犬尿氨酸/色氨酸比值与妊娠期高血压疾病的相关性研究▲

杨　莉　张　强　陈　明*　于　坤

563003　贵州省 遵义医学院附属医院产科



犬尿氨酸/色氨酸比值与妊娠期高血压疾病的相关性研究▲

杨莉张强陈明*于坤

563003贵州省 遵义医学院附属医院产科

目的探讨妊娠期高血压疾病与犬尿氨酸(Kyn)、色氨酸(Trp)、尿氨酸/色氨酸比值的相关性，为妊娠期高血压疾病严重程度的判定提供一种监测指标。方法采用反相高效液相色谱紫外法测定血浆色氨酸及犬尿氨酸的含量,并分析其与妊娠期高血压疾病比值。结果血浆Kyn/Trp比值在正常妊娠妇女为0.281±0.047,妊娠期高血压妇女为0.273±0.053,子痫前期轻度妇女为0.178±0.054,子痫前期重度妇女为0.140±0.043。子痫前期轻度、重度妇女血浆Kyn/Trp比值较正常妊娠、妊娠期高血压妇女明显降低(P<0.01)；子痫前期重度妇女血浆Kyn/Trp比值较轻度妇女明显降低(P<0.05)；正常妊娠、妊娠期高血压妇女血浆Kyn/Trp比值无明显差异(p>0.05)。犬尿氨酸和妊娠期高血压疾病严重程度呈明显负相关(R=-0.0776，P<0.01)，色氨酸和妊娠期高血压疾病严重程度无相关性(R=-0.033，p=0.805)，犬尿氨酸/色氨酸比值和妊娠期高血压疾病严重程度呈明显负相关(R=-0.0751,P<0.01)。结论(1)血浆Kyn及Kyn/Trp比值与妊娠期高血压疾病的严重程度有关。(2)妊娠期高血压疾病越严重，血浆Kyn、Kyn/Trp比值越小。提示血浆Kyn、Kyn/Trp比值可能成为我们临床上判断妊娠高血压疾病严重程度的参考指标之一。

妊娠期高血压疾病；严重程度；相关性

妊娠期高血压疾病(pregnancy-induced hypertension syndrome,PIH)是妊娠20周以后出现的高血压、水肿、蛋白尿三大症候群,严重时可出现抽搐、昏迷、心肾功能衰竭甚至发生母婴死亡。因此加强对PIH的认识,了解某些因素对PIH的影响,对今后预防PIH的发生、减少孕产妇及围生儿死亡及指导临床实践有重要的意义[1]。现对本院2013年10月至2014年10月产科住院产妇60例为研究对象，其研究结果报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择本院产科住院产妇60例患者。并分为4组，每组各15例，即正常妊娠组：平均年龄26.9岁；妊娠期高血压组：平均年龄27.3岁，孕周37-39周，妊娠期首次出现血压≥140/90mmHg，尿蛋白(-)；子痫前期轻度组：平均年龄28.2岁，孕周36-39周，妊娠20周以后出现血压≥140/90mmHg，尿蛋白(+)或24小时尿蛋白定量≥0.3g；子痫前期重度组：平均年龄27.9岁，孕周36-39周，血压≥160/110 mmHg；尿蛋白(+++)或24小时尿蛋白定量≥5.0g(以上标准按照《妇产科学》第八版)[2]。所有病例排除以下情况：双胎妊娠，各种神经精神疾病、肝肾功能衰竭、白内障、糖尿病等并发症及其它妊娠期合并症。各组的组间孕妇年龄、孕周及初产妇比例分别经卡方检验和方差分析，差异均无统计学意义(p>0.05)，因此组间年龄、孕周及初产妇比例差异不会对试验结果造成影响。

1.2 标本收集和处理 清晨空腹静脉血2ml，以12000×g4℃离心后取抗凝血浆105μL加入26μL20%HCLO4溶液，混匀1min，静置10min，再以12000×g4℃离心10min，静置后取上清液20μL进样分析。

1.3 色谱分析条件 色谱柱：ZORBA×SB-C18(150mm×4.6mm,5?m)；检测波长：245nm；流动相：水(含0.001mol/L KH2PO4)：甲醇=90:10；流速：1ml/min；柱温：25℃。1.4 统计学分析 采用SPSS17.0统计软件进行数据处理，分别对正常妊娠组、妊娠期高血压组、子痫前期轻度组、子痫前期重度组年龄及孕龄进行卡方检验和t 检验，色氨酸、犬尿氨酸的含量以及犬尿氨酸/色氨酸比值的比较使用方差分析; 犬尿氨酸/色氨酸比值和妊娠期高血压疾病严重程度的相关性采用多因素方差分析，得出P值和线性相关系数(R2)；采GraghPad4.0软件包制作犬尿氨酸/色氨酸比值的散点图。

2 结果

2.1 同时定量检测各组孕妇血浆中色氨酸和犬尿氨酸含量，计算犬尿氨酸/色氨酸比值：Kyn和Trp保留时间分别为4.2±0.1min和8.8±0.1min，两者分离良好，且血清内源性物质对待测组分的分离无干扰(见图1，图2)。

图1犬尿氨酸和色氨酸标准品色谱图

图2孕妇血浆中犬尿氨酸和色氨酸色谱检测图

正常妊娠组、妊娠期高血压组、子痫前期轻度组、子痫前期重度组Kyn和Trp含量组间差异无统计学意义( P>0.05)；子痫前期轻度组、子痫前期重度组血浆Kyn/Trp比值较正常妊娠组、妊娠期高血压组明显降低(P<0.01)，且子痫前期重度组血浆Kyn/Trp比值较子痫前期轻度组进一步降低(P<0.05)；正常妊娠组与妊娠期高血压组比较血浆Kyn/Trp比值无明显差异(P>0.05)。见表1

表1 血浆样品中Kyn和Trp浓度(μg/mL)及比值

注：与NP组比较，*P<0.01;与GH组比较，#P<0.01；与PM组比较，▲P<0.05

2.2 犬尿氨酸、色氨酸、犬尿氨酸/色氨酸比值和妊娠期高血压疾病严重程度的相关性分析 犬尿氨酸和妊娠期高血压疾病严重程度呈明显负相关(R=-0.0776，P<0.01)，色氨酸和妊娠期高血压疾病严重程度无相关性(R=-0.033，p=0.805)，犬尿氨酸/色氨酸比值和妊娠期高血压疾病严重程度呈明显负相关(R=-0.0751,P<0.01)。

3 讨论

人体的肝脏以外唯一催化色氨酸沿犬尿酸途径分解代谢的限速酶是IDO。IDO通过降解淋巴组织及胎盘组织中的色氨酸,诱导母胎间的免疫耐受[3]。近来有学者研究发现，滋养细胞可功能性地表达IDO，IDO介导Trp降解同时也是滋养细胞条件培养基中Trp降解的主要途径(占76%)。由于在滋养层和胎盘组织中同时存在IDO, 在早孕期的滋养细胞中也表达[4]，人孕卵一旦着床且与母体血供建立,胎盘组织分泌的胎儿细胞即能产生IDO,意味着孕妇血中Trp代谢变化在妊娠的第一周就可发生,妊娠妇女血浆Kyn/Trp比值显著高于非妊娠妇女。Wang等的研究证明Kyn有较强的扩血管作用，降低自发性高血压大鼠的平均动脉压，通过药物抑制IDO活性，Kyn浓度降低，实验动物的血压即开始增加[5]。

本研究同时显示：在子痫前期时，血浆Kyn/Trp比值明显低于正常妊娠者，子痫前期重度者(PS组)明显低于子痫前期轻度(PM组)、妊娠期高血压者(GP组)，而PM组低于GP组。血浆Kyn/Trp比值与妊娠期高血压疾病的严重程度密切相关。妊娠期高血压疾病病情越严重，血浆Kyn/Trp比值越小，原因可能是子痫前期，尤其是在子痫前期重度时，IDO的活性明显下降，Trp代谢显著减弱，母胎免疫失衡，排斥反应增强。据此临床上可测定血浆Kyn/Trp比值的变化判断妊娠高血压疾病的严重程度。

具备高危因素的孕妇，在产前检查时定期检测血浆中的Kyn、Trp值，可早期识别该疾病的严重程度，及时防治妊娠期高血压疾病的并发症及后遗症，降低孕产妇、围生儿病死率。降低对家庭和社会带来的巨大经济负担。提高围产儿的生存质量。高效液相色谱法操作简便，分析时间短，特异性高，准确度高，线性范围较宽，检测限较低，推荐应用于临床检验。通过测定Kyn/Trp的比值判断妊娠期高血压疾病的严重程度提供良好的检测指标。对子痫前期患者在不同的发病孕周及产后血浆中该比值的变化有待今后大样本，多中心联合基础上进一步研究

[1] Hao K H,Zhou Q,Chen W,et al.Possible role of the ‘IDO-AhR axis’ in maternal-fortal tolerance[J]. CellBiology International,2013,37(2):105-108.

[2]谢幸，苟文丽.妇产科学[M].北京:人民卫生出版社，2013:64-71.

[4]Mcgaha T L,Huang L,Lemos H, et al.Amino acid catabolism:a pivotal regulator of innate and adaptive immunity[J]. Immunological Reviews,2012,249(1):135-157.

[5]Wang Y,Liu H,Mckenzie G,et al.Kynurenine is an endothelium-derived relaxing factor produced during inflammation[J].Nat Med,2010,16(3):279-285.

[6]Dürr S,Kindler V.Implication of indolamine 2,3dioxygenase in the tolerance toward fetuses,tumors,and allografts[J].Journal of Leukocyte Biology,2013,93(5):681-687.

贵州省遵义市红花岗区科学技术项目(遵红科合社字(2011)17号)

10.3969/j.issn.2095-9559.2016.04.046

2095—9559(2016)04—2370—02

2015-10-30

*为通讯作者