黄芪注射液对病毒性心肌炎患儿Th1/Th2平衡的影响

李军红，殷小成（.衡阳市妇幼保健院儿科重症监护室，湖南400；.南华大学附属第一医院，湖南衡阳400）

·论著·

黄芪注射液对病毒性心肌炎患儿Th1/Th2平衡的影响

李军红1，殷小成2
（1.衡阳市妇幼保健院儿科重症监护室，湖南421001；2.南华大学附属第一医院，湖南衡阳421001）

目的探讨黄芪注射液对病毒性心肌炎（VMC）患儿Th1/Th2平衡的影响。方法选取2014年1月至2015年12月在衡阳市妇幼保健院及南华大学附属第一医院儿科住院的VMC患儿68例，随机分为常规组和黄芪组，各34例。常规组给予常规治疗，黄芪组在常规治疗基础上加用黄芪注射液，治疗14 d后，评价两组患儿临床疗效，收集治疗前后血清，通过酶联免疫吸附法（ELISA）测定Th1型细胞因子干扰素-γ（IFN-γ）及Th2型细胞因子白介素4（IL-4）浓度，并计算IFN-γ/IL-4比值，另取同期30例健康儿童作为正常对照组。结果黄芪组总有效率高于常规组，差异有统计学意义（P＜0.05）。与正常对照组比较，常规组与黄芪组血清IFN-γ浓度、IFN-γ/IL-4比值均明显增加，差异均有统计学意义（P＜0.01）；而血清IL-4浓度明显减少，差异有统计学意义（P＜0.01）；两组治疗后血清IFN-γ浓度、IFN-γ/IL-4比值较治疗前均下降，差异均有统计学意义（P＜0.01）；血清IL-4浓度较治疗前升高，差异有统计学意义（P＜0.01）；相对于常规组治疗后，黄芪组治疗后血清IFN-γ浓度、IFN-γ/IL-4比值均降低，差异均无统计学意义（P＞0.05），但血清IL-4浓度升高，差异有统计学意义（P＜0.05）。结论黄芪注射液对VMC患儿有良好的治疗作用，可引起Th1/Th2平衡向Th2偏移，促进受损心肌的恢复。

黄芪；心肌炎；病毒性疾病；干扰素Ⅱ型；白介素4

【Abstract】Objective To explore the effects of Radix Astragali Injection on the Th1/Th2 balance in child patients with viralmyocarditis（VMC）.M ethods Sixty-eightcases of VMC in our hospitals from January 2014 to December 2015 were random ly divided into the conventional group and Astragali Radix group，34 cases in each group.The conventional group was treated with the conventional therapy.Based on this，the Radix Astragali group was added with Radix Astragali Injection.After14 d treatment，the clinical curative effects were evaluated.Serum was collected before and after treat ment.ELISA was used to detect the concentrations of Th1 cytokine interferon-γ（IFN-γ）and Th2 cytokine interleukin-4（IL-4），and then the ratio of IFN-γto IL-4was calculated.In addition，30 healthy children served as normal control group in the same period.Results The total effective rate in Radix Astragali group was significantly higher than thatin the conventional group with statistically significant difference（P＜0.05）. In the comparison with the normal control group，serum IFN-γconcentration and the ratio of IFN-γto IL-4 in the conventional group and Radix Astragali group were significantly increased，while serum IL-4 concentration was significantly decreased，the differences were statistically significant（P＜0.01）.The serum IFN-γconcentration and the ratio of IFN-γto IL-4 after treatment in both Radix Astragali group and conventional group were decreased compared with before treatment，butserum IL-4 concentration was increased，the differences were statistically significant（P＜0.01）.Moreover，in the comparison with the conventional group after treatment，serum IFN-γconcentration and the ratio of IFN-γto IL-4 after treatment in the Radix Astragali group were decreased，while serum IL-4 concentration was increased（P＜0.01）.Comparing with the conventional group after treatment，the serum IFN-γ concentration and the radioof IFN-γto IL-4both decreased in the Astragali group after treatment with out statistically significant difference（P＞0.05），while theserum IL-4 concentration increased with statistically significant difference（P＜0.05）.Conclusion Radix Astragali Injection has a better curative effect in the treatment of VMC children patients，can cause the shift of Th1/Th2 balance to Th2，thereby promotes the recovery of impaired myocardium.

【Key words】Astragalus membranaceus；Myocarditis；Virus diseases；Interferon TypeⅡ；Interleukin-4

病毒性心肌炎（viralmyocarditis，VMC）属于儿科常见病，其发病机制主要与病毒的直接损伤作用和机体的免疫反应紊乱有关［1］。Th细胞主要分为Th1、Th2细胞两大类型，其中Th1细胞产生干扰素-γ（interferon-γ，IFN-γ）、肿瘤坏死因子-β、白介素2（interleukin，IL-2）、IL-12、IL-18等细胞因子，Th2细胞产生IL-4、IL-5、IL-10、IL-13、单核细胞趋化蛋白-1等细胞因子。在生理状况下，Th1、Th2型细胞因子处于一种动态平衡状态，二者相互影响、相互作用，共同调控机体的免疫应答。近年来，有研究表明，当Th1型细胞因子占优势时，即发生Th1/Th2型细胞因子失衡，产生过度炎性反应，与VMC的发生、发展密切相关［2］。黄芪注射液是从豆科植物蒙古黄芪或荚膜黄芪的干燥根中提取的一种中药制剂，已被广泛用于VMC的治疗，并显示出较好的疗效［3-4］。然而，黄芪注射液的抗VMC作用是否和其调整Th1/Th2型细胞因子平衡有关尚不清楚。因此，作者于2014年1月至2015年12月采用黄芪注射液治疗VMC患儿，通过酶联免疫吸附法（enzyme linked immunosorbentassay，ELISA）检测治疗前后血清IFN-γ、IL-4浓度，旨在进一步阐明黄芪注射液抗VMC的机制，现报道如下。

1　资料与方法

1.1一般资料选取2014年1月至2015年12月在衡阳市妇幼保健院及南华大学附属第一医院儿科住院的VMC患儿68例，诊断均符合中华医学会儿科学分会心血管学组制定的小儿VMC诊断标准［5］。按照随机数字表法分为常规组和黄芪组，各34例。常规组患儿中男21例，女13例；年龄4～12岁，平均（8.54±4.38）岁；病程3～8 d，平均（5.26±2.79）d。黄芪组患儿中男19例，女15例；年龄5～13岁，平均（9.14±5.26）岁；病程4～9 d，平均（6.21±3.17）d。另选同期在衡阳市妇幼保健院进行健康体检的30例正常儿童作为正常对照组，其中男17例，女13例；年龄4～14岁，平均（8.36±4.59）岁。三组患儿年龄、性别及常规组与黄芪组病程、病情严重程度比较，差异均无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。

1.2方法

1.2.1治疗方法常规组与黄芪组均给予综合治疗，包括卧床休息、药物治疗（如维生素C、能量合剂、维生素E、辅酶Q10等）；在此基础上，黄芪组患儿再采用黄芪注射液（成都地奥九鸿制药厂生产，批号：0210094）进行治疗，将5～10mL黄芪注射液加入5%葡萄糖液100～150mL中，静脉滴注，每天1次，14 d为1个疗程，疗程结束后判断疗效。

1.2.2疗效判定VMC患儿治疗结束后进行疗效判断，显效：临床表现消失，心电图及心肌酶谱恢复正常；有效：临床表现消失，心电图及心肌酶谱明显好转；无效：疗程结束，临床表现暂时消失，心电图及心肌酶谱异常、无明显好转或反复［6］。总有效率=（显效例数+有效例数）/总例数×100%。

1.2.3标本收集VMC患儿分别于入院当时及疗程结束后次日清晨空腹抽取肘静脉血3mL，正常对照组患儿于体检当天空腹抽取肘静脉血3mL。立即送至检验科，以1 500 r/min离心10min，提取上层血清，-80℃冰箱保存备用。

1.2.4ELISA检测血清IFN-γ、IL-4浓度采用双抗体夹心ELISA检测血清IFN-γ、IL-4浓度，ELISA试剂盒由深圳晶美生物工程公司提供，所有操作步骤严格按试剂盒说明书进行。

1.3统计学处理应用SPSS16.0统计软件进行数据分析，计量资料以±s表示，采用单因素方差分析；计数资料以率或构成比表示，采用χ2检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2　结果

2.1常规、黄芪组患儿临床疗效比较常规组、黄芪组总有效率分别为75.53%、94.12%，两组比较，差异有统计学意义（χ2=19.83，P＜0.05），见表1。

表1　常规、黄芪组患儿临床疗效比较［n（%）］

2.2三组血清IFN-γ、IL-4浓度及IFN-γ/IL-4比较常规组与黄芪组血清IFN-γ浓度、IFN-γ/IL-4比值均高于正常对照组，差异均有统计学意义（P＜0.01）；而血清IL-4浓度低于正常对照组，差异有统计学意义（P＜0.01）；治疗前，黄芪组和常规组上述指标无明显变化，差异无统计学意义（P＞0.05）；治疗后，两组血清IFN-γ浓度、IFN-γ/IL-4比值均较治疗前下降，差异有统计学意义（P＜0.01）；血清IL-4浓度较治疗前升高，差异有统计学意义（P＜0.01）；相对于常规组治疗后，黄芪组治疗后血清IFN-γ浓度、IFN-γ/IL-4比值进一步减少，差异无统计学意义（P＞0.05），血清IL-4浓度进一步增加，差异有统计学意义（P＜0.05），见表2。

表2　三组血清IFN-γ、IL-4浓度及IFN-γ/IL-4比较（±s）

表2　三组血清IFN-γ、IL-4浓度及IFN-γ/IL-4比较（±s）

注：与正常对照组比较，aP＜0.01；与同组治疗前比较，bP＜0.05；与常规组治疗后比较，cP＜0.05。

正常对照组（n=30）常规组（n=34）治疗前治疗后指标IFN-γ（pg/mL）IL-4（pg/mL）IFN-γ/IL-4 25.68±3.46 116.39±18.75 0.22 84.79±12.36a39.01±4.72a2.17a55.42±6.57b71.63±10.89b0.77b黄芪组（n=34）治疗前治疗后86.29±13.15a38.25±4.36a2.26a34.18±4.05bc95.32±14.38bc0.36bc

3　讨论

黄芪是临床上最常用的中成药物之一，具有增强机体免疫功能、保肝、利尿、抗衰老、抗应激及抗感染等多种药效作用，而黄芪注射液是以黄芪为主要成分制成的中药注射制剂，其主要成分包括黄酮、黄芪皂苷及黄芪多糖。大量临床与动物研究已证实黄芪注射液有良好的抗VMC作用，其机制包括抗病毒、正性肌力、抗氧化应激、调节免疫、扩张血管平滑肌及改善微循环等［7］。本研究结果表明，黄芪组总有效率明显高于常规组，且在治疗过程中未发现任何不良反应，与文献报道相符［3-4］，表明黄芪注射液治疗VMC安全有效。

尽管VMC的发病机制尚未完全阐明，但细胞因子的异常表达及其引起的细胞因子网络平衡失调在VMC的发生、发展中占主导地位［8］。IFN-γ、IL-4分别为Th1、Th2型细胞因子的代表，二者间存在相互拮抗作用。当IFN-γ/IL-4比值升高时，即可促进VMC的发生、发展，而IFN-γ/IL-4比值降低则缓解VMC［9-10］。本研究结果显示，常规组与黄芪组VMC患儿血清IFN-γ浓度、IFN-γ/ IL-4比值均明显高于正常对照组，而血清IL-4浓度明显低于正常对照组，提示VMC患儿中存在Th1/Th2平衡向Th1偏移。在炎症早期，Th1细胞在T细胞辅助细胞介导的心肌损伤中占主导地位，在炎性细胞因子的作用下，血管内皮细胞表面的配体表达上调，选择蛋白与选择蛋白配体的相互作用导致Th1细胞在炎症病灶局部聚集，促进活化B细胞增生及抗体的产生，并增强自然杀伤细胞的杀伤作用，从而导致心肌细胞炎性损伤［11］。经14 d治疗后，常规组与黄芪组血清IFN-γ浓度、IFN-γ/ IL-4比值均较治疗前下降；血清IL-4浓度较治疗前升高，且黄芪组治疗后血清IFN-γ浓度、IFN-γ/IL-4比值均较常规组治疗后进一步降低，血清IL-4浓度则进一步升高，说明黄芪注射液有助于纠正VMC患儿Th1/Th2平衡失调，重新恢复Th2型细胞因子的优势地位，进而减少心肌细胞炎性损伤。

综上所述，Th1/Th2平衡失调与VMC的发生、发展密切相关，黄芪注射液对VMC患儿有良好的治疗作用，其机制可能与纠正Th1/Th2平衡失调并向Th2偏移有关，这些作用机制的揭示为指导临床用药提供了可靠的药理学依据。

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Effects of Radix Astragali Injection onbalance of Th1/Th2 in child patientsw ith viralmyocarditis

Li Junhong1，Yin Xiaocheng2

（1.Pediatric Intensive Care Unit，Hengyang Municipal Maternal and Child Health Care Hospital，Hengyang，Hunan 421001，China；2.Department of Pediatrics，FirstAffiliated Hospital，University of South China，Hengyang，Hunan 421001，China）

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B

1009-5519（2016）10-1451-03

李军红（1973-），本科，主要从事儿科重症研究工作。

（2016-04-02）