采用线性质控品评价Coulter LH780血液分析仪的线性*

张 丽管晓媛段 兵黄一玲*田 蕾李一石

采用线性质控品评价Coulter LH780血液分析仪的线性*

张 丽①管晓媛①段 兵①黄一玲①*田 蕾①李一石①

目的:对Coulter LH 780全自动血液分析仪做线性评价.方法:采用原装配套试剂、校准品和室内质控品,以原装线性质控品为样本评价白细胞计数(WBC)、红细胞计数(RBC)、血红蛋白浓度(Hgb)以及血小板浓度(Plt)4项参数的线性范围.结果:4项参数的检测结果均呈良好线性关系,WBC、RBC、Hgb及Plt的线性范围分别为(0.03～363.5)X109/L、(0.00～7.92)X1012/ L、0.3～236.0 g/L 以及(0.3～2511.0)X109/L.结论:LH 780血液分析仪的线性范围宽泛,能满足临床实验室的检测要求.

血液分析仪;线性;白细胞;红细胞;血红蛋白;血小板

张丽,女,(1969- ),本科学历,副主任技师.中国医学科学院北京协和医学院阜外医院卫生部心血管药物临床研究重点实验室,从事临床检验工作.

[First-author's address]Key Laboratory of Clinical Trial Research in Cardiovascular Drugs, Ministry of Health, State Key Laboratory of Cardiovascular Disease, Fuwai Hospital, National

Center for Cardiovascular Diseases, Chinese Academy of Medical Sciences and Peking Union Medical College, Beijing 100037, China.

美国临床实验室修正案(clinical laboratory improvement amendment 88,CLIA'88)规定医学实验室检验仪器性能评估的最低要求中包括可报告范围的评估[1];中国合格评定国家认可委员会在其文件"医学实验室质量和能力认可准则"的5.3.2.1条款中也指出:实验室应在设备安装和使用前验证其能够达到必要的性能,并符合相关检验的要求[2].对于血液分析仪而言,可报告范围是指样本未经任何预处理,即可由检测方法直接测得的可靠结果范围.可报告范围的高值、低值应是检验方法所能达到的线性范围的上限、下限,所以一般可报告范围的评价是通过线性评价来进行.线性是临床检验仪器测定方法的一个重要特性,对检测方法做评价时,线性评价是一个重要的评价指标[3-4].参照美国临床实验室标准化委员会(national committee for clinical laboratory standards,NCCLS)指南EP6-A[5]和我国卫生行业标准WS/T 408-2012[6]的要求,本研究拟对新仪器LH 780型血液分析仪进行白细胞计数(WBC)、红细胞计数(RBC)、血红蛋白浓度(Hgb)以及血小板浓度(Plt)的4项测定,并通过其参数对该仪器进行线性评价.

1 材料与方法

1.1 仪器与试剂

(1)LH780型全自动血液分析仪(美国贝克曼库尔特公司,仪器序列号AU43162)及其原装配套试剂;校准品(S-CAL,LOT:4768);室内质控品(5C cell control,LOT: 886500,875800,865000).

(2)线性质控品(COULTER LIN-C Linearity Control,LOT:1754074k)共11份样本,浓度水平自Level 0到Level 9逐渐递增,Level 10为清洗液.WBC和Plt最高浓度可到Level 9,RBC和Hgb的最高浓度到Level 6.

1.2 仪器校准

(1)按照校准程序,先进行环境温度、湿度及仪器输入电压等检测.仪器要求环境温度为15.5～32.0℃,湿度≤90%,输入仪器的电压为210～250 V.校准当日的室温为23℃,湿度为48%,仪器输入电压为220 V,上述条件均满足仪器的运行要求.

(2)启动血液分析仪,做开机后的本底检测.本底检测显示各参数本底结果均符合仪器设定要求,无异常报警提示.

(3)使用校准品校准仪器,仪器可自动计算检测数据.校准结果显示,各参数与靶值偏差在仪器允许范围内,仪器无异常报警提示,无需对旧校准系数做修正,维持旧校准系数不变.血液检测4项参数的校准结果见表1.

表1 血液检测4项参数的校准结果

1.3 测定方法

(1)室内质控品的检测.室内质控品包括低值、中值及高值3个水平,每个水平各1份样本.每份样本均检测WBC、RBC、Hgb及Plt 4项参数,全部检测结果都达到室内质控品的预期值要求,表明仪器检测状态正常,可进行下一步的测试.

(2)以线性质控品为样本进行线性检测.采用说明书中的8X8X8方式混匀样本,即垂直放置样本试管于两手掌心,前、后搓动试管各8次,再上、下颠倒混匀8次,如此反复操作直至试管内含物均匀悬浮,然后将全部样本按Level 0～10的顺序以自动进样模式检测,每个浓度水平重复检测6次.

1.4 统计学方法

使用EXCEL软件进行直线相关分析,去除各参数每个浓度水平第1次的测定结果(充当灌注),以后5次检测结果的平均值为实测值以及分别以线性质控品说明书中各参数、各水平预期结果的上限、下限的平均值为理论值,要求线性回归方程的斜率在1±0.05范围内,相关系数r2≥0.95[7].

2 结果

2.1 线性质控品检测结果

经检测,WBC、RBC、Hgb及Plt的4项参数每个水平样本6次检测结果非常接近,表明该仪器批内精密度良好;各项参数的检测结果从Level 0～10逐步递增,表现出良好的线性关系.血液中的4项参数及各水平样本6次检测结果见表2～5.

2.2 质控品检测结果的线性统计

以横坐标为理论值,以纵坐标为实测值做线性统计图.经统计分析,一定浓度范围内各参数线性回归方程的斜率均在1±0.05范围内,相关系数r2≥0.95,满足线性回归分析要求.4项参数的线性范围分别为:①WBC:(0.03～363.5)X109/L;②RBC: (0.00～7.92)X1012/L;③Hgb:0.3～236.0 g/L;④Plt:(0.3～2511.0)X109/L.统计结果表明:各项参数检测结果线性范围宽泛,基本涵盖了临床样本浓度范围,能满足临床样本检测需求.4项参数检测结果的线性统计如图1～4所示,线性回归方程也显示在图中.

表2 WBC线性检测结果(109/L)

表3 RBC线性检测结果(1012/L)

表4 Hgb线性检测结果(g/L)

表5 Plt线性检测结果(109/L)

3 讨论

血液分析仪是血常规检测最常用分析仪,因其精密度较高、分析快速及准确等特点,已被广泛应用于临床实验室[8-11].LH 780型血液分析仪采用电导、射频及激光等技术对血细胞进行分析,可直接检测得到WBC、RBC、Hgb及Plt[12-14].由于血液中的4项参数是临床上最为常用的诊断指标,故本研究通过测定这4项参数的线性范围来评价新仪器的线性,以证明该仪器能否符合临床要求.

线性评价中,最理想的样本是来自经过稀释制备而成的患者新鲜全血样本,且检测项目的浓度应该接近预期测定上限[15].但是最理想样本在短时间内较难获取,并且患者血样本可能会存在溶血、脂血、黄疸或某些特定药物成分而影响检测结果[16-17].此外.倍比稀释过程也会引入检测误差[18-19].原装配套的线性质控品主要由悬浮于等渗培养基中的经处理的、稳定的人类红细胞组成,不含对测定方法有明确干扰作用的物质,与临床全血样本相似,适用于血液分析仪的线性评价.本研究中,LH 780型血液分析仪4项参数的检测结果均表现出良好的,且线性范围宽泛,基本涵盖了临床样本浓度范围,表明该仪器线性良好,能满足实验室中临床样本检测的需要.

4 结语

图1 WBC线性统计图

图2 RBC线性统计图

图3 Hgb线性统计图

图4 Plt线性统计图

根据临床实验室质量管理的要求,在医学检验仪器应用于临床前,必须对其性能做必要的评价或验证,以保证检测结果的可溯源性.在本仪器的评价过程中,操作人员不但熟悉仪器的校准、使用方法,还具有良好的检测技术,操作严谨、规范,能够保证检测结果的科学性、有效性.同时,本研究过程具有可重复性,可作为全自动血液分析仪线性评价的模板,具有一定的参考价值.

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Evaluation of the linearity of Coulter hematology analyzer LH 780

ZHANG Li, GUAN Xiaoyuan, DUAN Bing, et al

Objective: To evaluate the linearity of Coulter automated hematology analyzer LH 780. Methods: The linearity control used to be samples, the linear range of WBC, RBC, Hgb, Plt were evaluated with Coulter original reagents, calibrator and control. Results: The test results of the four parameters showed good linear relationship. The linear range of WBC, RBC, Hgb, Plt were (0.03～363.5)X109/L, (0.00～7.92)X1012/L, 0.3～236.0 g/L and (0.3～2511.0)X109/ L, respectively. Conclusion: For Coulter hematology analyzer LH 780, there is a wide linearity that can meet the demands of clinical laboratories.

Hematology analyzer; Linearity; White blood cell count; Red blood cell count; Hemoglobin concentration; Platelet concentration

1672-8270(2016)07-0022-04 [中图分类号] R197.39

A

10.3969/J.ISSN.1672-8270.2016.07.008

国家"十二五"重大新药创制科技专项(2012ZX09303-008-001)"心血管创新药物临床研究技术平台建设"

①中国医学科学院北京协和医学院阜外医院卫生部心血管药物临床研究重点实验室 北京 100037

hylhyl@foxmail.com

2015-10-21