中草药芦荟、苦参对5种常见细菌的体外抑菌研究*

梁士兵　王育纯　 孙　娜　张颖颖　王花欣



【实验研究】

中草药芦荟、苦参对5种常见细菌的体外抑菌研究*

梁士兵1王育纯1孙娜1张颖颖2王花欣3

1.山东中医药大学中医学院本科生2012级(济南 250355)；2.山东中医药大学微生物教研室(济南 250355)；3.山东中医药大学寄生虫学教研室(济南 250355)

摘要：目的测定芦荟、苦参2种中草药对大肠埃希菌等5种常见细菌的体外抑菌效果。方法采用MH(B)营养肉汤递倍稀释法,分别测定芦荟、苦参对5种常见细菌的最小抑菌浓度(MIC)。结果二者对5种常见细菌表现出不同抑菌作用，但芦荟的抑菌效果较好，其对金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌、MRSA有较强抑菌作用，MIC均为15.625μg/ml。结论芦荟和苦参对5中常见细菌均产生抑制效果，芦荟的抑菌效果更加显著，可为临床治疗由这5种细菌引起的感染提供一定参考依据。

关键词：芦荟；苦参；中草药；最小抑菌浓度

当前抗生素被广泛滥用，菌株耐药性、食品中抗生素残留等问题日趋严重[1]。中草药作为我国几千年来防治疾病的重要武器，具有毒副作用小、不易产生抗药性、经济实惠等优点，在现代预防和控制细菌性感染疾病方面发挥着重要作用。本实验选用芦荟、苦参2味中草药，制取80%乙醇提取液，进行对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、MRSA、肺炎克雷伯菌5种常见细菌的体外抑菌研究，得出最小抑菌浓度(MIC)，为中草药抗菌剂的研制、临床应用以及食品防腐等领域提供参考依据。

1　实验材料

1.1中药材料芦荟、苦参购自北京同仁堂药店。

1.2供试菌株金黄色葡萄球菌CMCC(B)26003，大肠埃希菌CMCC(B)44102，铜绿假单胞菌CMCC(B)10104，MRSA(金黄色葡萄球菌耐甲氧西林株) ，肺炎克雷伯菌CMCC(B)46117，山东中医药大学微生物教研室提供。

1.3MH(B)营养肉汤购自北京奥博星生物公司。

2　实验方法

2.1待测试剂制备将芦荟、苦参用80%乙醇经浸泡、回流、抽滤和旋蒸后得到待测试剂，浓度分别为250μg/ml、335μg/ml，并经0.22微米无菌a过滤器过滤后备用。

2.2MIC测定

2.2.1细菌培养基的制备MH(B)营养肉汤分装后于121℃高压灭菌20min。

2.2.2实验菌液的制备以比浊管调整菌液浓度为1×106CFU/ml。

2.2.3微量稀释法抑菌实验参照NCCLS标准采用微量稀释法进行。在96孔板中每孔加入培养基100 μl，然后在第1行中加入100 μl药液，从第1行中吸取100 μl混合液加入第2行，依次类推至第6行，得到2、4、8、16、32、64倍稀释药物梯度。第7行每孔加入双抗10 μl为阳性对照，第8行直接加入菌液做为阴性对照。同时设立药物稀释梯度和培养基空白做为对照。每个药物重复两次。分别加入各菌液10 μl，37℃培养24h后取出观察结果。

3　实验结果

MIC测定阴性对照中细菌生长良好，阳性对照孔无明显生长，培养基空白无污染。芦荟、苦参最小抑菌浓度(MIC)测定结果见表1。

表1　芦荟、苦参对5种常见细菌的MIC　(μg/ml)

4　讨论

金黄色葡萄球菌是一种革兰氏阳性球菌，是人类化脓性感染中最常见病原体，如临床常见的伤口化脓、毛囊炎、痈疖、甲沟炎、中耳炎等都可由金黄色葡萄球菌感染所引起；大肠埃希菌是人类和动物肠道中最重要的一种条件致病菌，以引起泌尿系统感染和化脓性炎症最常见，如临床常见尿道炎、膀胱炎、阑尾炎以及术后伤口感染等；绿脓假单胞菌为革兰阴性菌，致病性多为院内感染，如手术伤口感染、烧伤创面感染等；MRSA对多种抗生素耐药，致病力强且治疗效果差，为引起医院感染的主要病原菌之一；肺炎克雷伯菌为一种条件致病菌，可引起肺炎、支气管炎、泌尿道感染等临床常见疾病[2，3]。

目前，无论国内外，对于这些感染类疾病大多数首选抗生素治疗，但近年来，由于抗生素的广泛应用，耐药菌株逐年增多[4]，药物不良反应不断增加，而且开发费用昂贵。因此,从中药材中寻找开发纯天然抗菌素是一条可行途径[5]。古文献载芦荟有治疗热结便秘、癣疮等作用，现代研究，芦荟含大黄素苷、对香豆酸、多种氨基酸等成分，其提取物可抑制S180肉瘤和艾氏腹水癌的生长，水浸剂对金黄色葡萄球菌、多种皮肤真菌和人型结核杆菌有抑制作用，而芦荟醇提液对本实验中5种细菌的相关研究较少。苦参为一种清热药，古文献载其具有治疗湿热痢疾、湿疹湿疮、阴肿阴痒、淋痛等作用，现代研究，苦参含苦参碱、槐果碱、槐胺碱、苦参酮等成分，其水煎剂对痢疾杆菌、金黄色葡萄球菌、乙型链球菌等有明显抑制，而苦参醇提液对本实验中5种细菌的相关研究较少。 同时，芦荟、苦参作为一种纯天然植物药，数量充足，不良作用小，价格低廉，用芦荟、苦参作为开发抑菌新产品的原材可大大降低成本，因而具有广阔开发前景。

本实验以芦荟、苦参两种中药的80%醇提液作为样本，对5种常见细菌进行抑菌研究。结果表明，2种中药对5种细菌均有抑制效果，但芦荟的抑菌效果更加显著，尤其对金黄色葡萄球菌、MRSA、肺炎克雷伯菌表现出强烈抑菌效果，其最小抑菌浓度均为15.625μg/ml。本实验研究结果可为芦荟、苦参作为抗金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌等5种细菌的新药开发、食品防腐以及临床应用等提供一定参考依据。但历代医家十分重视中药的配伍使用，以此来增强疗效。而本实验只是研究了单味药的抑菌效果，因而对于芦荟、苦参的混合提取液以及二者与其它中药的混合提取液的抑菌效果如何，尚需进一步研究。

参考文献

[1]王瑞君.几种中草药对金黄色葡萄球菌体外抑制作用的研究[J].现代食品科技，2009，25(9)：1104-1106.

[2]章正育.医学微生物学与免疫学[M] .上海：上海科学技术出版社，2009.

[3]左国营，王根春，徐贵丽，等.30种中草药提取物体外抗MRSA的筛选研究[J] .中国现代应用药学杂志，2006，23(4)：293-295.

[4]钟有添，黄真，张瑞其，等.枫香树叶对金黄色葡萄球菌和绿脓杆菌抑菌作用的观察[J]. 赣南医学院学报，2007,27(2)：169-171.

[5]李巧如，任健康，刘宗智，等.18种中草药抗菌作用的筛选[J].陕西中医，2002，23(6)：555.

*基金项目：山东中医药大学SRT项目(No.2014263)

doi:10.3969/j.issn.1003-8914.2016.04.021

文章编号：1003-8914(2016)-04-0498-02

收稿日期：(本文校对：刘言言2015-09-09)

Study on the Chinese Herbal Medicine Aloe and Lightyellow Sophora Root for Extracorporeal Inhibition of 5 Common Bacteria

LIANG Shibing1WANG Yuchun1SUN Na1ZHANG Yingying2WANG Huaxin3

(1.Grade 2012 Undergraduate, College of Traditional Chinese Medicine, Shandong University of Traditional Chinese Medicine,Shandong, Ji’nan 250355, China;2.Teaching and Research Section of Microbiology, Shandong University of Traditional Chinese Medicine, Shandong, Ji’nan 250355, China;3.Teaching and Research Section of Parasitology,Shandong University of Traditional Chinese Medicine, Shandong, Ji’nan 250355, China)

Abstract：ObjectiveTo mensurate the extracorporeal inhibition effect of two Chinese herbs aloes and lightyellow sophora root for Bacillus coli and the other four kinds of common bacterium. MethodsUsing MH (B) dilution methods that dilute the consistence of nutritive gravy by decreasing times to mensurate the minimal inhibitory concentration (MIC) that aloes and lightyellow sophora root engender the foundation of inhibition for the five common bacteria. ResultsBoth of them had the inhibiting foundation for the given common bacterium, but the degree of inhibiting bacterium was different. The inhibition of aloes was better than lightyellow sophora root for the given five common bacteria, especially for Staphylococcus aureus Rosen Bach, K.peneuminiae, MRSA, and it showed strong inhibiting foundation when the MIC is 15.625μg/ml. ConclusionComparing the inhibiting foundation of aloes and lightyellow sophora root, aloes has significant inhibition for the given five common bacteria, and can provide a reference for the clinical treatment of infection caused by these 5 kinds of bacteria.

Key words：Aloe; Lightyellow sophora root; Chinese herbal medicine; Minimal inhibitory concentration