老年结直肠癌血清可溶性细胞间黏附分子-1及炎性因子表达的临床意义*

陈　翔，陆宝华，袁　杰，江伟廷，梁发东，钮　静，曾小兵

(上海中医药大学附属曙光医院(宝山分院)/上海市宝山区中西医结合医院:1.普外科；2.检验科　201900)



老年结直肠癌血清可溶性细胞间黏附分子-1及炎性因子表达的临床意义*

陈翔1，陆宝华1，袁杰1，江伟廷1，梁发东2，钮静2，曾小兵1

(上海中医药大学附属曙光医院(宝山分院)/上海市宝山区中西医结合医院:1.普外科；2.检验科201900)

[摘要]目的探讨血清可溶性细胞间黏附分子-1(sICAM-1)及炎性因子[C反应蛋白(CRP)、白细胞介素-17(IL-17)]在老年结直肠癌(CRC)患者中表达的临床意义。方法采用酶联免疫吸附测定(ELISA)对76例老年CRC患者(老年CRC组)及32例中青年CRC患者(中青年CRC组)手术前后外周血中sICAM-1、CRP和IL-17的表达水平进行检测，分析其与临床病理参数间的意义，并与60例健康体检者(对照组)比较。结果不同年龄CRC患者术前和术后血清sICAM-1和IL-17水平均高于对照组(P<0.05)，术后二者水平较术前均明显降低(P<0.05)。中青年CRC组术后及老年CRC组术前、术后CRP水平均与对照组，差异无统计学意义(P>0.05)。中青年CRC组术前CRP水平高于对照组(P<0.05)。中青年CRC组术前和术后血清sICAM-1和IL-17水平与老年CRC组比较，差异有统计学意义(P<0.05)，而CRP水平两组，差异无统计学意义(P>0.05)。老年CRC患者中sICAM-1水平在分化程度、浸润深度、伴有淋巴结转移及TNM分期等方面组间差异有统计学意义(P<0.05)；IL-17水平在分化程度、浸润深度、伴有淋巴结转移、肿瘤大小及TNM分期等方面组间差异有统计学意义(P<0.05)；CRP水平在浸润深度、伴有淋巴结转移及TNM分期等方面组间差异有统计学意义(P<0.05)。结论血清sICAM-1、CRP和IL-17水平在一定程度上反映了老年CRC的侵袭转移过程，在预测老年CRC患者发展及预后方面具有重要意义。

[关键词]结直肠肿瘤；细胞黏附分子；肿瘤分期；可溶性细胞间黏附分子；C反应蛋白；白细胞介素

结直肠癌(colorectal cancer，CRC)是胃肠外科常见的恶性肿瘤，其发病率和病死率分别位居上海市全部恶性肿瘤的第2和第4位，且随年龄增长有上升的趋势[1]。CRC是多因素、多基因、多阶段参与的，其恶性程度主要由浸润和转移特性决定。有研究认为CRC的发病与免疫炎症之间关系紧密[2]，但具体机制不清。辅助性T 细胞17(Th17)是新型T细胞亚群，可分泌白细胞介素17(IL-17)等炎性细胞因子，参与CRC的发生、发展[3]。近年来黏附因子的异常表达与肿瘤浸润、转移的关系激起广泛的研究，相关实验表明大肠癌患者血清可溶性细胞黏附因子-1(sICAM-1)水平与癌转移关系密切[4]。为此，本研究检测了老年CRC患者血清细胞黏附分子及炎性细胞因子的表达情况，并与中青年CRC患者和健康者比较，分析这些指标在老年CRC发生、发展中的作用和意义。

1资料与方法

1.1一般资料选取本院普外科2012年3月至2014年5月收治的行根治性手术的老年CRC患者76例为老年CRC组，男42例，女34例，年龄61～83岁，平均74岁，诊断依据临床症状、影像学检查、消化道内镜检查及病理证实。临床病理pTNM分期标准参考2014年美国国立综合癌症网络(NCCN)指南，相关临床病理参数包括性别、年龄、肿瘤大小、肿瘤类型、分化程度、浸润深度、是否伴有淋巴结转移、TNM分期等。全部患者术前均未接受放化疗或靶向治疗。选择同时期中青年CRC患者32例为中青年CRC组，男18例，女14例，年龄32～60岁，平均48岁，诊断标准同上。另选择同期在本院进行体检的60例老年健康者作为对照组，男32例，女28例，年龄64～85岁，平均76岁，体温、胸片、血常规正常，既往无心肝肺及肾等脏器疾病。

1.2方法CRC患者术后血清标本采自术后1个月化疗前。所有外周血标本均于清晨空腹采血，离心后取上层液于-20 ℃低温冰箱中保存待测。外周血标本中sICAM-1和IL-17含量采用双抗体夹心酶联免疫吸附测定(ELISA)。sICAM-1购于美国Bender Med systems公司；IL-17购于北京晶美生物工程有限公司；C反应蛋白(CRP)检测应用日本希森美康 Sysmex KX-21检测，操作按说明书步骤进行。

2结果

2.1不同年龄CRC患者手术前后与对照组血清sICAM-1、CRP和IL-17水平的比较不同年龄CRC患者术前和术后血清sICAM-1和IL-17水平均高于对照组(P<0.05)，术后二者水平较术前均明显降低(P<0.05)。中青年CRC组术后及老年CRC组术前、术后CRP水平均与对照组，差异无统计学意义(P>0.05)。中青年CRC组术前CRP水平高于对照组(P<0.05)。中青年CRC组术前和术后血清sICAM-1和IL-17水平与老年CRC组比较差异有统计学意义(P<0.05)，而CRP水平相仿(P>0.05)，见表1。

表1　3组血清sICAM-1、CRP和IL-17水平的比较

a：P<0.05，与对照组比较；b：P<0.05，与术前比较；c：P<0.05，与老年CRC组比较。

表2　老年CRC患者sICAM-1、CRP和IL-17水平与临床病理因素的关系

a：P<0.05，组内比较。

2.2老年CRC患者术前血清sICAM-1、CRP和IL-17水平与临床病理参数的关系血清sICAM-1水平在分化程度、浸润深度、伴有淋巴结转移及TNM分期等方面组间差异有统计学意义(P<0.05)，而在性别、年龄、肿瘤大小和大体类型等方面组间差异无统计学意义(P>0.05)；IL-17水平在分化程度、浸润深度、伴有淋巴结转移、肿瘤大小及TNM分期等方面组间差异有统计学意义(P<0.05)，在性别、年龄和大体类型等方面组间差异无统计学意义(P>0.05)；CRP水平在浸润深度、伴有淋巴结转移及TNM分期等方面组间差异有统计学意义(P<0.05)，在性别、年龄、肿瘤大小、分化程度和大体类型等方面组间差异无统计学意义(P>0.05)，见表2。

3讨论

侵袭和转移是恶性肿瘤特有的生物学行为之一。而内皮细胞与癌细胞间的黏附作用被认为是介导肿瘤转移的关键步骤。细胞黏附分子不仅能帮助肿瘤细胞躲避机体免疫监视，而且能抑制NK细胞的毒性，促进肿瘤细胞的侵袭和转移[5]。目前细胞黏附分子家族中研究较多的主要是上皮钙黏黏蛋白(Ecad)和sICAM-1，它们均在肿瘤的发生、发展中发挥重要作用[4-5]。韩业红等[6]研究发现乳腺癌患者血清sICAM-1水平与TNM分期、淋巴结转移相关，可用于早期诊断、评价手术效果和监测术后复发。相关试验表明CRC患者血清sICAM-1水平与癌转移关系密切[4]。前期研究发现在CRC组织中sICAM-1阳性表达率明显高于正常结直肠组织(73.7%vs.15.0%，P<0.05)[7]。CRC组织中ICAM-1表达在肿瘤大小、浸润深度、淋巴结转移、TNM分期和Dukes分期等方面组间差异有统计学意义(P<0.05)。本研究显示随着CRC病理TNM分期的改变，血清中sICAM-1的水平随着病期的进展而逐渐升高，且浸润层次越深，分泌入血中的sICAM-1水平越高；在伴区域淋巴结转移者中，血清sICAM-1水平较高。这表明CRC血清中sICAM-1的浓度与肿瘤的浸润和转移程度呈正相关，提示sICAM-1可作为评估CRC病情进展的一个指标。

CRP作为炎症蛋白，虽然是炎症细胞因子产生的一个标志，但研究发现在一些肿瘤中水平明显高于正常对照者[8-9]。本研究结果亦表明CRC患者术前血清CRP水平较对照组高。徐泳等[9]研究表明胃癌患者血浆CRP水平不但明显高于对照组，而且随着胃癌严重程度的增加而增高。更进一步研究发现CRC在浸润深度不超过肌层者其CRP的水平显著低于浸润至浆膜组织者(P<0.05)[10]。本研究亦显示浸润深度突破肌层者CRP浓度明显升高。阮森林等[11]研究显示CRC患者复发组术后2周血清CRP浓度有所回升，未复发组则较术前显著下降(P<0.05)，血清CRP水平的变化有助于判断复发可能。本研究结果表明CRC患者血清中CRP表达水平与肿瘤浸润深度、TNM分期及有淋巴结转移有关，且肿瘤突破浆膜、伴淋巴结转移、TNM分期越高，则表达水平越高，这提示在CRC的进展或复发转移时可合成更多的CRP，与上述研究结果基本相似。

IL-17是由Th17细胞所产生，主要生物学作用为促进炎性反应[12]。相关实验研究发现IL-17亦参与在肿瘤的发生、发展。在动物实验中Sobhani等[13]发现IL-17+/+的荷瘤鼠肿瘤生长速度及肿瘤大小均明显大于IL-17-/-的荷瘤鼠。国内资料表明，CRC患者外周血中IL-17水平和CRC的肿瘤负荷及疾病的进展程度密切相关[14-15]。黄伟刚等[14]研究显示CRC组患者外周血清IL-17的水平明显高于健康志愿者组(P<0.01)；IL-17水平的升高与性别和年龄无关，而与肿瘤大小、Dukes分期、是否存在远处转移及病理组织学分型关系密切(P<0.01)。张晓鹏等[16]结果表明IL-17的表达水平与肿瘤的浸润深度、分化程度，TNM分期、有无神经浸润等有关(P<0.05)。本研究结果表明术前CRC患者血清中 IL-17表达水平明显高于对照组,且肿瘤浸润深度增加、分化程度越低、TNM分期越高，则表达水平亦越高，这与上述研究结果基本相仿。这也意味着IL-17的高表达可能参与CRC的发生、发展。但是目前关于IL-17在CRC中的作用尚存争议，多数学者倾向于IL-17有利于促进CRC的发生与发展[17-18]；另一部分学者则认为IL-17能刺激抗肿瘤的免疫应答机制而达到抑制肿瘤的作用[19]。因此尚需更进一步深入研究其中的差异。

本研究结果发现，不同年龄组中血清sICAM-1和IL-17水平差异有统计学意义(P<0.05)。可能的原因为：较之于中青年患者，老年CRC起病隐匿、症状不典型，常表现为腹痛、便血，以及习惯性便秘，加之年龄大，体液调节、神经反应迟钝，因此轻微腹痛易被忽视，持续时间可能较长[20]。中青年患者因腹痛发生率高，进行大肠镜检查有利于提高CRC的检出率。病程较长可能反映在肿瘤病理T分期相对较高，相关炎性因子及细胞黏附分子随浸润深度增加而升高。在组织学类型上，老年患者以中高分化型癌居多，而中青年患者则以低分化型癌为主[21]。不同分化程度的肠癌炎性因子及细胞黏附分子水平存在差异，这在许多类似的研究中得以证实。但中青年CRC与老年CRC患者炎性因子及细胞黏附分子表达差异的具体机制尚不明了，尚有待进一步研究。

总之，炎性细胞因子sICAM-1、CRP和IL-17的血清水平随CRC发生、发展而逐渐升高，可能在CRC肿瘤微环境的改变中发挥重要作用，尚需进行更深入的基因水平探讨。

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Expression of soluble intercellular adhesion molecule -1 and inflammatory factor in elderly patients with colorectal carcinoma*

Chen Xiang1,Lu Baohua1,Yuan Jie1,Jiang Weiting1,Liang Fadong2,Niu Jing2,Zeng Xiaobing1

(1.DepartmentofGeneralSurgery;2.DepartmentofClinicalLaboratory,BaoshanBranch,theAffiliatedShuguangHospitalofShanghaiUniversityofTraditionalChineseMedicine,Shanghai201900,China)

[Abstract]ObjectiveTo investigate the clinical significance of soluble intercellular adhesion molecule-1 and inflammatory factors (CRP,IL-17) in elderly patients with colorectal carcinoma.MethodsThe expression of sICAM-1,CRP and IL-17 in 76 cases of elderly patients and 32 cases of youg patients with colorectal cancer were detected by enzyme linked immunosorbent assay before and after surgery,and to analyze its clinical significance correlated with pathological parameters.Meanwhile,60 cases of healthy were controls.ResultsThe serum levels of IL-17 and sICAM-1 were higher in patients with different ages of colorectal cancer than those of the normal control group (P<0.05),and the concentrations of the two group after operation were significantly lower than those of the normal control group (P<0.05).The CRP levels of the young group and old group were similar to that of the normal control group (P>0.05).The level of CRP before operation in the young group was higher than that in the normal control group (P<0.05).The levels of serum IL-17 and sICAM-1 were significantly different between the young and the old group(P<0.05),while the CRP level was similar in the two groups (P>0.05).The serum levels of sICAM-1 and IL-17 in colorectal cancer patients were associated with the degree of differentiation,depth of invasion,lymph node metastasis and TNM staging (P<0.05).The level of CRP was significantly correlated with the depth of invasion,lymph node metastasis and TNM staging(P<0.05).ConclusionThe serum levels of sICAM-1,CRP and IL-17 reflect the invasion and metastasis of colorectal cancer in a certain extent,which play important roles in predicting the development and prognosis of colorectal cancer.

[Key words]colorectal carcinoma;cell adhesion molecule;tumor staging;soluble intercellular adhesion molecules;C reactive protein;interleukin

doi:论著·临床研究10.3969/j.issn.1671-8348.2016.16.013

*基金项目：上海市宝山区科学技术委员会科研项目(E-12-18)；上海市宝山卫生青年医学人才培养项目(bswsyq-2015-A10)。

作者简介：陈翔(1979-)，主治医师，博士，主要从事胃肠道肿瘤研究。

[中图分类号]R446.62

[文献标识码]A

[文章编号]1671-8348(2016)16-2202-03

(收稿日期：2015-10-22修回日期：2016-01-16)