中草药免疫促进剂对AA仔鸡法氏囊和脾脏形态结构的影响

金光明,靳二辉,李升和,刘圣楠,丁常宏

(1.安徽科技学院　动物科学学院，安徽　凤阳　233100；2.安徽安丰堂动物药业有限公司，安徽　合肥　230036)



中草药免疫促进剂对AA仔鸡法氏囊和脾脏形态结构的影响

金光明1,靳二辉1,李升和1,刘圣楠1,丁常宏2

(1.安徽科技学院动物科学学院，安徽凤阳233100；2.安徽安丰堂动物药业有限公司，安徽合肥230036)

摘要：试验研究了中草药免疫促进剂对AA仔鸡法氏囊和脾脏形态结构的影响。选用1日龄健康的AA仔鸡200只,随机分为实验组和对照组，每组100只，分四个重复组。中草药免疫促进剂按200 mg/kg添加基础日粮中。在42日龄时，从每个重复组中随机抽取10只仔鸡，颈静脉放血处死，采集各组鸡法氏囊和脾脏的组织样本，置于Bouin固定液中，应用石蜡组织切片技术制作组织切片，显微摄影系统观察拍照。试验结果表明添加中草药免疫促进剂的试验组仔鸡的法氏囊和脾脏的形态结构较对照组鸡退化延缓，其中脾脏的组织结构变化比较明显；试验组鸡的法氏囊较对照组皱襞发达, 法氏囊小结排列紧密；脾脏组织结构中红髓与白髓界线清晰，脾小结试验组较对照组明显增多。结果表明，中草药免疫促进剂能够促进AA仔鸡免疫器官的发育。

关键词：中草药免疫促进剂；AA仔鸡；法氏囊；脾脏；形态结构；发育

改革开放以来，我国快速发展的家禽养殖业，已成为养殖从业者增收的重要来源，家禽肉产品也是广大消费者最受欢迎的肉类产品[1]。在禽类养殖业中, 依靠疫苗、血清、生物制剂、药物和化学产品等来控制家禽疫病是目前家禽养殖业生产中最为常见的方法，在饲料中添加抗菌药、驱虫药、激素和促生长的药物或制剂较为常见，这些药物和制剂均可在家禽体内或禽肉产品中残留，从而对人体健康产生严重的危害。禽肉产品的安全问题已经得到国家相关管理部门的高度重视。随着人们对禽肉产品绿色需求意愿的增加，国内外禽类生产专家们均在寻找改进和替代抗生素、生物制剂、药物和化学产品等的饲料添加剂。

中草药产品及制品多数是以天然植物为原料生产而来，具有价格低廉、毒副作用小、几乎无残留、无抗药性、无污染，具有多种营养成分和生物活性面份。兼有营养物质和药物的双重作用，既可防治疾病、增强抗应激、提高生产性能，又能通过非特异性免疫作用调节机体免疫功能等优点[2]。中草药免疫促进剂是选用黄芪，板蓝根，炒白术，茯苓，陈皮，山楂，甘草，山药等多种中草药类植物通过一定的加工方法与程序而获取的中草药产品，其主要成分具有抗菌抑菌、抗氧化、双向调节机体免疫功能以及清热解毒、消炎利胆、降血脂等生理功能。有些成份是一类植物化学物质的简称，又称生物黄酮或植物黄酮，是一类重要的生物活性物质，据报道植物黄酮不但具有抗炎、抗菌、抗病毒等作用，同时还具有广泛的抗肿瘤活性。正是基于具有上述诸多优点的中草药，目前在国内外畜禽养殖业中具有较为广泛的应用。

有关中草药产品或制品对AA仔鸡的免疫器官脾脏和法氏囊的组织结构的影响研究甚少。实验目的旨在研究中草药组方组成的免疫促进剂对AA仔鸡免疫器官脾脏和法氏囊组织结构的影响，为中草药组方组成的免疫促进剂在家禽生产中的进一步推广应用提供参考依据。

1材料与方法

1.1试验动物

200只1日龄活泼健康的AA肉仔鸡，由安徽科技学院畜牧科技园提供。

1.2中草药免疫促进剂

中草药免疫促进剂，由安徽安丰堂动物药业有限公司提供，主要成份由黄芪、板蓝根、炒白术、茯苓、陈皮、山楂、甘草和山药等多种中草药植物经过一定的加工程序与方法制作而成的中草药免疫促进制剂。

1.3基础日粮组成及营养水平

试验基础日粮自配，其主要成份与营养水平见表1。

表1　基础日粮组成及营养水平

1.4饲养管理

试验AA肉仔鸡依据常规饲养管理方法进行，立体笼养，自由采食和饮水，24h小时光照，严格按常规免疫程序进行免疫接种。试验禽舍内保持适宜的温度和湿度，保持良好通风，试验各组饲养管理条件完全相同。

1.5试验设计

200只1日龄AA肉仔鸡，随机分为对照组和试验组，每组100只，每组设四个重复组，每个重复组25只AA肉仔鸡。中草药免疫促进剂按0和200 mg/kg添加到对照组和试验组基础日粮中，试验期为42 d。

1.6样品采集与切片制作

42日龄时，从各重复组中随机抽取10只仔鸡进行编号屠宰，屠宰前禁食12 h，仅供饮水，逐只称重，颈静脉放血致死后，采集免疫器官法氏囊和脾脏的组织样品，置于Bouin固定液中，应用石腊组织切片制作技术制作显微组织切片，H·E染色, Olympus CH-30显微摄影系统观察、拍照。

1.7试验地点与时间

试验于2015年4月17日～5月28日在安徽科技学院实验动物中心进行。试验期为42d。

2结果与分析

2.1中草药免疫促进剂对AA仔鸡法氏囊组织结构的影响

中草药免疫促进剂对AA肉仔鸡法氏囊组织结构的影响见图1和2。由图1和2可以看出在42日龄时，对照组AA肉仔鸡的法氏囊退化现象明显，法氏囊皱襞较小，法氏囊小结体积大小不等，且不规则；试验组AA肉仔鸡的法氏囊没有出现退化现象，法氏囊小结的体积较大，排列紧密，有规则，皮质较厚，法氏囊皱襞较发达。

图1　对照组鸡法氏囊(100×，H·E)

图2　试验组鸡法氏囊(100×，H·E)

2.2中草药免疫促进剂对AA仔鸡脾脏组织结构的影响

中草药免疫促进剂对AA肉仔鸡脾脏组织结构的影响见图3和4。由图3和4可以看出，在42日龄时，与对照组相比较，试验组AA肉仔鸡脾脏的脾小体数量较对照组增多，其中淋巴细胞排列较对照组紧密有序；试验组AA肉仔鸡脾脏组织结构中红髓与白髓的界线清晰，且脾小体的体积较对照组大，而对照组AA肉仔鸡脾脏组织结构中红髓与白髓界线不清晰。

图3　对照组鸡脾脏(100×，H·E)

图4　试验组鸡脾脏(100×，H·E)

3结论与讨论

法氏囊又称腔上囊或泄殖腔囊，是禽类特有的中枢免疫淋巴器官, 是B淋巴细胞发育的场所，在淋巴细胞诱导分化过程中起着重要作用，具有免疫应答功能。正常健康家禽的法氏囊壁形成一些皱襞，皱襞内分布着很多法氏囊淋巴小结，其周边为皮质，中央为髓质[4]，干细胞在胚胎时期通过血液循环进入法氏囊髓质部，在上皮性网状细胞构成的微环境诱导下，不断分裂分化，形成各种特异性的B淋巴细胞(囊依赖性淋巴细胞)，经过法氏囊皮质部的毛细血管迁移到全身各处的淋巴组织和淋巴器官。

法氏囊在有相应抗原刺激时被激活，行使体液免疫功能；若法氏囊被过早摘除或受病毒(如传染性法氏囊病病毒)感染，将导致体液免疫功能受损，抵抗力下降，法氏囊在家禽性成熟前体积发育达到最大，以后逐渐萎缩退化直至完全消失[5]；李升和等[6]研究表明，肉仔鸡4周龄时法氏囊皱襞内淋巴滤泡急剧减少，说明其法氏囊组织结构在4周龄时开始出现退化现象。

本研究结果表明，在基础日粮中添加一定量的中草药免疫促进剂，在42日龄时，试验组AA肉仔鸡的淋巴器官法氏囊壁的皱襞仍然发达完整，法氏囊皱襞内的淋巴小结排列紧密有序，有规则，淋巴小结的皮质较厚。表明中草药免疫促进剂可延缓AA肉仔鸡淋巴器官法氏囊的退化，对法氏囊的发育具有促进作用，能提高法氏囊的免疫功能。

脾脏是家禽有机体免疫应答的重要场所，家禽脾脏由白髓和红髓构成，白髓由脾小体和动脉周围淋巴鞘组成, 红髓由脾索和脾窦组成[7]。脾脏是家禽体内最大的免疫器官，含有大量的免疫活性细胞，是机体细胞免疫和体液免疫的中心。健康家禽脾脏的白髓中脾小结数量较少，体积较小，当发生体液免疫应答时，数量增多，体积增大[8]。动脉周围淋巴鞘属胸腺依赖区，当发生细胞免疫应答时，此区明显增厚。脾脏的良好发育对提高家禽的免疫功能有着重要的作用。

试验研究的结果表明，基础日粮中添加一定量的中草药免疫促进剂，在42日龄时，脾脏组织结构发育较为明显，试验组AA肉仔鸡脾脏中红髓与白髓界线较为清晰，试验组AA肉仔鸡的脾小结较对照组明显增多，脾小结中淋巴细胞排列紧密有序，表明中草药免疫促进剂同样可延缓试验组AA肉仔鸡脾脏的退化，促进脾脏的发育。这与某些研究者采用中草药单方或复方的结果基本一致[9]。金光明等[10]试验研究表明在饮水中添加中草药免疫促进剂对草杂鸡生殖器官组织结构的发育没有影响。

总之，试验研究的结果表明，日粮中添加200 mg/kg中草药免疫促进剂能改善AA肉仔鸡淋巴器官法氏囊和脾脏组织结构的发育，增强免疫器官的免疫力。

参考文献：

[1]杨宁．家禽生产学[M]．北京：中国农业出版社，2002：72．

[2]刘忠宽，智建飞，李英杰，等．中草药饲料添加剂研究进展[J]．河北农业科学，2005，9(2)：73-77．

[3]刘学剑．植物提取物开发应用的影响因素及对策[J]．饲料研究，2008(2)：19-21．

[4]张伟武，朱家新，陆国林，等．“绿源素”对黄羽肉鸡生产性能和免疫功能的影响[J]．上海畜牧兽医通讯，2006(3)：27-28．

[5]沈霞芬．家畜组织学与胚胎学(第3版)[M]．北京：中国农业出版社，2003：113-123．

[6]李升和，范光丽，王珏，等．日粮中添加谷氨酰胺对肉仔鸡法氏囊发育的影响[J]．中国兽医杂志，2006，42(11)：14-16．

[7]王福传，韩一超，赵洪恩，等．复方中草药免疫增强剂对鸡免疫器官组织形态学影响的研究[J]．中国预防兽医学报，2001，23(6)：419-421．

[8]翟少钦，王天益，程安春．增免灵对鸭腺病毒蜂胶复合佐剂灭活疫苗的免疫增强作用[J]．中国兽医杂志，2003，39(3)：36-39．

[9]周先建，孙祯保，刘圣楠，等．中草药酵母硒硼对 AA 肉鸡生长性能的影响[J]．安徽科技学院学报，2014，28(5)：10-14．

[10]金光明，靳二辉，李升和，等．中草药免疫促进剂对草杂鸡生殖器官组织结构的影响[J]．安徽科技学院学报，2014，28(2)：1-4．

(责任编辑：马世堂)

收稿日期：2016-01-16

基金项目：安徽省科技攻关项目(1301042102)；安徽省农业科技成果转化资金项目 (12040302012)。

作者简介：金光明(1962-)，男，安徽省桐城市人，学士，教授，主要从事中草药免疫研究。

中图分类号：S852.16+2

文献标识码：A

文章编号：1673-8772(2016)03-0001-04

Effects of Chinese Herbal Medicine Immune Promoter on AA Broilers in Morphological Structure of Bursa and Spleen

JIN Guang-ming1, JIN Er-hui1, LI Sheng-he1, LIU Sheng-nan1, DIN Chen-hong2

(1. Animal Science College，Anhui Science and Technology University; Fengyang 233100，China;2.Anhui AnFenTang Animal Medicine Ltd, Hefei 230036，China)

Abstract：It is to study the effect of Chinese herbal medicine immune promoter on AA broilers in morphological structure of bursal and spleen.200 healthy AA broilers at the age of 1 day old were selected and randomly divided into experimental and control group of 100. Every group have four repeating group. Chinese herbal medicine immune promoter by 0 and 200 mg / kg is added to basal diet. A trial period was 42 days. At the age of 42 days,10 broilers in each repeating group were randomly selected, killed by jugular vein blooding. The chicken bursa of Fabricius and spleen tissue samples were collected and placed in the Bouin fixative. The production technology is to use paraffin tissue sections for histologic examination, Olympus CH-30 microscope photographs. The results show that experimental groups bursa of Fabricius and spleen of AA broilers have a slower degradation than the control group, which changes the morphological structure of the spleen.This is more obvious in the spleen.The chicken bursa in the experimental group compared with the control group has more developed folds. Frances capsule lymphoid nodules arrange more closely , the structure of spleen red pulp and white pulp line more clear in the test group than in the control group.Spleen is significantly increased. The results show that the Chinese herbal medicine immune promoter can promote the development of immune organs of AA broilers.

Key words:Chinese herbal medicine immune promoter; AA broilers; Bursa; Spleen; Morphological structure; development