黔金荞麦1号为主的中草药饲料添加剂对仔猪肠道有害菌及免疫因子的影响

谭露霖，罗文菊，艾蓉，薛红，邓蓉

(贵州省畜牧兽医研究所，贵州 贵阳 550005)

黔金荞麦1号为主的中草药饲料添加剂对仔猪肠道有害菌及免疫因子的影响

谭露霖，罗文菊，艾蓉，薛红，邓蓉*

(贵州省畜牧兽医研究所，贵州 贵阳 550005)

为探究黔金荞麦1号为主的中草药饲料添加剂对仔猪肠道微生物及免疫功能的影响，将20头生长健康、发育正常、体重相近的60 d仔猪随机分为4组，即试验1组、试验2组、试验3组、对照组，分别在全价日粮基础上添加1%、1．5%、2%复合中草药制剂和不添加复合中草药制剂。采集仔猪直肠粪便和血清，分别进行细菌计数，血清免疫因子干扰素γ(INFγ)、白介素－2(IL－2)的检测。结果:饲料中添加黔金荞麦1号为主的复合中草药，仔猪直肠粪便中大肠杆菌和沙门氏菌的数量显著降低(P＜0．05);血清中INFγ、IL－2的含量影响差异不显著(P＞0．05)。结果表明:饲料中添加黔金荞麦1号为主的复合中草药能降低仔猪直肠粪便中有害菌的含量，改善仔猪肠道健康;对仔猪血清免疫因子无显著影响。

黔金荞麦1号;中药饲料添加剂;仔猪;大肠杆菌;沙门氏菌

金荞麦(Fagopyrum dibotrys(D．Don)Hara)又名野荞麦、天荞麦等，是原产于我国的一种重要蓼科(Polygonaceae)、荞麦属(Fagopyrum Mill．)多年生植物，具有抗癌、抗炎、抗氧化、杀菌、降血糖、调节血脂等生理功能［1］。1999年金荞麦被列为国家Ⅱ级重点保护野生植物［2］。

大肠杆菌病是危害养殖业最普遍且防治最棘手的疾病之一［3］，大肠杆菌能产生强烈的毒素，严重危害畜禽健康，已成为全球性的公共卫生问题。沙门氏菌病是一种重要的人畜共患病，由肠炎沙门氏菌引起的人急性胃肠炎(食物中毒)已成为国际公共卫生问题。许多中草药不仅能提高动物的生产性能，还具有无残留、无抗药性的特点，能够为生产安全、健康的畜禽产品提供保障。

本试验探究黔金荞麦为主的中草药饲料添加剂对仔猪直肠粪便中的大肠杆菌和沙门氏菌数量，以及血清免疫因子的影响，以期为猪肠道疾病的防治提供参考依据。

1 材料与方法

1．1 试验设计饲养试验时间为2014年4月5日，试验选用20头生长健康、发育正常、体重相近的60 d非免疫商品仔猪随机分成4组，每组5头猪，试验期为36 d，分组情况见表1。

表1 试验分组

1．2 试验日粮试验选用不含抗生素、益生素及其它药物制剂的全价日粮，参考中华人民共和国农业行业标准NY/T65—2004，基础日粮组成及营养成分见表2。

1．3 复合中草药制剂复合中草药制剂的成分为金荞麦、萹蓄、地榆和乌药，按照质量比3∶1∶2∶1将其混匀。

表2 基础日粮组成及营养水平

1．4 饲养管理试验在贵州省畜牧兽医研究所麦坪猪场进行，各组仔猪按照统一饲养管理方法饲养，人工控制温度，自由采食与饮水。

1．5 样品采集与检测

1．5．1 试验仔猪分组结束后、饲喂中草药添加剂前，于早晨用灭菌棉塞刺激仔猪排粪并无菌采集粪便，每组采集3头仔猪，采集后10 min内无菌称取鲜粪1 g，用无菌生理盐水99 mL充分混匀后，再用无菌生理盐水按10倍稀释法稀释至10－4、10－5、10－6，分别取10 μL接种麦康凯平板培养基进行细菌培养计数(大肠杆菌为粉红色菌落、沙门氏杆菌为白色菌落)，每个稀释度3个重复。正式试验进行至20 d时，按上述方法进行大肠杆菌和沙门氏杆菌数量检测，对同一仔猪进行检测试验。

1．5．2 试验30 d后采血，检测仔猪血清中INFγ、IL－2含量，同时首次免疫猪瘟弱毒疫苗，免疫3 d后采集血清检测仔猪血清中INFγ、IL－2含量，接种猪瘟弱毒疫苗2次免疫，免疫3 d后采集血清检测仔猪血清中INFγ、IL－2含量。

2 结果

2．1 细菌计数

2．1．1 通过细菌培养计数，试验前各组猪粪便中大肠杆菌和沙门氏杆菌数量见表3。通过T检验，对各组数据进行统计分析，试验前各组间大肠杆菌和沙门氏菌的数量差异不显著(P＞0．05)。

表3 试验前各组试验猪粪便细菌数量统计

2．1．2 试验进行20 d时，对各组猪粪便中大肠杆菌和沙门氏菌进行计数，结果见表4。由表4可见，添加复合中草药后，试验组大肠杆菌数量均低于对照组，差异显著性分析表明，试验1组与对照组之间差异显著(P＜0．05);试验2组、试验3组与对照组之间差异极显著(P＜0．01);试验1组与试验2组之间差异显著(P＜0．05);试验1组与试验3组之间差异极显著(P＜0．01);试验2组和试验3组之间差异不显著(P＞0．05)。通过对沙门氏菌的数量统计，3个试验组沙门氏菌数量均低于对照组，差异显著性分析显示，试验1组与对照组之间差异显著(P＜0．05);试验2组、试验3组与对照组之间差异极显著(P＜0．01);试验1组与试验3组之间差异显著(P＜0．05);试验1组与试验2组，试验3组与对照组之间差异不显著(P＞0．05)。

根据上述差异显著性分析，饲料中添加2%复合中草药制剂对降低仔猪粪便中大肠杆菌和沙门氏菌的效果最显著。

表4 各组试验猪粪便细菌数量统计

2．2 INFγ和IL2检测试验30 d后，对各组仔猪血清INFγ和IL2进行检测，检测结果见表5。由表5可知，试验各组3次检测仔猪血清INFγ和IL2的含量与对照组相比，差异均不显著(P＞0．05)。

表5 仔猪血清INFγ和IL2检测

3 讨论

3．1 大肠杆菌广泛存在于自然界，在动物体内又是常在菌，感染途径多，抵抗力强，可突破黏膜屏障迅速渗透至肠壁内繁殖使动物发病，引起畜禽腹泻、败血症、乳腺炎等［4］。与对照组相比，试验组仔猪直肠粪便中大肠杆菌的数量均降低。沙门氏菌是最常见的重要人畜共患病原菌，畜禽感染沙门氏菌后，引起痢疾、败血症、实质器官和淋巴结出血坏死、肠道溃疡［5］。与对照组相比，试验组中沙门氏菌的数量均降低。表明黔金荞麦1号为主的中药饲料添加剂通过降低仔猪肠道中有害菌大肠杆菌和沙门氏菌的数量，改善肠道微生物环境，降低仔猪腹泻的发生，其中以2%添加量效果最显著。

3．2 IL－2是一种具有高活化的多功能小分子蛋白，是由活化的CD4+T细胞及少量CD8+T细胞产生的一种免疫调节淋巴因子，IL－2水平的高低反映了T细胞的功能状态，其产生能力是机体细胞免疫功能的重要指标［6］。INFγ具有抗病毒活性，参与机体的防御免疫，其活性增高则有利于感染的控制，但INFγ亦有促炎活性，能增强细胞毒性T细胞(CTL)及自然杀伤细胞(NK)细胞的溶细胞活性，增加黏附分子在内皮细胞表面的表达，促进中性粒细胞的粘附、渗出和活化，是造成内皮细胞损伤、毛细血管通透性增加的因素之一［7］。仔猪接种猪瘟弱毒疫苗前后，黔金荞麦1号为主的中药饲料添加剂对血清免疫相关因子IL－2和INFγ的含量都无显著影响，说明对仔猪的免疫功能无显著影响。

［1］李蕾，孙美利，张舒媛，等．近十年金荞麦化学成分及药理活性研究进展［J］．中医药导报，2015(4):46－48．

［2］盛华刚，朱立俏，林桂涛．金荞麦的化学成分与药理作用研究进展［J］．西北药学杂志，2011(2):156－158．

［3］曾俊棋，岳万福．猪源大肠杆菌耐药性与毒力的研究［J］．现代畜牧兽医，2016(1):38－44．

［4］宋修庆．禽类养殖场大肠杆菌病的危害及防治措施:第四届(2011)中国水禽发展大会［Z］．南昌:2011．

［5］李洁萍，曾凉雄，尹杰，等．猪沙门氏菌病的危害及其防制［J］．中国动物保健，2013(9):39－41．

［6］王著敏，金杰．红景天对复合因素致慢性疲劳大鼠血清IL－2、TNF－α水平的影响［J］．河南医学研究．2014(12):3－5．

［7］章莉莉，孙志坚，张东军，等．肾综合征出血热患者血清IL－12、IFNγ、IL－4、IL－10的变化及临床意义［J］．南京医科大学学报(自然科学版)，2008(11):1476－1478．

The Effect of Chinese Herbal Medicinal Feed Additive Main Containing Qian Fagopyrum Dibotrys No．1 on the Intestinal Harmful Bacteria and Immune Factor in Piglets

Tan Lulin，Luo Wenju，Ai Rong，Xue Hong，Deng Rong*
(Guizhou Institute Animal Husbandry and Veterinary Medicine，Guiyang Cuizhou 550005，China)

The present research was carried out to evaluate the effect of Chinese herbal medicinal feed additive on intestinal harmful bacteria and immune factor in piglets．A total of 20 healthy growth，normal development，and body weight close sixty－day old piglets were assigned to 4 dietary treatments including no additives group(control group)，adding 1%Chinese herbal medicinal feed additive group(group one)，adding 1．5%Chinese herbal medicinal feed additive group(group two)，and adding 2%Chinese herbal medicinal feed additive group(group three)．Collecting rectal feces and serum in order to bacteria counting and the detection of Interferon gamma(INFγ)and interleukin－2(IL－2)．Result:Compared with the control group，Feeding Chinese herbal medicinal feed additive groups decreased(P＜0．05)the number of e．coli and salmonella in rectal feces of piglets．The concentrations of INFγ and IL－2 in serum had no effect(P＞0．05)．It was concluded that the Chinese herbal medicinal feed additive main containing Qian Fagopyrum Dibotrys No．1 can improve intestinal health through decreasing the number of harmful bacteria，but had no significant effect on immune factors in serum．

Qian Fagopyrum Dibotrys No．1;Chinese Herbal Medicinal Feed Additive;Piglets;E．coli;Salmonella．

S816．7

A

1007－1474(2016)04－0020－03

2016－05－27

国家农业科技成果转化资金项目“优质牧草黔金荞麦1号中试与示范”［2014GB2F200250］;贵州省科技成果重点推广计划项目“黔金荞麦1号配套技术应用示范推广”黔科合成字［2013］5084

谭露霖(1991—)，女，研究实习员，硕士，研究方向为动物营养与饲料科学。E－mail:359362195@qq．com

*通讯作者:邓蓉(1966—)，女，副研究员，硕士，研究方向为草业科学。E－mail:dr817@163．com．