中段尿标本283例培养分离大肠埃希菌的耐药性分析

杨新原，忽胜和，王源，马霞（大理学院附属医院检验科，云南大理671000）

中段尿标本283例培养分离大肠埃希菌的耐药性分析

杨新原，忽胜和，王源，马霞
（大理学院附属医院检验科，云南大理671000）

目的了解该院中段尿标本培养分离的大肠埃希菌耐药情况，为临床治疗尿路感染患者提供经验用药依据。方法对该院2014年6月至2015年5月283例尿路感染患者清洁中段尿标本培养分离所得大肠埃希菌的药敏试验结果进行回顾性分析。结果大部分β内酰胺类、喹诺酮类抗菌药物及四环素、复方磺胺甲恶唑、庆大霉素耐药率比较高；碳青霉烯类、拉氧头孢类、头霉烯类、四代头孢菌素及部分加β内酰胺类酶抑制剂的复合制剂、部分三代头孢菌素耐药率较低。结论对该院就诊的能推断病原菌是大肠埃希菌的尿路感染患者，可结合病情，先依据该文分析所得的耐药率进行经验性治疗。

尿分析；大肠杆菌；药物耐受性

大肠埃希菌引起的尿路感染是最主要的感染性疾病之一［1］；在临床工作中，中段尿标本培养分离率最高的病原菌是大肠埃希菌。为了解本院中段尿标本培养分离所得大肠埃希菌的耐药性，向临床治疗尿路感染患者提供经验用药依据，对本院283例中段尿标本培养分离所得大肠埃希菌的药敏试验结果进行回顾性分析，并报道如下。

1　资料与方法

1.1一般资料对本院2014年6月至2015年5月收治的283例尿路感染患者（其中男133例，女150例；年龄1～93岁，中位年龄44岁）清洁中段尿标本分离所得大肠埃希菌的药敏试验结果进行回顾性分析。所分析的菌株均为非重复菌株。

1.2方法

1.2.1仪器与试剂主要采用法国梅里埃VITEK2-Compact全自动细菌鉴定、药敏分析仪及其配套的鉴定、药敏卡。

1.2.2质控菌株用3个标准菌株：大肠埃希菌ATCC25922、金黄色葡萄球菌ATCC25923、铜绿假单胞菌ATCC27853对所用培养基及药敏试验每周进行1次质控。

1.2.3检验方法严格按照《全国临床检验操作规程》留取标本和试验操作。培养结果排外污染后进行细菌计数，革兰阴性杆菌大于或等于105cfu/mL时继续进行细菌鉴定和药敏试验［2］；必要时，结合临床诊断、抗菌药物使用情况、尿液酸碱度、尿沉渣镜检白细胞数及上皮细胞数、尿干化学亚硝酸盐试验是否阳性等相关信息，综合考虑和判定后，再决定是否进行细菌鉴定和药敏试验［3］。

1.3数据处理应用WHONET5.6统计软件进行数据分析。

2　结果

2.1283例中段尿标本中大肠埃希菌分离情况283例分离大肠埃希菌的中段尿标本中女性患者比例略多［53.00%（150/283）］；绝大多数来自泌尿外科［55.48% （157/283）］；产超广谱β内酰胺酶（ESBL）大肠埃希菌为89株（31.45%）；产头孢菌素酶（AMPC）大肠埃希菌仅3株（1.06%）；产碳青霉烯酶（KPC）大肠埃希菌未检出。

2.2283例中段尿标本培养分离的大肠埃希菌耐药情况283例中段尿标本培养分离的大肠埃希菌，对28种常见抗菌药物的耐药率见表1。氨苄西林耐药率最高，超过90.00%；美洛西林次之，为86.96%；四环素耐药率也高，将近80.00%；哌拉西林、头孢唑啉、头孢呋辛、氨苄西林-舒巴坦、复方磺胺甲恶唑、头孢曲松耐药率较高，均在60.00%以上；环丙沙星、左氧氟沙星、庆大霉素耐药率近50.00%；氨曲南耐药率接近38.00%。耐药率较低的抗菌药物依次有：厄他培南、美罗培南、亚胺培南、拉氧头孢、哌拉西林-他唑巴坦、阿米卡星、头孢替坦、呋喃妥因、头孢美唑、头孢哌酮-舒巴坦、头孢西丁、头孢吡肟、妥布霉素、头孢唑肟、头孢他啶。

表1　283例中段尿标本培养分离的大肠埃希菌耐药情况（n=283）

3　讨论

大肠埃希菌是肠杆菌科埃希菌属的代表菌种，也是人体肠道中正常菌群的主要组成部分。其中有5类致腹泻性大肠埃希菌（包括肠毒素型、肠致病型、肠侵袭型、肠出血型、肠凝聚型大肠埃希菌）能致使肠道内感染；其余菌株都是异位寄生引起肠道外感染。在泌尿道尿道口的上皮细胞处常常有大肠埃希菌等兼性厌氧菌定植，当人体发生某些变化会导致定植菌繁殖引起尿路感染；特别是有K抗原和菌毛的大肠埃希菌菌株更易导致泌尿系统感染［4-6］。

无论是非复杂性上尿路感染或是下尿路感染，最常见病原菌均是大肠埃希菌；几乎所有急性单纯性下尿路感染初发病例均是大肠埃希菌导致的感染［7］；至于复杂性尿路感染，大肠埃希菌也是常见的病原菌［1］。因此，定期统计分析并发布该类患者尿标本中所检出大肠埃希菌的耐药情况具有重要的临床价值。

从表1中显示，大部分β内酰胺类抗生素如青霉素类、一代头孢菌素、二代头孢菌素、部分三代头孢菌素、部分加β内酰胺类酶抑制剂的复合制剂耐药率均在60.00%以上；单环类氨曲南耐药率接近38.00%；耐药率较低的β内酰胺类抗生素依次主要有碳青霉烯类、拉氧头孢类、头霉烯类、四代头孢菌素及部分加β内酰胺类酶抑制剂的复合制剂、部分三代头孢菌素；其中碳青霉烯类、拉氧头孢类耐药率为0。究其原因主要是大肠埃希菌在β内酰胺类抗生素选择性压力作用下可以产生各种β内酰胺酶（包括ESBL、AMPC、KPC）引起药物灭活，特别是ESBL阳性菌株往往携带较大染色质长度的耐药质粒，更容易获得多种耐药基因［8-9］。在我国大肠埃希菌中，CTX-M型ESBL最流行，TEM型ESBL也有广泛分布，此外，OXA、CMT、PER、VEB型酶有较少分布。大肠埃希菌也可以携带不被诱导的持续高水平表达的染色体AMPC基因，从而表现出耐药性。本文中未发现产KPC的大肠埃希菌菌株，这可能和KPC主要在肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌和不动菌属分布有关；但在大肠埃希菌中也已有KPC-2、GES-5、IMP、VIM酶被发现的少数报道［8］。

从表1中可以看出，喹诺酮类中环丙沙星和左氧氟沙星耐药率将近50.00%，其原因主要是大肠埃希菌DNA解旋酶及拓扑异构酶Ⅳ结构发生改变，致使喹诺酮类药物不能与之结合导致耐药［10］。氨基糖苷类中的庆大霉素耐药较高，为46.32%，其耐药主要是因为大肠埃希菌产生了一种或几种氨基糖苷类钝化酶、修饰酶，从而降低了氨基糖苷类药物与靶位核糖体的亲和力［6，10］；同属于氨基糖苷类的阿米卡星和妥布霉素耐药率较低，特别是阿米卡星耐药率仅为2.92%，这可能与阿米卡星、妥布霉素、庆大霉素属于不同来源的氨基糖苷类药物有关。

另外，本研究中四环素的耐药率将近80.00%，而复方磺胺甲恶唑的耐药率也大于60.00%；前者与大肠埃希菌的药物主动转运系统等耐药机制有关，后者则与大肠埃希菌获得了从外界环境直接摄取叶酸的能力有关［4，6］。合成的硝基呋喃类抗菌药物呋喃妥因耐药率仅为4.46%，与有关报道一致［11］，提示其对大肠埃希菌的抗菌活性仍较高。

综上所述，按照国家卫计生委2015年版《抗菌药物临床应用指导原则》，对本院就诊的能推断病原菌是大肠埃希菌的尿路感染患者，可依据以上分析所得的抗菌药物耐药率，结合患者病情，先对患者进行合理有效的经验治疗；再在获知中段尿标本培养及药敏结果后，结合之前的治疗效果调整用药方案［12］。

［1］汪复.抗菌药物临床应用指南［M］.北京：人民卫生出版社，2008：200-205.

［2］叶应妩，王毓三，申子瑜.全国临床检验操作规程［M］.3版.南京：东南大学出版社，2006：743-744.

［3］丛玉隆.检验医学［M］.北京：人民卫生出版社，2009：382-384.

［4］马迪根MT，马丁克JM.BROCK微生物微生物学［M］.李春明，杨文博译.北京：科学出版社，2009：1026-1057.

［5］陈孝平，汪建平.外科学［M］.8版.北京：人民卫生出版社，2013：727-734.

［6］倪语星，尚红.临床微生物学与检验［M］.4版.北京：人民卫生出版社，2007：107-533.

［7］汪复.感染性疾病与抗微生物治疗［M］.3版.上海：复旦大学出版社，2008：301-307.

［8］丛玉隆，徐英春，王瑶.细菌与细菌耐药分册［M］.北京：人民军医出版社，2008：27-31.

［9］杨朵，王占伟，郭宇，等.肺炎克雷伯菌药敏分析及其超广谱β内酰胺酶基因分型研究［J］.中华检验医学杂志，2011，34（7）：612-616.

［10］汪佛山，周玉球，潘广玲，等.儿科患者大肠埃希菌喹诺酮类与氨基糖苷类耐药性的监测［J］.中华检验医学杂志，2011，34（9）：824-825.

［11］郑波，吕媛.卫生部全国细菌耐药监测网2011年男性尿标本来源细菌耐药监测［J］.中国临床药理学杂志，2012，28（12）：893-898.

［12］国家卫生计生委办公厅.抗菌药物临床应用指导原则［Z］.2015-07-24.

10.3969/j.issn.1009-5519.2016.08.036

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（2016-01-10）