磷酸化应激诱导蛋白1和雌激素受体-α蛋白在甲状腺乳头状癌中的表达及相关性分析

曹钟黄冈市中心医院病理科，湖北黄冈438000

磷酸化应激诱导蛋白1和雌激素受体-α蛋白在甲状腺乳头状癌中的表达及相关性分析

曹钟
黄冈市中心医院病理科，湖北黄冈438000

目的观察分析磷酸化应激诱导蛋白1（STIP1）与雌激素受体-α（ER-α）蛋白在甲状腺乳头状癌中的表达情况，分析二者与甲状腺乳头状癌发生、发展的相关性。方法选取甲状腺乳头状癌患者81例，共收集石蜡包埋乳头状癌组织81例，癌旁正常甲状腺组织15例，转移癌甲状腺组织25例，单纯桥本氏甲状腺炎（CLT）组织23例，分别为甲状腺乳头状癌组、对照组、淋巴结转移癌组、CLT组，观察各组STIP1与ER-α蛋白表达情况及相关性。结果甲状腺乳头状癌组及淋巴结转移癌组STIP1与ER-α蛋白表达阳性率均高于CLT组及对照组，组间比较差异有统计学意义（P＜0.05）；甲状腺乳头状癌组中STIP1与ER-α蛋白表达呈正相关，比较差异具有统计学意义（r=0.614，P=0.009）。结论STIP1与ER-α蛋白在甲状腺乳头状癌中高表达，可能参与了甲状腺乳头状癌的发生、发展与转移过程，二者表达呈正相关性，表明二者可能在甲状腺癌的发展中起到一定的协同作用，参与促进甲状腺乳头状癌的淋巴结转移。

甲状腺乳头状癌；磷酸化应激诱导蛋白1；雌激素受体-α蛋白；桥本氏甲状腺炎

Oncol Prog，2016，14（5）

甲状腺乳头状癌约占甲状腺恶性肿瘤的80%以上［1］，是头颈部肿瘤常见的恶性病变。该病发病年龄较低，目前发病率呈上升趋势［2］，研究表明桥本氏甲状腺炎（chronic lymphocytic thyroiditis，CLT）患者合并甲状腺癌的比例较高［3］，为甲状腺癌发生的重要因素。据相关研究表明，随着分子生物学技术的发展，肿瘤发生发展的机制研究亦逐渐深入，其中磷酸化应激诱导蛋白（stress induced phosphoprotein1，STIP1）与雌激素受体α（estrogen receptor α，ER-α）蛋白与肿瘤浸润、转移有着一定关系［4］。本文观察分析了STIP1与ER-α蛋白在甲状腺乳头状癌中的表达情况，分析二者与甲状腺乳头状癌发生、发展的相关性，现报道如下。

1　资料与方法

1.1一般资料

选取2014年1月至2015年6月于黄冈市中心医院收治的甲状腺乳头状癌患者81例，从患者石蜡包埋组织中收集乳头状癌组织81例，癌旁正常甲状腺组织15例，淋巴结转移癌甲状腺组织25例，单纯CLT组织23例，分为甲状腺乳头状癌组、对照组、淋巴结转移癌组、CLT组。纳入标准：①通过手术后石蜡病理检查诊断为甲状腺乳头状癌。②具有确切、完整的临床病理诊断资料。③手术前均未接受过放疗及化疗。④为初次手术患者。⑤无合并其他肿瘤疾病。⑥对本研究均知情，且签署知情同意书。所有患者术前均未予放化疗，直接接受手术治疗，经两名以上病理科医师阅片确诊，且排除合并其他系统恶性肿瘤。其中，甲状腺乳头状癌组，男性17例，女性64例，年龄在23～68岁，平均年龄（41.8±5.7）岁；对照组男性2例，女性13例，年龄在29～67岁，平均年龄（41.7±6.2）岁；淋巴结转移癌组男性7例，女性18例，年龄在24～65岁，平均年龄（41.9±5.4）岁；CLT组男性5例，女性18例，年龄在25～69岁，平均年龄（41.5±6.3）岁。四组性别、年龄、病情等一般资料比较，差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。

1.2材料与方法

STIP1抗体试剂选择Abcam公司提供的鼠抗人STIP1多克隆抗体；ER-α抗体选择中杉金桥生物技术公司提供的兔抗人ER-α多克隆抗体。石蜡组织4 μm切片，80℃烤片后，采用免疫组织化学染色法对组织中STIP1及ER-α蛋白表达进行检测，STIP1采用直肠癌阳性病例作为阳性对照，ER-α采用乳腺癌阳性病例作为阳性对照，PBS缓冲液代替一抗为阴性对照。

1.3结果判定方法

ER-α蛋白定位在细胞质和（或）细胞核中，对细胞核阳性者进行统计，其显色程度分为：污染色为阴性（－），淡黄色为弱阳性（+），棕黄色为中阳性（++），棕褐色为强阳性（+++）。STIP1定位在细胞质和（或）细胞核中，采用染色范围×染色强度判定阳性情况，其中染色强度评分：无染色为0，弱染色为1，中染色为2，强染色为3；染色范围肿瘤细胞＜25%为1，25%～49%为2，50%～75%为3，＞75%为4，染色范围×染色强度＞4为STIP1阳性表达（+）。（+）以上所有的切片均由两名资深的病理科医师进行双盲观察。

1.4统计学方法

采用SPSS17.0统计软件进行数据处理。计数资料采用χ2检验，相关性分析以Spearman等级进行分析，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2　结果

2.1四类组织的病理表现

甲状腺乳腺癌组织镜下可见明显乳头状结构，部分患者存在滤泡性、乳头滤泡混合性结构，核增大且不规则，粉尘状染色质，核仁较小且靠近核膜，部分可见存在核内假包涵体，核伴有清晰的嗜酸性细胞质，部分可见钙盐沉积且为同心圆状。CLT组织镜下可见淋巴细胞密集浸润区域具有活跃增生的甲状腺上皮细胞在周边密集存在，细胞核与单纯甲状腺癌组织镜下病理表现类似，细胞存在高柱状特征，淋巴结明显强化，内部有散在低密度灶，淋巴结边缘有不连续“蛋壳样”钙化，甲状腺原发肿瘤内亦有相似钙化。（图1）

图1　四类组织的典型病理表现

2.2四组的STIP1阳性表达情况比较

结果显示，甲状腺乳头状癌组及淋巴结转移癌组STIP1阳性率高于CLT组及对照组（表1），组间差异均有统计学意义（P＜0.05）。

表1　四组STIPSTIP1 1阳性表达情况［n（%）］

2.3四组的ER-α蛋白阳性表达情况比较

结果显示，甲状腺乳头状癌组及淋巴结转移癌组ER-α蛋白阳性率高于CLT组及对照组（表2），组间比较差异均有统计学意义（P＜0.05）。

表2　四组ER-α蛋白阳性表达情况［n（%）］

2.4 STIP1与ER-α蛋白表达的相关性分析

应用Spearman等级相关分析对甲状腺乳头状癌组中STIP1与ER-α蛋白表达的相关性进行分析，结果显示：STIP1与ER-α蛋白表达呈正相关（r= 0.614，P=0.009）。

3　讨论

甲状腺癌是临床常见的内分泌肿瘤，其发病率在全身恶性肿瘤中占0.2%～1%，据相关调查可知，甲状腺癌多发于青壮年女性，女性患病是男性的3倍，其中乳头状癌的发病率约占60%以上，患者在发病初期无明显症状，易发生淋巴结转移，因此通常发生淋巴结转移的患者例数较多，且随年龄增长，发病恶性程度明显增加［5］。目前对甲状腺乳头状癌的发病机制尚未明确。CLT是临床常见的自身免疫性疾病，临床发现甲状腺乳头状癌患者合并有CLT的情况较多见，CLT组织学表现为滤泡上皮细胞嗜酸性变，胞质内线粒体数量增多，可能由于内分泌、癌基因突变和重排多种因素协调作用所致，因此与肿瘤发生具有密切关系，其炎性反应也可能从多方面对肿瘤的发生发展具有影响作用［6］。

STIP1是Hsp70与Hsp90的连接体分子，能够直接与热应激蛋白70（Hsp70）和热应激蛋白90 （Hsp90）相结合起到保护细胞的作用。研究表明［7］，STIP1表达与生物细胞的癌变、凋亡有密切关系，并在生物信号传导通路中参与较多。在卵巢癌组织中对STIP1表达的研究发现，STIP1与磷酸化细胞外调节蛋白激酶（ERK）能够共同定位于卵巢组织中，通过激活ERK促进卵巢癌细胞增殖，ERK为多种生长因子的下游蛋白，具有调节细胞增殖、分化及凋亡的功能。ERK蛋白是一种存在于细胞外的信号调节激酶，与细胞的增殖和分化有密切关系，而重组的STIP1可以调节ERK的磷酸化水平，使其表达升高，参与DNA的合成。本研究结果显示，甲状腺乳头状癌患者癌变组织及淋巴结转移癌组织中STIP1表达阳性率高于正常甲状腺组织及CLT组织，据此结果推测，STIP1在乳头状癌的发生发展及转移中起到一定作用，这种作用可能正因STIP1激活ERK通路导致的，从而促进了甲状腺乳头状癌的转变［8］。

雌激素受体（ER）为介导雌激素生物效能的特异性结合蛋白，主要包括ER-α和ER-β两个亚型，由于甲状腺癌及其乳头状癌发病率女性高于男性，对ER蛋白表达与甲状腺癌的相关性分析一直是临床研究的重点［9］。ER-α能够与脂溶性雌激素相结合，从而在新生血管及肿瘤发展转移中起到一定作用，其参与了调节细胞增殖与分化，ER-α蛋白活性能够在不同信号通路中发挥作用，其中丝裂原活化蛋白与细胞外信号调节蛋白激酶交互作用，促进肿瘤的生长与转移［10］。本研究结果显示，甲状腺乳头状癌组织及淋巴结转移癌组织中ER-α蛋白表达阳性率高于正常甲状腺组织及CLT组织，且淋巴结转移癌组织高于甲状腺乳头状癌，这也说明ER-α蛋白表达对肿瘤的生长和转移有一定的影响。而STIP1与ER-α蛋白表达呈现正相关性，这说明二者可能在甲状腺乳头状癌的发生发展、转移中起到协同作用，通过相关信号通路对肿瘤细胞的增殖，使血管变化发挥重要作用，从而刺激肿瘤细胞增殖和转移的发生。另外，CLT组织中STIP1和ER-α蛋白表达与正常甲状腺组织表达阳性情况比较无统计学意义（P＞0.05），且低于甲状腺乳头状癌组织及淋巴结转移癌组织表达阳性率，这可能表明二者未参与到CLT向甲状腺癌转化和影响的过程之中。

综上所述，本研究通过观察STIPI1与ER-α蛋白在甲状腺乳头状癌中的表达情况及进行相关性分析得出，STIP1与ER-α蛋白在甲状腺乳头状癌中具有高表达的特性，可能参与了甲状腺乳头状癌的发生、发展与转移过程；STIPI1与ER-α蛋白表达呈正相关性，表明二者可能在甲状腺癌的发展中起到一定的协同作用，参与促进甲状腺乳头状癌的淋巴结转移。

［1］李世杰，张大奇，周乐，等.甲状腺乳头状癌淋巴结转移影响因素的探讨［J］.中国实验诊断学，2013，17（12）：2160-2163.

［2］刘淑，高爱博，赵艳茹，等.影响甲状腺乳头状癌临床病理特征的相关因素分析［J］.中华内分泌代谢杂志，2015，31 （11）：941-945.

［3］闫慧娴，谷伟军，杨国庆，等.桥本甲状腺炎与甲状腺乳头状癌关系的临床研究［J］.中华内分泌代谢杂志，2014，30 （4）：302-306.

［4］靳英，王颖，李峰，等.雌、孕激素受体及人类表皮生长因子受体-2在甲状腺乳头状癌中的表达及其临床意义［J］.肿瘤研究与临床，2013，25（5）：339-341.

［5］Miyauchi A，Kudo T，Kihara M，et al.Relationship of biochemically persistent disease and thyroglobulin-doubling time to age at surgery in patients with papillary thyroid carcinoma［J］.Endocrine Journal，2013，60（4）：415-421.

［6］Ahn D，Heo SJ，Park JH，et al.Clinical relationship between Hashimoto's thyroiditis and papillary thyroid cancer ［J］.Acta Oncologica，2011，50（8）：1228-1234.

［7］Meng-HY，Run-SZ，Bei S，et al.Expression and clinical significance of STIP1 in papillary thyroid carcinoma［J］.Tumour Biology：the Journal of the International Society for Oncodevelopmental Biology and Medicine，2014，35（3）：2391-2395.

［8］Cho H，KimS，Shin HY，et al.Expression of stress-induced phosphoprotein1（STIP1）is associated with tumor progression and poor prognosis in epithelial ovarian cancer［J］. Genes，Chromosomes and Cancer，2014，53（4）：277-288.

［9］赵时梅，史琳，罗宇，等.上皮钙黏蛋白、雌激素受体α在子宫内膜癌变过程中的表达［J］.诊断病理学杂志，2015，22 （1）：30-33.

［10］徐书杭，陈国芳，郑全喜，等.17β-雌二醇对人甲状腺干细胞增殖影响的研究［J］.中华内分泌代谢杂志，2014，30 （9）：769-774.

Expression and correlation of stress induced phosphoprotein 1 and estrooggeenn receptor alpha in papillary thyroid carcinoma

CAO Zhong
Department of Pathology，Central Hospital of Huanggang，Huanggang 438000，Hubei，China

Abstracts：ObjectivectiveTo observe the expression of stress-induced phosphoprotein 1（STIPI1）and estrogen receptorα（ER-α）in papillary thyroid carcinoma（PTC），and analyze the correlation between the two proteins and the occurrence，development of PTC.Methodethod81 cases of PTC patients were included in this study，in which there were 81 cases of papillary carcinoma，15 cases with normal adjacent tissues，25 cases of lymphatic metastasis，and 23 cases of chronic lymphocytic thyroiditis（CLT），and then the subjects were stratified as PTC group，control group，metastasis group and CLT group accordingly，the expression and correlation of STIP1 and ER-α of each group were observed.ResultesultThe positive expression rates of STIP1 and ER-α in PTC and metastasis group were higher than those in CLT and control group（P＜0.05）；in PTC group，the expression of STIP1 was positively correlated with ER-α expression，with significant difference observed（r=0.614，P=0.009）.ConclusionusionSTIP1 and ER-α are highly expressed in papillary thyroid carcinoma，which may be involved in the occurrence，development and metastasis process，and there is a positive correlation between the protein expression，facilitating the of lymph node metastasis in papillary thyroid carcinoma.

rdspapillary thyroid carcinoma；STIP1；estrogen receptor alpha protein；chronic lymphocytic thyroiditis

R736. 1

A

10.11877/j.issn.1672-1535.2016.14.05.13

2016-02-23）