献血浆人群血浆ANA检测结果的临床研究

张萍，刘爽，谭立明，肖扬婧卿，林美芳，吴洋，石莉，罗，陈娟娟，李华（、分宜县中泰单采血浆有限公司，江西 分宜6600；、南昌大学公共卫生学院0级，江西 南昌0006；、南昌大学第二附属医院检验科，江西 南昌0006）

献血浆人群血浆ANA检测结果的临床研究

张萍1，刘爽2，谭立明3，肖扬婧卿2，林美芳2，吴洋3，石莉3，罗3，陈娟娟3，李华3
（1、分宜县中泰单采血浆有限公司，江西 分宜336600；2、南昌大学公共卫生学院2012级，江西 南昌330006；3、南昌大学第二附属医院检验科，江西 南昌330006）

目的 探讨献血浆对人体健康的影响，献血浆与自身抗核抗体（ANA）检测结果的相关性。方法 采用间接免疫荧光法（IIF）检测54例首次献浆者，44例5年献浆史者，53例10年献浆史者的血浆ANA，对其结果进行回顾性分析。结果 54例首次献浆者血浆ANA阳性率31.5%，44例5年献浆史者血浆ANA阳性率31.8%，53例10年献浆史者血浆ANA阳性率28.3%，三组献浆者阳性率比较，P＞0.05。结论 不同献浆次数的人群其血浆中ANA检测结果阳性率无统计学差异，多次献浆与AID的发生无明显关联。

献血浆；抗核抗体（ANA）；自身免疫性疾病

血液制品在现代医学中应用广泛，用于治疗疾病、拯救生命，其生产用原料的唯一来源是人血浆［1］。目前，原料血浆供应不足，国家相关部门鼓励各地设置审批单采血浆站，积极扩大献血浆人群。血浆是血液的重要组成成分，约占血液的55%，其作用主要是运载血细胞，运输维持人体生命活动所需的物质和体内产生的废物等。抗凝血经离心后上层淡黄色液体即为血浆。单采血浆术是通过单采血浆机及一次性采血浆耗材自动分离出血浆然后把血细胞回输给献浆者的过程，是国内外取得人血浆的主要方式［2］。这种对血液的操作是否会导致抗核抗体（antinuclear antibody，ANA）的出现使其阳性率增加从而导致自身免疫性疾病（autoimmune disease，AID）的发生发展至今尚无研究。本研究通过检测并比较首次献浆者、5年献浆史者、10年献浆史者的血浆ANA阳性率，探讨持续献血浆是否会增加AID的患病率。

1　材料与方法

1.1材料来源54例首次献血浆者，44例5年献浆史者，53例10年献浆史者，均来自江西省分宜县中泰单采血浆有限公司，均按照《中华人民共和国药典》（2015版）中献血浆者体检及化验标准诊断合格。54例首次献浆者男16例，女38例，年龄18～54岁，平均39.76±9.47岁。44例5年献浆史者男5例，女39例，年龄25～52岁，平均44.30±5.60岁。53例10年献浆史者男4例，女49例，年龄37～54岁，平均47.32±4.02岁。三组年龄差异有统计学意义，首次组与10年组年龄比较P＜0.01，首次组与5年组、5年组与10年组年龄比较0.01＜P＜0.05。不同年龄组年龄差异较大的原因可能是献血浆者年龄要求为18～55周岁，十年献浆史者平均年龄最大，首次献浆史者平均年龄最小，且献血浆人群变动性较大，能够长期坚持献血浆者数量较少，其血浆标本不易获得。性别构成比首次和五年，五年和十年差异无统计学意义P＞0.05，首次和十年性别构成比差异有统计学意义P＜0.05。

1.2标本的采集标本均来自江西省分宜县中泰单采血浆有限公司，体检、检验合格者经单采血浆机采集血浆后，留取血浆样品-20℃冷冻保存待检［3］。

1.3自身抗体检测采用间接免疫荧光法 （IIF）以Hep-2细胞和猴肝组织为基质检测ANA，应用德国欧蒙医学实验诊断有限公司生产的免疫荧光试剂。操作严格按本室作业指导书及说明书进行。检验基本流程为待检标本解冻恢复至室温，1：100稀释，检查加样板，生物载片恢复至室温，设阴阳对照、质控对照，加25μl待测样本至加样板每一反应区。再将生物薄片盖于加样板的凹槽里，室温孵育30min，冲洗；避光加荧光素25μl，室温孵育30min，再冲洗，封片镜检。

1.4统计学方法采用SPSS 17.0统计软件进行数据分析，三组计数资料用χ2检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2　结果

2.1首次、5年及10年献浆史者的血浆ANA检测阳性率多组间两两比较P＞0.05，按α=0.05的检验水准，差异无统计学意义，详见表1。

表1　IIF检测ANA结果

2.2首次、5年、10年献血浆者血浆ANA阳性结果的荧光核型具体分类详见表2。

3　讨论

ANA是一组将自身各种细胞核成分如核酸、组蛋白、非组蛋白、磷脂及各种蛋白酶等作为靶抗原的自身抗体总称。现在对于ANA靶抗原的理解，已由传统的细胞核扩大到整个细胞，在细胞质和细胞器中也有存在［4］。其化学本质主要是IgG，ANA主要存在于血清中，在大多数AID中均可呈阳性，且滴度较高［5］。ANA检测在临床AID的诊断中具有重要的参考价值。有研究表明未经治疗的系统性红斑狼疮（systemic lupus erythematosus，SLE）和混合性结缔组织病（mixed connective tissue disease，MCTD患者几乎90%以上都有ANA［6］，但ANA检测缺乏特异性，不能明确抗体具体类型，只能作为过筛试验。ANA阳性者进一步检测各亚类ANA抗体对明确诊断、临床分型、病情观察、预后及治疗评价有重要意义。国外有研究称ANA检测的用途是以预防疾病为目的的早期病例发现而不仅仅是以治疗为目的的疾病诊断方式［7］。因为任何抗体检测的敏感性、特异性有一定范围，且存在一定的假阳性率，假阴性率，临床上有关于ANA检测假阴性经多滴度稀释后显阳性的病例报导［8］。因此诊断AID，不能单纯根据抗体，而应以临床表现为基础，结合受检者的病史、体征、实验室检查结果等做出诊断。

表2　首次、5年、10年献浆者血浆ANA荧光图形

根据表1的统计结果可知首次献血浆者、5年献浆史者、10年献浆史者血浆ANA检测结果阳性率两两比较P＞0.05，差异无统计学意义。统计结果表明持续献血浆与促进ANA的出现及AID的发生无关。

根据表2可知三组血浆ANA阳性时的荧光核型。首次和5年组中ANA荧光斑点型（颗粒型）所占比例最高，与王晓东等研究中的结果相同［9］，分别是35.29%和21.43%。三组均有胞浆阳性型，说明抗核抗体的靶抗原不仅仅局限于细胞核，在细胞质也有。三组均有抗有丝分裂特异性结构着丝点和纺锤体的抗体阳性，其中首次献浆者抗着丝点抗体阳性1例，抗纺锤体抗体2例；5年献浆史者抗着丝点抗体阳性2例，抗纺锤体抗体阳性2例；10年献浆史者抗着丝点抗体阳性1例，抗纺锤体抗体阳性1例。有研究报道着丝点型抗体在SLE、PBC、硬皮病、重叠综合征中均有检出，不仅是在经典的硬皮病中表达，具有较宽的疾病谱［9］。纺锤体在真核细胞有丝分裂中起重要作用，主要是由大量微管组成的细胞器，临床上有关于小细胞肺癌患者抗纺锤体抗体检测结果的分析，认为检测抗纺锤体抗体对小细胞肺癌的诊断有意义［10］。首次和五年组中均有一例抗高尔基体抗体阳性者，其原因和意义有待进一步研究。

献血浆是利用全自动单采血浆机，经过全血采集、自动分离出血浆，把血细胞还输给本人的一种安全的，对健康没有损害的过程。献血浆者每次采集的血浆中所含蛋白质的量约为40克，其余的90%均为水分。失去的水分通过自身的身体调节及适当饮水，2h内就可得到恢复，蛋白质也可在2～3日内恢复到原有水平。虽然单采血浆需要经过采血-分浆-还输血细胞等多个步骤，但其是使用全自动单采血浆机及成套一次性使用采血浆器材操作，并不会造成病毒感染，是安全可靠的，1998年国家卫生部严格推行单采血浆机采集血浆以来，无1例交叉感染报道［11］。本次研究通过比较不同献血浆史者血浆ANA阳性率来探讨持续献血浆与ANA的出现及AID发生是否有关。首次献血浆者ANA阳性率为31.48%，5年献浆史者为31.82%，10年献浆史者为28.30%。通过阳性率比较发现差异无统计学意义，P＞0.05。但其ANA阳性率均较高，其具体原因有待进一步研究。本次研究的不足之处是未设置健康未献血浆组，抽取其静脉血抗凝离心后取血浆检测ANA，探讨其阳性率与献血浆者的差别，以提供将ANA检测列入献血浆者健康体检项目的统计学依据。

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R193.3，R457.1+4，R446.62

A

1674-1129（2016）04-0532-03

10.3969/j.issn.1674-1129.2016.04.043

江西省科技厅重点科技成果转移转化计划计划支持项目（编号：20151BBI90047）

谭立明。

（2016-04-06；

2016-06-22）