脂联素在结直肠癌及转移性结直肠癌中的表达及意义

王顺民，张晓燕，张惠琴，杜国义

（会宁县中医院，甘肃 会宁 730700）

脂联素在结直肠癌及转移性结直肠癌中的表达及意义

王顺民，张晓燕，张惠琴，杜国义

（会宁县中医院，甘肃 会宁 730700）

目的 检测脂联素在结直肠黏膜中的表达，探讨其与结直肠癌、转移性结直肠癌发生发展及预后的关系。方法 应用免疫组织化学SP法检测脂联素在正常结直肠黏膜、结直肠癌原发灶、结直肠癌肝转移灶及淋巴结转移灶中的表达。结果脂联素在正常结直肠黏膜、腺瘤、结直肠癌原发灶中的表达依次下调，其在正常结直肠黏膜与腺瘤中的阳性表达率均明显高于结直肠癌原发灶中的阳性表达率（P〈0.01）；在结直肠癌肝转移灶和淋巴结转移灶中脂联素的阳性表达率与结直肠癌原发灶中脂联素的阳性表达率比较，无显著性差异（P＞0.05）；脂联素的阳性表达与结直肠癌是否有浆膜浸润、分化程度有关（P〈0.05）；脂联素表达阳性组的结直肠癌患者生存时间较脂联素表达阴性组的患者长（P〈0.05）。结论 脂联素在结直肠癌发生发展的过程中可能起到一定的作用，可作为判断结直肠癌是否有浆膜浸润及分化程度的一个分子生物学标志，为结直肠癌的药物治疗提供崭新的思路。

脂联素；结直肠癌；转移性结直肠癌

研究表明，肥胖是许多恶性肿瘤发生发展的独立危险因素［1-3］。脂肪组织的炎症变化可以使脂肪因子的产生发生失衡：具有抗炎作用的脂肪因子（如脂联素）产生减少，这种失衡可能对肿瘤的发生发展产生重要的影响。国内外研究提示，血清脂联素可以抑制乳腺癌细胞和结肠癌细胞的增殖和转移［4-5］。目前对于组织中脂联素的表达与结直肠癌发生发展的研究不多，本研究旨在通过研究组织中脂联素在结肠癌及直肠癌中的表达情况，探讨其在结直肠癌发生发展、转移过程中的作用及其与预后的关系，从而为临床寻找一个对结直肠癌诊断及预后的判断有意义的指标，现介绍如下。

1　临床资料和方法

1.1临床资料

选取2003—2014年在甘肃省会宁县中医院行手术或病理确诊的147例患者，其中腺瘤46例（结直肠息肉状腺瘤20例，结直肠绒毛状腺瘤26例），腺癌63例，癌旁正常黏膜38例（均取自结直肠癌标本距肿物10 cm以上的结直肠黏膜）。病理分型中，高分化型腺癌18例，中分化型腺癌25例，低分化型腺癌20例；管状腺癌46例，绒毛状腺癌9例，黏液腺癌8例；癌灶侵及浆膜48例，伴淋巴结转移25例，伴肝转移10例；男性86例，女性61例；年龄45～80岁，中位年龄55.8岁。患者一般资料比较，差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。所有患者术前均未做化疗、放疗，有完整的临床资料，其中52例结直肠癌患者有完整的随访资料。

1.2方法

脂联素（Adiponectin）的单克隆抗体均购自英国Abeam公司，均按照试剂盒说明书进行操作。

1.3结果判定

脂联素蛋白表达阳性的细胞，其细胞浆染成棕黄色颗粒，呈黄色时为1分，棕黄色为2分，棕褐色为3分。每张切片随机选取5个高倍（×400）视野观察，计数100个细胞，阳性细胞≤5%为0分，6%～25%为1分，26%～50%为2分，51%～75%为3分，大于75%为4分。将二者积分相乘，结果0～1分为阴性（-），2～7分为阳性（+），8～12分为强阳性（++）。将阳性和强阳性归为表达阳性组，计算阳性率。

1.4统计学处理

采用SPSS13.0软件处理数据，率的比较采用χ2检验或四格表确切概率法，P〈0.05为差异有统计学意义。

2　结果

2.1脂联素在不同组织中的表达

脂联素在正常结直肠黏膜、腺瘤、结肠癌原发灶中的阳性表达率依次下调，其在正常结直肠黏膜与腺瘤中的阳性表达率均明显高于结直肠癌原发灶中的阳性表达率（P〈0.01），在结直肠癌肝转移灶及淋巴结转移灶中的阳性表达率比较，差异无统计学意义（P＞0.05），见表1。进一步比较发现，结直肠癌原发灶与肝转移灶及淋巴结转移灶中的阳性表达率比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。

表1　脂联素在不同组织中的表达情况

2.2脂联素表达与结直肠癌临床特征的关系

脂联素的阳性表达与患者的性别、年龄、肿瘤大小、Dukes分期、淋巴结转移和肝脏转移无关（P＞0.05），与是否有浆膜浸润、分化程度有关（P＜0.05），见表2。

表2　脂联素表达与结直肠癌临床特征的关系

2.3脂联素表达与生存期的关系

应用Kaplan-Meier法对52例随访资料齐全的病例进行生存分析，绘出生存曲线，见图1。由图1可见，脂联素表达阳性组的患者生存时间相对较长，随着生存期的延长，两曲线距离增大，经Log-Rank检验，χ2值=8.969，P=0.003。

图1　生存曲线

3　讨论

3.1脂联素的表达下调在结直肠癌的发展过程中可能起到一定作用

本研究显示，脂联素在正常结直肠黏膜中高表达，从正常结直肠黏膜到结直肠腺瘤再到结直肠癌，脂联素的表达水平依次下调。脂联素在正常结直肠黏膜与腺瘤中的阳性表达率均明显高于结直肠癌原发灶中的阳性表达率（P〈0.01），表明脂联素的表达下调在正常结直肠黏膜向腺瘤、结直肠癌的发生发展过程中可能起到一定作用。而在结直肠癌伴肝转移及淋巴结转移病例中，脂联素阳性表达率比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。进一步比较结直肠癌原发灶与肝转移灶及淋巴结转移灶中脂联素的表达情况，同样显示脂联素阳性表达率比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。我们的研究结果提示，结直肠癌的发生发展以及转移是个复杂的过程，是多基因、多因素参与的事件，一个基因不能说明其全部的机制。

3.2脂联素与结直肠癌是否有浆膜浸润及分化程度有关

本组资料显示，脂联素的阳性表达与患者的性别、年龄、肿瘤大小、Dukes分期、淋巴结转移和肝脏转移无关（P＞0.05），而与是否有浆膜浸润、分化程度呈明显相关性（P〈0.05），提示脂联素在结直肠癌中随着肿瘤浸润浆膜及恶性分化程度的增加而呈逐步下调的趋势。由此可以看出，脂联素可作为判断结直肠癌是否有浆膜浸润及分化程度的一个分子生物学标志。

3.3脂联素的阳性表达与生存期有关

对本组资料进行生存分析发现，脂联素表达阳性组患者生存时间较脂联素表达阴性组长（P〈0.05），说明脂联素可抑制结直肠癌的发展，从而延长生存期。

4　结语

脂联素是由脂肪细胞生成的30 kDa糖蛋白，含有244个氨基酸，可能在肿瘤的发生中具有保护作用，其主要通过脂联素受体1（Adipo-R1）和脂联素受体2（Adipo-R2）而激活受体和信号传导通路的下游，或者通过抗血管生成等抑制肿瘤细胞的增殖和诱导肿瘤细胞凋亡［6］。体外细胞实验［7］证实脂联素可以通过抑制STAT3信号通路的激活来抑制白介素-6诱导的结直肠癌细胞的增殖。外周血中脂联素水平的降低与多种肿瘤的发病风险有关，如乳腺癌、结直肠癌、前列腺癌、甲状腺癌［8-9］，国外文献报道人体结肠癌组织脂联素水平表达明显下降，而结肠癌组织脂联素水平与结肠癌的分化程度、淋巴结转移、分期有关［10］。脂联素可作为判断结直肠癌患者预后及生存期的一项有意义的临床指标，并为结直肠癌的药物治疗提供崭新的思路和途径。

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1671-1246（2016）16-0111-03