侯艳
【摘要】 丙肝主要是一种由于丙肝病毒感染所导致的一种肝炎。感染的传播途径主要由输血性传播、由吸毒导致、针刺性传播等造成。据不完全统计,在现阶段我国已经有超过四千一百万丙肝患者,但是在现阶段对于丙肝病毒检测方法较为有限,本文主要针对丙肝病毒检测方法进行分析和探讨。
【关键字】 丙肝病毒 检测方法 分析 探讨
一、丙肝病毒检测方法的临床意义
丙肝主要是一种由于丙肝病毒感染所导致的一种肝炎。丙肝病毒(HCV),主要是一种RNA病毒,这种病毒具有以下特点不仅仅在传播过程中途径较为广泛,同时在具有较强的“生命力”。主要通过血液传播、母婴传播、性传播等途径。丙肝病毒(HCV)较强的生命力来自于其强大的变异能力,丙肝病毒(HCV)能够根据环境的 变化进行相应的变异,从而能够更好地适应环境。此外更加重要的是这种病毒能够将自身进行隐藏,因此丙肝病毒(HCV)在发病初期是很难被发现和具有相应的临床表现的。因此 而言,对于丙肝病毒(HCV)找到一种快速有效的检测方法是我们分析的关键。
二、丙肝病毒检测方法的探究
在现阶段常见的丙肝病毒检测方法主要由以下几个方面:丙型肝炎病毒抗-HCV的检测技术、丙型肝炎病毒核酸RNA的检测、血清中HCV核心抗原检测。
1、丙型肝炎病毒抗-HCV的检测技术
丙型肝炎病毒抗-HCV的检测技术主要是基于丙型肝炎病毒的间接酶联免疫法。主要通过我们常见的生物学知识进行。其实验步骤如下:(1)包被:选取相应的碳酸缓冲液,此时对应的浓度大约为0.1mol/L,酸碱性为pH 9.6。直接进行抗原的测定,此时对应的200μL/孔;选取BPO4-CY成为我们所选取的参考系数,同时设置对应的参照为两组,一组为包被抗原不加抗BPO血清,另一组参考系数为不包被抗原但加抗BPO血清。在此基础上,选取抗原-BSA抗血清作为其中阴性的参考系数;在温度为4℃的冰箱中过夜。(2)选取的洗涤液浓度大约为BPS 0.01mol/L,酸碱性为pH 7.2,进行多次的洗涤,一般情况下每三分钟洗涤一次,共洗涤3次。(3)与特异性抗体反应:在此洗涤结束之后,在提前准备好的酶案板上,在此基础上加入适量的抗BPO血清,在三十七摄氏度的恒温中保持两个小时。(4)每三分钟洗涤一次,共洗涤3次。(5)与酶联抗抗体反应:再加入1︰50稀释的GAR-IgG-HRP 200μL/孔,37℃保温1h。(6)洗涤三次。(7)显色:加入OPD底物液,200μL/孔,37℃显色。(8)采取用硫酸进行反应的终止,此时选取 50μL/孔,用测量其中的光的吸收值。(9)结果判断:当呈现出的结果 与实际结果一致时结果成立。若大于(X+2SD),判为阳性;若小于X+SD,判为阴性[3]。
2、丙型肝炎病毒核酸RNA的检测
国际和国内流行的HCV RNA定量检测方法有:COBAS TaqMan HCV RNA和PCR法。但是此时的HCV载量的高低与实际情况中患者所对应的丙型肝炎病毒的基本情况没有必然的联系,与患者的实际病情也具有一定的差异。但是丙型肝炎病毒核酸RNA的检测方式,是一种对于患者基本抗病毒疗效状况的关键参照依据。在患者处于急性感染期,患者身体中所对应的丙型肝炎病毒核酸RNA一般情况下可能 达到相应的105~107KB/ml。然而在患者处于在一般感染的时期,丙型肝炎病毒核酸RNA水平基本上保持在在5×104~5×106KB/ml之间。
3、血清中HCV核心抗原检测
血清中HCV核心抗原检测主要是通过分析ALT、AST水平变化,然后可以对实际的患者的基本情况进行判断。但是这种情况的判断不能分析出患者肝炎的状况和患者所处于的病情等级。对于慢性丙型肝炎患者和急性丙型肝炎患者其体内的ALT和AST水平具有明显的不同,患者所处于的状况情况与自身的身体状况具有一定的关系。在慢性丙型肝炎患者中,大多数检测处于30%ALT正常状态,约40%ALT水平低于2倍正常值。急性丙型肝炎患者体内的血清白蛋白一般情况下处于正常的状态。凝血酶原活动度和胆碱酯酶活性也基本上保持在 正常的水平[2]。
三、丙肝病毒检测方法的对比分析
从表中可以看出三种分析方法的优点和缺点,利用各种分析方法可以为治疗、确诊、评估、预测实现多对应的技术依据和技术职称。通过及时的清楚病毒,并及时的处理并阻止病情的恶化,从而最大限度的降低患者出现肝硬化的现象,为丙肝病毒的防治打下基础。
参 考 文 献
[1] 杜慧.丙肝病毒实验室检测进展[J]. 中国医疗前沿. 2012(11)
[2] 王国见.丙肝的危害及其防治进展研究[J]. 求医问药(下半月). 2012(08)
[3] 张智英,董兴艳.丙肝病毒实验室检查方法及结果解释[J]. 中国实用医药. 2013(05)