美国碧迪，型号：PHOENIX-100）进行鉴定KP，采用ESBLs检测试剂盒检测KP产EsBLs情况，严格按照试剂盒的说明书进行操作。EsBLs检测试剂盒购自杭州滨和微生物试剂有限公司。

1.3抗菌药物敏感性试验

采用琼脂稀释法测定KP对氨苄青霉素、头孢唑啉、头孢西丁、头孢呋辛、头孢他啶、头孢噻肟、头孢吡肟、氨曲南、哌拉西林/他唑巴坦、头孢哌酮/舒巴坦、亚胺培南、左氧氟沙星、丁胺卡那和复方新诺明的敏感性。试验结果判断参照美国临床和实验室标准协会（CLSI）的标准，药物标准品购自中国药品生物制品检定所。

1.4统计学方法

应用SPSS17.0软件进行分析，计数资料以百分比表示，采用x2检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2.结果

2.1KP的药物敏感性及ESBLs检测结果

KP对氨苄青霉素、头孢唑啉、头孢西丁、头孢呋辛、头孢他啶、头孢噻肟、头孢吡肟、氨曲南、哌拉西林/他唑巴坦、头孢哌酮/舒巴坦、亚胺培南、左氧氟沙星、丁胺卡那和复方新诺明的耐药率分别为100.00%（104株）、58.65%（61株）、19.23%（20株）、65.38%（68株）、50.00%（52株）、47.12%（49株）、33.65%（35株）、38.46%（40株）、17.31%（18株）、8.65%（9株）、0.96%（1株）、26.92%（28株）、4.81%（5株）、46.67%（49株）。ESBLs的检出率为39.42%（41株）。头孢唑啉、头孢西丁、头孢呋辛、头孢他啶、头孢噻肟、氨曲南、左氧氟沙星在ESBLs阳性组的耐药率明显高于阴性组（P<0.05）。产ESBLs阳性与产ESBLs阴性株的耐药情况比较。见表1。

2.2KP在不同病房的分布、产ESBLs情况和耐药情况

来源于儿科重症监护病房、普通儿科病房、新生儿病房的KP分别为53株（50.96%）、30株（28.85%）和21株（20.19%），其中产ESBLs的KP分别占52.83%（28株）、30.00%（8株）和28.57%（5株）。通过x2分析可知，来源于儿科重症监护病房的KP构成比和产ESBLs构成比均明显高于其他两种病房（P<0.05）。KP在不同病房的耐药情况。见表2。

3.讨论

KP的耐药形势严峻，对氨苄青霉素、头孢唑啉、头孢呋辛和头孢他啶的耐药率均不低于50.00%，海南也有类似的报道，提示上述药物不宜作为经验治疗（特别是非首次使用抗菌药物的患儿）的首选药物。值得注意的是，作为经常使用的抗菌药物头孢噻肟、头孢吡肟和氨曲南也有较高的耐药率，这可能与本科室对上述药物使用频率过高有关，提示临床工作者应避免频繁使用某种抗菌药物，从而尽可能的避免耐药菌的产生。庆幸的是，KP对哌拉西林/他唑巴坦、头孢哌酮/舒巴坦、亚胺培南、左氧氟沙星和丁胺卡的耐药率相对较低，提示经验用药时应考虑这几种抗菌药物，这和四川省绵阳市报道的类似。

近年ESBLs的检出率持上升趋势，ESBLs阳性KP对大多数抗生素耐药明显，本院儿科的ESBLs的检出率（39.42%）比鲁承熙等报道的46.42%低，但比汤卫红等报道的31.4%高，这可能与各医院使用抗菌药物的种类和习惯等不同有关。表1显示，ESBLs与KP的耐药性关系密切，B-内酰胺类抗菌药物头孢唑林等在ESBLs阳性组的耐药率明显高于ESBLs阴性组（P<0.05），这可能与B-内酰胺类抗菌药物的广泛使用以及ESBLs是一种能水解青霉素、广谱头孢菌素及单酰环类的酶有关，但头孢吡肟、哌拉西林/他唑巴坦等B-内酰胺类抗菌药物在ESBLs阳性组与ESBLs阴性组之间的耐药率差异无统计学意义（P>0.05），这可能与ESBLs。对头霉素、碳青霉烯类抗生素及酶抑制剂敏感以及第四代头孢菌素类抗生素对B-内酰胺酶比较稳定有关。左旋氧氟沙星在ESBLs阳性组的耐药率明显高于ESBLs阴性组（P<0.05）的原因可能与ESBLs阳性KP常同时携带抗喹诺酮类抗生素基因有关。

来源于儿科重症监护病房的KP构成比和产ESBLs构成比均明显高于其他两种病房（P<0.05）的原因可能与儿科重症监护病房患儿的基础疾病危重、免疫力下降、侵入性操作较多、住院时间较长、使用抗菌药物相对多有关。表2显示，儿科重症监护病房KP对各种抗菌药物的耐药率普遍高于普通儿科病房和新生儿病房，其中头孢他啶等在儿科重症监护病房的耐药率明显高于其他两种病房（P<0.05），其原因可能如下：感染性疾病在儿科重症监护病房住院的患儿中十分常见，鉴于患儿的病情危重，使用抗菌药物的级别普遍高于其他两种病房，在强大的抗菌药物选择压力作用下，从而诱导并加强KP的耐药性。

综上所述，来源于患儿下呼吸道KP的耐药形势严峻，特别是产ESBLs和儿科重症监护病房的KP。面对着肺炎克雷伯菌对B-内酰胺类抗生素耐药率逐年升高的形势，临床工作者应根据药物敏感性试验结果合理使用抗菌药物，从而避免KP耐药菌的产生。