扶芳藤醇提液对小鼠凝血四项的影响

蒋力群霍 宇杨 捷（ 中国人民解放军第303医院药剂科，广西 南宁 530000； 广西中医药大学赛恩斯新医药学院，广西 南宁 530；3 中国人民解放军第303医院药剂科，广西 南宁 530000）



扶芳藤醇提液对小鼠凝血四项的影响

蒋力群1霍 宇2杨 捷3*
（1 中国人民解放军第303医院药剂科，广西 南宁 530000；2 广西中医药大学赛恩斯新医药学院，广西 南宁 530222；3 中国人民解放军第303医院药剂科，广西 南宁 530000）

【摘要】目的 研究中药扶芳藤的凝血作用。方法 实验动物随机分为6组，即空白对照组、阳性对照组、扶芳藤醇提液高、中、低剂量组，测定扶芳藤醇提液对对小鼠凝血酶时间（TT）、凝血酶原时间（PT），活化部分凝血活酶时间（APTT）和纤维蛋白原（FIB）的影响。结果 扶芳藤醇提液能明显缩短小鼠TT、PT、APTT，增加FIB含量。结论 扶芳藤醇提液具有显著的凝血作用。

【关键词】扶芳藤；凝血时间；凝血四项

扶芳藤（Enonymus fortunei （Ture.）Hand-Mazz）系卫矛科卫矛属植物，属民间草药。《中药大辞典》记载“扶芳藤治腰肌劳损，关节酸痛、补肾强筋，安胎，止血消癖”［1-2］。本实验在前期研究工作基础上以云南白药为阳性对照药物，验证中药扶芳藤的凝血作用，探讨其作用机制，为中药扶芳藤下一步开发利用应用提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 药物及试剂：扶芳藤原药材由广西中医学院制药厂科研所提供，经广西中医药大学赛恩斯新医药学院苑敏教授鉴定，药材用12倍量60%乙醇，提取2次，每次1 h，3.8 g生药/g；实验时以蒸馏水配成所需浓度；云南白药（批号：20080629），云南白药集团股份有限公司；109 mmol/L枸橼酸钠溶液（批号：20060323），广东达濠精细化学品公司；凝血酶原时间（PT）试剂盒（批号：105090），北京莱博生物实验材料研究所；活化部分凝血活酶时间（APTT）试剂盒（批号：111021），北京莱博生物实验材料研究所；凝血酶时间（TT）试剂盒（批号：111027），北京莱博生物实验材料研究所；纤维蛋白原（FIB）试剂盒（批号：1110131），北京莱博生物实验材料研究所。

1.1.2 实验动物：昆明种小鼠，体质量18～22 g，雌雄兼用，购自广西医科大学实验中心，合格证号：SCXK桂2009-0002，标准饲料喂养，自由摄食，自由饮水。医学实验动物环境设施合格证号（桂）医动字第12006号，使用许可证号SYXK（桂）2003-0001。

1.1.3 实验仪器：Sysn ECA-150型全自动血凝仪，日本东亚医用电子仪器有限公司；TU-1901型紫外可见分光光度计，北京普析通用仪器有限责任公司。

1.2 方法［3］：取健康昆明种小鼠60只，体质量（20±2）g，雌雄兼用，随机分成5组，12只/组。即空白对照组（生理盐水，NS）、阳性药对照组、扶芳藤醇提液高、中、低三个剂量组。空白对照组给予等容积NS，阳性对照组给予云南白药1 g/kg，用药组高剂量组（18 g生药/kg），中剂量组（9 g生药/kg），低剂量组（4.5 g生药/kg），灌胃给药（ig），给药容量为20 mL/kg。每天给1次，连续7 d。末次给药后1 h，拔眼球取血1.5 mL，缓慢注入含0.5 mL 109 mmol/L枸橼酸纳溶液的塑料试管中，充分混匀。以3000 rpm离心15 min去除血小板，分离血浆，采用Sysn ECA-150型全自动血凝仪，测定凝血四项：凝血酶原时间（PT）、激活部分凝血酶原时间（APTT）、凝血酶时间（TT）、纤维蛋白原含量（FIB）。

1.3 统计学方法：采用统计学软件SPSS17.0进行统计学处理，数据结果以均数±标准差表示，组间比较采用方差分析，以P＜0.05具有统计学意义。

2 结 果

云南白药与扶芳藤醇提液高、中、低剂量组均能明显缩短实验小鼠PT、APTT和TT，提高血浆FIB，与空白对照组比较有显著性差异（P＜0.05或P＜0.01）。结果见表1。

表1 扶芳藤醇提液对小鼠PT、APTT、TT、FIB的影响（±s）

表1 扶芳藤醇提液对小鼠PT、APTT、TT、FIB的影响（±s）

注：与空白对照组组比较*P＜0.05，**P＜0.01

组 别　　剂量（g/kg）　n　PT（sec）　APTT（sec）　TT（sec）　FIB（g/L）空白组　-　12　8.79±1.02　21.74±1.58　24.78±3.09　1.76±0.39云南白药组　1　12　7.14±0.42**　17.24±1.23**　18.21±1.21**　2.94±0.63**高剂量组　18　12　7.26±0.48**　17.18±1.09**　18.56±2.09**　2.59±0.72**中剂量组　9　12　7.63±0.63*　17.46±1.35**　19.58±1.83**　2.51±0.54**低剂量组　4.5　12　7.26±0.66**　17.91±1.46**　16.69±1.72**　2.41±0.49*

3 讨 论

止血过程是复杂的生理功能，包括血管收缩、血小板聚集和血液凝固三个因素。如外伤出血，则见局部血管收缩，血小板在血管破裂处凝集，破裂并释放出血管收缩物质及“凝血因子”，而组织液及血浆中的一些凝血因子（因子Ⅴ，Ⅶ，Ⅷ，Ⅸ，Ⅺ，Ⅻ等）也受到激活而参与血凝过程，于是血块形成，出血停止［4］。

凝血酶原时间（PT）测定，属于检测外源性凝血途径的筛选性试验，主要用于筛选检测外源凝血系统因子Ⅶ、Ⅴ、Ⅹ和相关因子的抑制物的试验［5-7］；活化部分凝血活酶时间（APTT）测定，反映Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ等内源凝血途径因子的活性，是内源性凝血系统较敏感和常用的筛选方法［8］；纤维蛋白原（FIB）由α、β、γ三对不同多肽链所组成，多肽链间以二硫键相连。在凝血酶作用下，α链与β链分别释放出A肽与B肽，生成纤维蛋白单体。在此过程中，由于释放了酸性多肽，负电性降低，单体易于聚合成纤维蛋白多聚体。进一步在Ca2+与活化的Ⅷ因子作用下，单体之间以共价键相连，则变成稳定的不溶性纤维蛋白凝块，完成凝血过程［9］；凝血酶（TT）时间测定是检测凝血、抗凝及纤维蛋白溶解系统功能的一个关键试验［10］。

本实验结果显示，扶芳藤醇提液各剂量组均可不同程度的缩短APPT及PT时间，表现为同时影响小鼠的内源性和外源性凝血系统起而到促凝作用；本品使凝血时间时间缩短FIB含量增高，提示本品的止血作用可能与影响小鼠纤维蛋白溶解系统有关。扶芳藤药用历史悠久，历代本草对它的功效均有论述。本实验通过初步的凝血研究，扶芳藤醇提液能明显缩短小鼠血浆TT、PT、APTT，增加FIB含量，有较为显著的凝血作用，但其成分复杂，要明确其凝血作用具体机制，尚待进一步深入研究。

参考文献

［1］ 国家中医药管理局《中华本草》编委会.中华本草［M］.上海:上海科学技术出版社，1999: 827.

［2］ 江苏新医学院.中药大辞典［M］.上海:上海科学技术出版社出版，1986:108.

［3］ 徐淑云，卞如濂，陈修.药理实验方法学［M］.3版.北京:人民卫生出版社，2002:1271.

［4］ 姚泰.生理学［M］.5版.北京:人民卫生出版社，2002:63.

［5］ Smythe MA，Koberber JM，Nowak SN，et al.Correlation between activated clotting time and activated partial thromboplastin times［J］. Ann Pharmacother，2002，36（1）:7.

［6］ 费鲜明，陈艳，吴万飞，等.仙鹤草水体物体外对血小板聚集、凝血功能及血液流变学的影响［J］.中国临床药理学与治疗学，2013，18（1）:10.

［7］ Eikelboom JW，Weitz JI.Selective factor Xa inhibition for thromboprophylaxis ［J］.Lancet，2008，372（9632）:6.

［8］ 王珍，杨靖亚，宋书杰，等.三七素对凝血功能的影响及止血机制［J］.中国新药杂志，2014，23（3）:356.

［9］ 苏敏，梁慧超，孟江，等.姜炭对虚寒性出血证大鼠凝血功能，血栓素B2和6-酮-前列腺F1α的影响［J］.中国实验方剂学杂志，2013，19（9）:190.

［10］ 王振义.止血与血栓基础理论与临床［M］.上海:上海科学技术出版社，1996:104.

中图分类号：R284

文献标识码：B

文章编号：1671-8194（2016）10-0041-02

基金项目：2015年度广西高校科学技术研究项目（KY2015YB513）

*通讯作者：E-mail：huoyu_10@163.com