柏子仁水提物抗抑郁作用的实验研究*

王爱梅



【实验研究】

柏子仁水提物抗抑郁作用的实验研究*

王爱梅

南阳医学高等专科学校(南阳 473061)

摘要：目的探讨柏子仁水提物的抗抑郁作用及其对HPA轴的影响。方法健康成年SD大鼠随机分为对照组、模型组、氟西汀组和柏子仁组，每组10只。采用孤养加慢性轻度不可预见性应激结合的方法构建抑郁模型，同时每天给予生理盐水、盐酸氟西汀或柏子仁水提物灌胃治疗21d。用药结束后，观察各组大鼠的水平穿越格数、竖立次数、糖水偏好及大鼠血清ACTH、CORT含量。结果与模型组相比，用药组能改善抑郁大鼠水平穿越格数、竖立次数及糖水偏爱(P<0.01)；大鼠血清ACTH和CORT含量降低(P<0.01)。结论柏子仁水提物具有显著的抗抑郁作用，其机制可能与调节HPA 轴的功能有关。

关键词：柏子仁水提物；抑郁症；HPA轴

抑郁症具有高自杀率、高致残率及高患病率的特点，且随着社会经济的日益发展，抑郁症的发病率将逐年增高[1, 2]。目前，临床上治疗抑郁症的西药存在疗效不全(有效率仅70%左右)，毒副反应大，起效慢，复发率高等许多问题[3, 4]。因此，运用现代科学研究方法从传统的药物中开发研制高效低毒的抗抑郁中药成为当前研究的热点[5]。柏子仁具有养心安神，镇静催眠作用[6]，而柏子仁的抗抑郁作用及其作用机制未有报道，本实验以孤养加慢性轻度不可预见性应激构建抑郁大鼠模型，探讨柏子仁水提物抗抑郁的作用机制，为临床治疗抑郁症提供一定的理论依据。

1　材料与方法

1.1材料

1.1.1实验动物SD大鼠40只，雌雄各半，SPF级，体质量(220±20)g，由河南省实验动物中心提供 (许可证号：SCXK(豫)2010-0002)。

1.1.2主要仪器与试剂酶联免疫检测仪，美国伯乐公司；柏子仁，河南省南阳市医药公司；盐酸氟西汀，上海医药(集团)有限公司，批号20131015；促肾上腺皮质激素(ACTH)测试盒，皮质酮(CORT)测试盒，南京建成生物工程研究所，批号分别为H097和H205。

1.1.3柏子仁水提物的制备取柏子仁500 g，加自来水2500 ml煎煮2次，合并水煎液，浓缩至1 g/ml，高压灭菌，4 ℃冰箱保存备用。

1.2方法

1.2.1动物分组及给药选用40只表现活跃、对电击比较敏感、逃避反应迅速的大鼠随机分为对照组、模型组、氟西汀组和柏子仁组，每组10只。除对照组外，其它三组大鼠以单只单笼饲养并每天随机给予以下刺激的1种：断食(24 h)、断水(24 h)、昼夜颠倒(24 h)、夹尾(3 min)、束缚(3 h)、10 ℃冷水游泳(5 min)、电击足底(电压为30 V，电击5 s，间歇5 s，共进行300 s)，共21 d的要求建立抑郁模型。每日进行应激刺激前1 h，药物组即开始分别给予1.8 mg/kg盐酸氟西汀、1 g/kg柏子仁水提物灌胃，对照组和模型组每天给予等剂量的生理盐水灌胃，连续21d。各组动物每周记录一次体质量，调整用药剂量。

1.2.2敞箱实验在造模前1 d及造模第22 d，用敞箱实验法观察各组大鼠行为学改变。观察时将单只大鼠置于长宽各125 cm、高40 cm的光洁敞箱中央，敝箱底面用白线划分为25个25×25 cm的等边方格，内面涂黑漆，敞箱中央有一昏暗灯光。记录大鼠5 min内水平穿越格数、竖立次数。动物开始置于中央格，穿越底面方格数为其水平得分，穿越1格为1分；两前腿离地或爬墙壁记为垂直运动，1次为1分。

1.2.3糖水偏好实验在造模前1 d及造模第22 d进行糖水偏好实验。实验前禁食禁水14 h，随后给予每笼一瓶称量过的正常饮用水200 ml和一瓶1%蔗糖水200 ml，半小时后，对换两瓶水的位置，1 h后取两瓶水定量。计算动物的糖水消耗量、饮用水消耗量、糖水偏好(糖水偏好=糖水消耗/总液体消耗)。

1.2.4血清ACTH及CORT含量测定行为学结束后，断头处死大鼠，取血采用ELISA法测定大鼠血清ACTH及CORT含量，严格按照试剂盒说明操作。

2　结果

2.1各组大鼠敞箱试验、糖水偏好实验比较实验应激处理前1 d，各组大鼠敞箱试验水平穿越格数、竖立次数和糖水偏好均没有差异(P>0.05)；应激处理21 d后模型组大鼠的敞箱试验水平穿越格数、竖立次数和糖水偏好均低于对照组(P<0.01)，表明抑郁模型成功；同时氟西汀组和柏子仁组以上指标较模型组大鼠增高(P<0.01)，表明氟西汀和柏子仁水提物可以明显改善抑郁样行为；而氟西汀组和柏子仁组大鼠以上指标无显著差异(P>0.05)，见表1。

表1　柏子仁水提物对抑郁模型大鼠敞箱实验、糖水偏爱的影响　±s)

注：1)P<0.01 vs对照组，2)P<0.01 vs 模型组

2.2各组大鼠血清ACTH及CORT含量结果显示，与对照组相比，模型组大鼠血清ACTH、CORT表达显著增加(P<0.01)；与模型组相比，氟西汀组和柏子仁组大鼠ACTH、CORT表达显著降低(P<0.01)，氟西汀组和柏子仁组比较上述指标差异无统计学意义(P>0.05)，表2。

组别血清ACTH(mmol/L)血清CORT(mmol/L)对照组9.12±0.899.64±1.21模型组15.74±1.981)16.98±1.531)氟西汀组12.73±1.462)14.71±1.212)柏子仁组13.15±1.522)14.86±1.152)

注：与对照组比较，1)P<0.01；与模型组比较，2)P<0.01

3　讨论

抑郁症是一种以心境低落、兴趣丧失、思维迟缓、自我评价过低等精神症状为主的精神疾病综合征[7]，严重威胁人类健康、增加社会经济负担，因此加强抑郁症的防治，寻找积极、有效的治疗方法，具有非常重要的社会和经济意义。本实验以孤养加慢性轻度不可预见性应激构建的抑郁症模型，因具有应激因子多变及不可预见的特点更接近于人类抑郁症，是目前较为理想的动物模型[8]。本实验结果显示，经过 21d 刺激后，模型组大鼠敞箱试验水平穿越格数、竖立次数、糖水偏好均低于正常水平，可体现出抑郁症大鼠的消化系统障碍、对周围环境的好奇度降低及快感缺失，提示模型成功。经柏子仁水提物治疗后，抑郁模型大鼠上述指标均有显著改善，表明柏子仁水提物可以明显改善大鼠的抑郁样行为。

慢性应激刺激可以促使下丘脑分泌CRH，CRH 刺激腺垂体分泌ACTH，ACTH 刺激肾上腺皮质释放糖皮质激素(动物表现为CORT)，从而引起持续HPA轴功能亢进和高皮质醇血症，进而出现一系列的抑郁情绪和症状[9, 10]。本实验结果显示，柏子仁水提物可以显著降低大鼠血清ACTH、CORT含量，进而改善抑郁症状。

综上所述，柏子仁水提物可显著改善抑郁大鼠抑郁症状, 其作用机制可能与调节HPA 轴的功能有关。

参考文献

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*基金项目：河南省南阳市科技攻关计划项目(No.2012 GG070)

doi:10.3969/j.issn.1003-8914.2016.11.019

文章编号：1003-8914(2016)-11-1559-02

收稿日期：(本文校对：李弋2015-11-19)