CD64指数对肺结核合并肺部细菌感染的诊断价值

王显雷，王　勇，何　聪，陈素丽，刘　锐，郭丽萍

(1.河北省胸科医院结核三病区，河北 石家庄 050041；2.河北省人民医院重症医学科，河北 石家庄 050051；



·论著·

CD64指数对肺结核合并肺部细菌感染的诊断价值

王显雷1，王勇1，何聪2，陈素丽1，刘锐1，郭丽萍3*

(1.河北省胸科医院结核三病区，河北 石家庄 050041；2.河北省人民医院重症医学科，河北 石家庄 050051；

3.河北医科大学第二医院呼吸科，河北 石家庄 050000)

目的研究CD64指数对肺结核合并肺部细菌感染的诊断价值。方法选取河北省胸科医院结核科及呼吸科住院患者200例，其中肺结核患者(Ⅰ组)及肺结核合并肺部细菌感染患者(Ⅱ组)各100例。观察2组48 h静脉血CD64及降钙素原(procalcitonin，PCT)、C反应蛋白(C-reactive protein，CRP)水平。根据2组CD64及PCT、CRP数据绘制受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线，计算曲线下面积，计算得出CD64指数、PCT、CRP最佳临界值，并计算其敏感度及特异度。结果Ⅱ组CD64指数、PCT、CRP均高于Ⅰ组，差异有统计学意义(P<0.05)。CD64、PCT及CRP数据ROC曲线下面积 CD64(0.971)>PCT(0.921)>CRP(0.825)，与标准面积0.5相比差异均有统计学意义(P<0.05)。结论CD64在肺结核合并肺部感染患者血清中含量较高，在诊断细菌感染的判定价值上与PCT相仿，优于CRP，可作为判断肺结核合并肺部感染患者存在细菌感染的辅助检查指标。

结核，肺；降钙素；感染

10.3969/j.issn.1007-3205.2016.06.012

肺结核、细菌性肺炎是呼吸科常见病、多发病。有时二者难以鉴别，且常表现为肺结核基础上合并肺部感染，给临床诊断、治疗带来一定困难。临床上常通过抗感染治疗或试验性抗结核、抗感染治疗并行，短期复查胸部X线片、胸部CT，根据病变吸收情况作出最终诊断，这势必造成抗生素、抗结核药物的不合理使用，从而导致病情延误。CD64作为感染性疾病的敏感指标在很多研究中得到证实，且特异度较高。本研究检测CD64在肺结核继发肺部感染中的表达水平，同时与降钙素原(procalcitonin，PCT)及C反应蛋白(C-reactive protein，CRP)进行对比分析，旨在探讨CD64在肺结核及肺结核合并肺部细菌感染中的诊断价值，以便为早期区分肺结核和细菌性肺炎以及为肺结核合并感染时早期、合理使用抗生素提供理论依据。

1　资料与方法

1.1一般资料选取2012年10月—2014年10月河北省胸科医院结核科及呼吸科住院患者200例，其中肺结核患者(Ⅰ组)及肺结核合并肺部细菌感染患者(Ⅱ组)各100例。Ⅰ组男性44例，女性56例，年龄21～75岁，平均(50.39±12.94)岁。Ⅱ组男性47例,女性53例,年龄23～74岁，平均(49.76±10.25)岁。2组性别、年龄差异均无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。

1.2纳入标准患者年龄大于18岁、小于80岁。肺结核诊断标准：符合2001年中华医学会结核病分会《肺结核诊断和治疗指南》的诊断标准[1]，病原学或组织病理学检查阳性，并且抗结核治疗有效。肺结核合并肺部细菌感染目前仍缺乏统一的临床诊断标准，本研究主要根据以下标准对其进行临床诊断：①肺结核经有效抗结核药物治疗，不需使用抗生素治疗，临床症状明显好转，胸部X线或胸部CT显示肺部阴影吸收，诊断为单纯肺结核；②肺结核经有效抗结核药物治疗后，感染症状好转不明显，发热不退或再次发热，咯脓痰或痰量较多，实验室检查显示白细胞、CRP、PCT升高，联合使用抗生素后，患者临床症状好转，肺部阴影有吸收好转，诊断为肺结核合并肺部细菌感染。

1.3排除标准年龄小于18岁、大于80岁；病毒性肺炎、非典型病原体肺炎；合并肺外感染；院外应用抗生素；合并肝炎、自身免疫系统疾病、肺部基础病(如慢性支气管肺炎、支气管扩张)、艾滋病、糖尿病等慢性疾病的患者。

1.4实验试剂及主要仪器异硫氰酸荧光素(FITC)标记的小鼠抗人CD64抗体(购于美国BD公司)，CD64-FITC同型阴性对照试剂(购于美国BD公司)，溶血剂(0.83%的氯化铵溶液)。微量血 CRP 检测仪(雅培Ⅰ2000)，PCT 检测仪(罗氏Cobas e601)，流式细胞仪(BD FACSCalibur)。

1.5观察指标所有入组患者均于入组48 h内抽取静脉血查CD64、PCT、CRP。

1.6CD64指数、PCT及CRP检测

1.6.1CD64指数检测待检测标本制成单细胞悬液，经过荧光素标记的CD64-FITC单抗与细胞表面CD64抗原相结合，经激光照射，被标记上的荧光素发出一定波长的光，被探测器检测，并将不同波长的荧光信号进行区分，送到不同的光电倍增管中，经过信号转换、放大、数字化处理等流程，通过计算机直观地统计染各种荧光染料的细胞的百分比。

1.6.2PCT检测应用罗氏cobase e601全自动生化分析仪，采用电化学发光检测法进行检测。EDTA-K2管采静脉血2 mL颠倒混匀后即刻1 300r/min离心10 min分离血浆，仪器会自动计算每个样本中的分析物浓度，由专人操作并质控，严格按说明书操作。

1.6.3CRP检测应用雅培Ⅰ2000全自动生化分析仪，采用超敏免疫比浊法测定，由专人操作并质控，全部采用双标准双管测量，严格按说明书操作。

1.7统计学方法应用SPSS 18.0统计软件进行分析。计量资料比较采用t检验；绘制受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线，计算曲线下面积，计算得出CD64指数、PCT、CRP的最佳临界值，并计算其敏感度及特异度。P<0.05为差异有统计学意义。

2　结　　果

肺结核合并肺部感染组CD64指数、PCT、CRP均高于肺结核组，差异有统计学意义(P<0.05)，见表1。

根据肺结核组、肺结核合并肺部感染组的 CD64、PCT及CRP数据绘制ROC曲线，可见曲线下面积 CD64(0.971)>PCT(0.921)>CRP(0.825)，与标准面积0.5相比差异均有统计学意义(P<0.05)(图 1)。计算得出血清 CD64、PCT、CRP的最佳截断值，当CD64取临界值为 3.930时，诊断肺结核合并肺部感染的敏感度为86.2%，特异度为98.3%;当PCT取临界值为0.395 μg/L时，敏感度为 80.5%，特异度为 95.3%；当 CRP 取 26.25 mg/L 为临界值时，敏感度为 88.0%，特异度为 84.6%。见表2。

表12组CD64、PCT及CRP比较

组别CD64PCT(μg/L)CRP(mg/L)Ⅰ组2.916±1.5910.258±0.09914.400±6.588Ⅱ组6.424±2.1220.482±0.16630.963±14.845t9.19811.55110.198P<0.010.021<0.01

表2　CD64、PCT、CRP对诊断肺结核合并肺部感染的意义

图1　CD64、PCT、CRP的ROC曲线

3　讨　　论

肺结核本身是一种由结核分枝杆菌引起的肺部感染，与其他病原体引起的肺部感染比较，在症状，体征及影像学上并无绝对特征性的表现，如没有可靠的病原学依据，肺结核合并肺部细菌感染的诊断很难成立，但细菌性肺炎患者痰标本容易受口咽部菌群的污染，因此很难从常规的痰标本的分离培养结果来确定真正的病原体，故肺结核合并肺部细菌感染的诊断有很大难度。

PCT主要由甲状腺C细胞分泌，是降钙素的前肽，为一种无激素活性的糖蛋白。正常人血清中PCT含量极低，在体外稳定性很好。当机体发生感染后，脂多糖及各种炎症因子，如白细胞介素1、白细胞介素2、白细胞介素6和肿瘤坏死因子α等对机体PCT表达为正刺激效应，在短时间内诱导产生大量PCT。在全身性炎症反应的2～3 h PCT即可升高，因此，PCT具有早期诊断脓毒症的价值[2-3]。近年来研究表明，PCT是与感染相关性较好的生物学标记物，它与感染所致的全身炎症反应综合征、脓毒症等全身性感染的严重程度和预后具有较好的相关性[4]。重症肺炎时，血清PCT浓度明显增高，经抗菌药物治疗，感染被控制后，血清PCT浓度会逐渐下降，故有学者认为PCT可反映全身炎症反应的活跃程度[5]。目前临床上认为PCT是现有的实验室指标中早期诊断脓毒症最有效的指标，也是鉴别细菌感染与其他非细菌性全身炎症反应的最佳标志物之一[6]。

CD64是一种相对分子质量为72 000的跨膜糖蛋白，属免疫球蛋白超家族中的成员，在细胞吞噬、抗原递呈、释放炎症介质、清除免疫复合物中起重要作用，起连接细胞免疫和体液免疫的桥梁作用[7]。

CD64主要分布于单核巨噬细胞、树突状细胞等抗原递呈细胞表面，是巨噬细胞和嗜酸性粒细胞表面的最基本成分。生理情况下，CD64在中性粒细胞表面呈低水平表达，当机体发生感染时，在细菌细胞壁内毒素、集落刺激因子、白细胞介素12、干扰素γ等因子的刺激下，CD64在中性粒细胞表面表达明显增加[8]。CD64介导中性粒细胞和单核巨噬细胞对免疫球蛋白的Fc段进行识别和结合，从而增强免疫球蛋白的生理功能及杀伤能力，同时可调控多种炎症反应，在抗感染过程中发挥重要作用[9]。

一般情况下，CD64在机体感染或内毒素入侵等刺激后4～6 h即可明显升高，CD64与其配体结合后，可启动并放大免疫反应，主要包括吞噬病原微生物、抗体依赖的细胞毒性作用及大量细胞因子的释放[10]。有研究显示，感染发生后24 h内，CD64表达水平明显增高，为细菌感染尤其是全身性感染早期敏感的指标[11-13]。目前国内外关于肺结核合并肺部感染患者CD64表达水平研究较少。本研究结果显示，肺结核合并肺部感染组患者CD64指数较肺结核组明显升高，肺结核组、肺结核合并肺部感染组CD64、PCT、CRP的ROC曲线提示CD64诊断肺结核合并肺部感染的特异度均较PCT及CRP高。

综上所述，CD64可作为一种敏感的监测感染状态的指标，尤其是当细菌培养结果阴性或结果回报延迟时，根据CD64指导抗生素应用尤为重要。实际临床工作中结合患者的临床表现及联合检测、动态观察CD64、PCT、CRP的变化，对肺部感染情况进行综合评估，可判断患者的疾病状态，这对于系统管理和治疗肺结核合并肺部感染患者具有重要意义。

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(本文编辑：刘斯静)

Diagnostic value of CD64 on pulmonary tuberculosis with bacterial infection

WANG Xian-lei1, WANG Yong1, HE Cong2, CHEN Su-li1, LIU Rui1, GUO Li-ping3*

(1.Department of Tuberculosis Ⅲ Ward, the Chest Hospital of Hebei Province, Shijiazhuang 050041，China; 2.Department of Critical Care Medicine, the General Hospital of Hebei Province, Shijiazhuang 050041，China; 3.Department of Respiration, the Second Hospital of Hebei Medical University, Shijiazhuang 050000，China)

ObjectiveTo investigate the diagnostic value of CD64 on pulmonary tuberculosis with bacterial infection. MethodsA total of 200 patients, hospitalizing at the departments of respiration and tuberculosis in Hebei Chest Hospital were divided into two groups:Group Ⅰ(n=100), patients with pulmonary tuberculosis; Group Ⅱ(n=100), patients suffering pulmonary tuberculosis with bacterial infection. Firstly, we detected the level of CD64, procalcitonin(PCT), and C-reactive protein(CRP) invenous blood drawn within 48 h after patients were enrolled in group. Secondly, ROC curves could be plotted based on the data of CD64，PCT and CRP. Finally, it was essential to account the area under curve, the best borderline of CD64, PCT and CRP. Then the sensitivity and specificity were caculated. ResultsCompared with Group Ⅰ，CD64 index，PCT and CRP in Group Ⅱ were increased significantly(P<0.05). The area under curves plotted basing on the data from two groups were 0.971(CD64)>0.921(PCT)>0.825(CRP), respectively. Compared with the standard area of 0.5, there were statistical significance(P<0.05). ConclusionCD64 is highly expressed in infectious patients with pulmonary tuberculosis, whose diagnostic value is similar to PCT, whereas better than CRP. These results indicate that CD64 might be an assistant marker in diagnosing pulmonary tuberculosis with bacterial infection.

tuberculosis, pulmonary； calcitonin； infection

2015-10-21；

2016-02-28

河北省医学科学研究指导性课题(20130441)

王显雷(1981-)，男，满族，河北丰宁人，河北省胸科医院主治医师，医学学士，从事呼吸系统疾病诊治研究。

R521

A

1007-3205(2016)06-0663-04