原子荧光光度法测定青海海东某地富硒大蒜中微量硒

辛文芳

(青海省地质矿产测试应用中心 , 青海 西宁 810008)

原子荧光光度法测定青海海东某地富硒大蒜中微量硒

辛文芳

(青海省地质矿产测试应用中心 , 青海 西宁 810008)

硒是人体必需的微量元素，而大蒜是最能富硒的植物，青海海东市作为富硒紫皮大蒜的主产地，大蒜中硒含量的测定具有十分重要的意义。用硝酸-高氯酸分解样品，原子荧光光度法测定富硒大蒜中的微量硒。其方法检出限为：0.01μg/g，相关系数为：0.9999，硒的回收率为：90%～105%。该方法具有操作简单、灵敏度高、线性范围宽、快速准确可靠等优点，适合广泛使用。

硒;原子荧光光度法;富硒大蒜

青海省地处高寒、高海拔地区，青海海东市作为紫皮大蒜的主产地被称为高原硒都。与国内其他省份的富硒地区相比，青海省海东市的富硒资源有得天独厚的优势。仅平安区的富硒土地面积接近600亩，富硒区的硒土壤含量平均0.44mg/kg，不仅高于全国土壤背景值，而且达到足硒或中等富硒的水平[1]。在富硒农产品及作物调查方面，在西宁-海东市采集植物样共计52种2886件，家禽家畜样品624件。根据青海东部农业区农畜产品硒含量分类标准，发现富硒作物26种，富硒畜禽及蛋奶产品4种。其中大蒜是最能富硒的植物，因大蒜内硒含量较高具有抗癌[2]，抗重金属中毒等功效，大蒜本身具有重要的生理活性，可有效提高免疫力对各种疾病如：胃癌、心血管疾病，肿瘤等疾病有治疗和预防作用，更有权威专家称"富硒大蒜是地里长出来的抗生素"。硒作为人体必需的微量元素，是维持机体正常生命活动的必需物质，摄入不足或过量均会引起疾病的发生，因此测定食物中硒的含量具有重要意义。目前测定硒的方法有比色法、等离子体质谱法(ICP-MS)、原子荧光光谱法等。原子荧光光度法测定硒已广泛应用于多种领域[3-7]，用氢化物发生-双道原子荧光光度法测定大蒜中的硒含量是一种操作简便、快速、灵敏度高的方法。

方法提要：样品经硝酸和高氯酸的混合酸加热，消解后，在盐酸介质中，将样品中的六价硒还原成四价硒，加入一定浓度的三价铁盐作为掩蔽剂抑制干扰元素，用硼氢化钾做还原剂，将四价硒在盐酸介质中还原成硒化氢，由氩气带入原子化器中进行原子化，在硒特质空心阴极灯照射下，基态硒原子被激发，发射出特征波长的荧光，其荧光强度与硒含量成正比。

1 实验部分

1.1 仪器及工作条件

AFS-8130型双道原子荧光光度计(北京吉天仪器有限公司)，硒编码空心阴极灯。仪器工作条件为：光电倍增管负高压290V；原子化器高度为8mm；硒空心阴极灯电流80mA；载气(氩气)流量400mL/min；屏蔽气(氩气)流量1000 mL/min;读数方式为峰面积，读数延迟时间2.0s，读数时间10s，进样体积2mL。

1.2 标准溶液和主要试剂

硒标准储备液：称取50mg硒(光谱纯)，溶于少量HNO3中，于低温控温电热板上加热溶解，取下，加入3mL HCLO4继续至冒烟，取下冷却，少量去离子水冲洗，再加热至冒烟，取下冷却。移入500mL容量瓶中，准确稀释至刻度，此溶液每毫升含100mg硒。

硒标准溶液：精确吸取Se标准储备溶液，用盐酸(1+1)溶液逐级稀释至ρ(Se)=0.2μg/mL。

盐酸(1+1)：50mL盐酸与50mL水混合

硼氢化钾溶液：(20g/l)称取20g硼氢化钾，，置于250mL烧杯中，加入2g氢氧化钾，加水搅拌溶解后，用水稀释至1000mL，摇匀，临用时配制。

铁盐溶液：称取24.36gFeCl3.6H2O于250mL烧杯中，加入40mL(1+1)盐酸，溶解后，用水稀释至500mL，混匀备用。

所用试剂均为优级纯。实验用水为去离子水。

1.3 样品处理

将紫皮大蒜剥皮后，用去离子水冲洗晾干，打成匀浆，称取5.00g于50mL聚乙烯坩埚中，加入20mL HNO3，2mL HCLO4，盖上表面皿，冷消化过夜，次日于电热板上加热消解，应注意避免炭化，当消解液呈清亮无色为止。蒸发至冒浓白烟至溶液剩余体积1.0mL左右，以保证HNO3驱除干净冷却，取下用少量水冲洗杯壁，加入8.0mL HCl继续加热消解至溶液变为清亮无色并伴有白烟出现，冷却，加入4滴FeCl3溶液，用水定容至25mL比色管中，摇匀待测。同时做标准物质和空白试验。

2 结果与讨论

2.1 样品处理方法：

Se属于易挥发元素，常用HNO3-HCLO4，HNO3-H2SO4，HNO3-H2SO4-HClO4混合酸湿法分解，因H2SO4冒烟需要较温度，Se易挥发，导致含量偏低，故一般不用后面两种方法。由于少量HNO3会使Se的荧光强度下降，，所以一定要注意HClO4冒烟温度，过高过低都会影响测量结果偏低，一般将电热板温度控制在210℃左右，以保证HNO3驱除干净。故采用HNO3-HClO4分解生物样品，最后保留1mL体积，切忌，不可蒸干，这样能大大降低Se的挥发损失。另外Se定容后要放置1个小时才能上机检测，以防止Se还原不完全。

2.2 标准曲线及检出限：

分别吸收0.2μg/mL的Se标准溶液0.0mL、0.25mL、0.50mL、1.0mL、2.5mL、5.0mL、7.5 mL于100mL容量瓶中，各加入40mL盐酸，加入4mL铁盐溶液,用水稀释至刻度，摇匀，放置30min，配置成0.00、0.50、1.00、2.00、5.00、10.0、15.0ng/mL硒标准溶液，在选定的AFS仪器工作条件下测定荧光强度，标准曲线呈线性关系，相关系数为0.9999，如图1所示。在选定的试验条件和测定范围内，对空白样品溶液测定12次，计算得出硒的检出限(3s/k)为0.01μg/g。

图1 标准曲线

2.3 载气、屏蔽气流量

由于仪器长时间工作，气体流量会变小，不稳定，使灵敏度降低，记忆效应增强，故应在检测之前检查载气和屏蔽气的实际流量和设定流量是否一致。综合试验结果，确定测定硒时载气流量为400mL/min，屏蔽气流量为1000mL/min。

2.4 硼氢化钾浓度影响

试验结果表明，随着KBH4浓度增加，荧光强度逐渐增大，但KBH4浓度增加到一定程度时，再增加浓度时，荧光强度没多大变化，为了减少不必要的浪费，本试验确定还原剂KBH4溶液的浓度为20g/l。

2.5 干扰离子的抑制：

Cu,Co,Ni,As,Sb,Zn,Ag等元素与KBH4反应能生产氢化物，也能生成金属硼化物而干扰Se的测定，当溶液中上述干扰离子浓度较高时，会使测定结果偏低，经多次试验表明，当FeCl3溶液加入量为10mg/mL时，能有效抑制干扰离子，使测定Se的结果更加稳定准确。

2.6 方法回收率

采用加标回收试验测定其回收率，结果见表1。

表1 加标回收试验

3 样品分析结果：

按样品制备和实验方法，在选定的仪器工作条件下，应用本方法测定国家一级生物标准物质GBW10012(玉米)，GBW10015(菠菜)和4个大蒜样品，其结果见表2 。标准物质测定值和标准值相吻合。

表2 样品分析结果

表2(续)

大蒜本身硒含量较一般食物高，营养也丰富，对人体保健，疾病治疗具有重要作用。本文采用氢化物发生-双道原子荧光光度法测定富硒大蒜中的微量硒，选择了最佳分析条件，并严格进行了质量控制，其测定结果是准确可靠的。故本方法实用性强，适合广泛使用。

[1] 张永琴.基于营销理念的青海省平安县富硒产业发展分析[J].科学与财富2013(7)：229.

[2] 哈 蜻,孙汉文,康维钧. 氢化物发生一原子荧光法测定大蒜中的硒[J].食品科学,2007,28(2)：247-249.

[3] 北京海光仪器公司.原子荧光分析方法手册[M].北京: 北京海光仪器公司,2001.

[4] 彭 琨.氢化物原子荧光法测定食品中的硒[J].理化检验:化学分册,2002，36(12)：557-559．

[5] 王守兰，陈永刚.荧光光度法测定富硒米、富硒茶中痕量硒含量[J].光谱实验室1998，15(1)：34-36．

[6] 关 明, 熊敏波，翁灼斌，等.氢化物发生一原子荧光光谱法测定大蒜中砷和硒[J].理化检验-化学分册2011(7)：802-804.

[7] 周姣花, 汪建宇，钟莅湘，等.氢化物发生-原子荧光光谱法测定生物样品中的硒[J].岩矿测试2011,30(4)：214-216.

(本文文献格式：辛文芳.原子荧光光度法测定青海海东某地富硒大蒜中微量硒[J].山东化工，2016，45(04)：52-53，58.)

Determination of Trace Selenium in Se-enriched Garlic Somewhere Haidong City of Qinghai Province by Atomic Fluorescence Spectrometry

Xin Wenfang

(Rock and Mineral Test Application Research institute of Qinghai,Xining, Qinghai 810008，China)

Selenium are essential trace elements, and is the most can Se-enriched garlic plant, Haidong city of Qinghai province as selenium-rich purple skin garlic producers, the determination of selenium in garlic has the very vital significance。The samples were decomposed with HNO3-HClO4, a method for determination of trace selenium in garlic by atomic fluorescence spectrometry . The detection limit of the method was 0.01ug/g, correlation coefficient was 0.9999, the recovery rate of selenium as follows: 90% ～ 105%.

selenium; atomic fluorescence spectrometry ;Se-enriched garlic

2016-01-19

辛文芳(1975—)，女，大学本科，工程师，从事光谱类微量分析。

O657.31

A

1008-021X(2016)04-0052-02