对称双氮杂靛红席夫碱的合成及抗肿瘤活性研究

王　兰，宋慧慧，梁承远，肖亚东

(1.陕西科技大学 食品与生物工程学院，陕西 西安　710021；2.广州科技职业技术学院，广东 广州　510550)



对称双氮杂靛红席夫碱的合成及抗肿瘤活性研究

王兰1，宋慧慧1，梁承远1，肖亚东2

(1.陕西科技大学 食品与生物工程学院，陕西 西安710021；2.广州科技职业技术学院，广东 广州510550)

摘要：研究表明，席夫碱类化合物具有良好的抗肿瘤生物活性.以氮杂靛红及其衍生物、水合肼为原料，合成了一系列对称双氮杂靛红席夫碱，并对合成的化合物进行了结构表征与初步的抗肿瘤活性测试.结果显示所合成化合物对不同的肿瘤细胞株表现出不同程度的抑制作用，其中化合物1、6、7、11、12、18、19的活性较好，尤其是对HepG2细胞株的抑制活性较高.在此基础上，进一步研究了不同取代基对氮杂靛红席夫碱抗肿瘤活性的影响，总结了构效关系，结果发现在卤素取代的氮杂靛红母核能提高氮杂靛红席夫碱类化合物的抗肿瘤活性.本研究为为氮杂靛红席夫碱类化合物二次优化和进一步获得候选药物有提供了重要的依据.

关键词：氮杂靛红；席夫碱；抗肿瘤；药物合成

0引言

席夫碱(Schiff碱)是含有亚氨基(>C=N-)的一类化合物，由羰基化合物(>C=O)和胺基化合物(-NH2)缩合而成.席夫碱类化合物由于它们所含C=N基团的功能性、电子效应以及与中心离子的作用而具备突出的性能[1-3]，使得其在医药[4]、催化[5]、化学分析[6]、腐蚀[7]以及光致变色[8]等领域有着广泛的应用.席夫碱类化合物结构中可以引入S、O、N等多种原子，含O、S、N的席夫碱及其金属配合物，以其良好的抗肿瘤、抗菌和抗病毒的生物活性受到医药工作者的重视[9-11].其中，以水合肼和羰基化合物合成的对称席夫碱因为结构的稳定性以及突出的生物活性，使其具有较高的研究价值，受到越来越多研究者的关注[12-14].

靛红(isatin)，又名2,3-吲哚二醌，是一种重要的生物活性物质.已有研究证明靛红及其衍生物具有抗衰老、抗肿瘤、抗菌、抗病毒、降血脂、神经保护等多种生物活性[15-18].靛红具有独特的电子特性和优越的3位羰基活性位点，为其衍生物的合成提供了广阔的空间，因此对靛红及其衍生物的合成、结构修饰和活性研究成为目前新药研究的热点之一[19,20].

Rajaram等[21]合成了一类新型的靛红席夫碱化合物，并证明其有较好的镇痛作用.梁承远等[22]合成了一类对称的双靛红席夫碱，进行了体内和体外的活性研究，结果表明这类化合物有明显的抗肿瘤活性.Azizian等[23]的研究结果也证明了靛红席夫碱类化合物的抗肿瘤活性.随着人们对靛红席夫碱类化合物越来越多的研究，合成了结构丰富的靛红席夫碱及其衍生物，更多的生物活性也逐渐被证实[24-28].氮杂靛红是靛红的生物电子等排体，也具有3位羰基活性位点，因此本文尝试在上述研究的基础上利用氮杂靛红及其衍生物、水合肼为原料，合成了一类结构对称的双氮杂靛红席夫碱类化合物，并对其抗肿瘤活性进行了初步测试.

1实验部分

1.1仪器与试剂

NMR由BRUKER400MHZ核磁共振仪测定.所用试剂 (氮杂靛红及其衍生物、水合肼，MTT等)均为分析纯，使用前未经进一步纯化.人肝癌细胞株，人肺癌细胞株，人胃癌细胞株由广东医科大学提供.

1.2实验方法

1.2.1对称双氮杂靛红席夫碱的合成

(1)将适量氮杂靛红或其衍生物用乙醇溶解，置于锥形瓶中，磁力搅拌下缓慢滴加到水合肼的有机溶剂中，氮杂靛红或其衍生物与水合肼投料的摩尔比为1∶1.5，加热到75 ℃～85 ℃.

(2)用薄层色谱法跟踪反应，反应完全后将反应体系的混合液趁热抽滤，用乙醇洗涤，滤液静置析晶得到中间体.

(3)将上述得到的中间体与氮杂靛红或其衍生物按摩尔比1∶1.3置于反应器中，继续加热、搅拌，70 ℃～90 ℃下回流反应.

(4)TCL跟踪至反应完全，停止加热，撤去冷凝装置.将反应体系的固液混合物减压浓缩，然后冷却至室温过滤，滤饼用温水洗涤，得到对称双氮杂靛红席夫碱粗品.

(5)将对称双氮杂靛红席夫碱粗品加入到反应器中，加入乙醇进行重结晶、过滤、干燥得到目标产物.合成路线如图1～2所示.

图1　对称双5-N杂靛红席夫碱的合成

图2　对称双7-N杂靛红席夫碱的合成

1.2.2对称双氮杂靛红席夫碱的结构鉴定

对合成的化合物通过核磁共振氢谱(1H-NMR)与碳谱(13C-NMR)进行结构表征.

1.3对称双氮杂靛红席夫碱的抗肿瘤活性测定

对合成的化合物用MTT法进行肿瘤细胞增殖抑制试验.细胞株选用：人肝癌细胞(HepG2)，人肺癌细胞(A-549)，人胃癌细胞(SGC-7901).培养液为DMEM+15%NBS+双抗.

1.3.1样品液的配制

用DMSO(Merck)溶解后，加入PBS(-)配成的100 μmol/L的溶液或者均匀的混悬液，然后用DMSO的PBS(-)稀释，最终浓度分别为0.1、1、10、20、40、60、80、100 μmol/L.将上市的抗肿瘤药物阿糖胞苷(Ara-C)以同样的条件配成对照品溶液.

1.3.2细胞培养

贴壁生长肿瘤细胞培养于含10% 灭活新生牛血清和青霉素、链霉素(各100万U/L)的1 640培养液中，置于37 ℃，5%CO2，饱和湿度的二氧化碳培养箱中培养.细胞贴壁生长，每2～3 天传代1 次，传代时首先倒出培养液，PBS洗2次，胰酶消化后，加入新鲜的培养液吹打均匀，调整细胞至适当浓度移入新的培养瓶中，添加培养液至适量.取对数生长期细胞用于实验.

1.3.3测试方法

取对数生长期细胞，消化、计数，以 2×104/mL的密度接种于96孔培养板中，每孔100 μL.培养 24小时后，将待测化合物以0.1、1、10、20、40、60、80、100 μmol/L浓度处理细胞.实验组每个浓度设5个复孔，以含0.4%DMSO的培养液作对照.药物作用 48小时后，去上清，每孔加入100 μLMTT(2-(4，5-二甲基-2-噻唑基)-3，5-二苯基-2H-四唑氢溴酸盐)(1mg/mL)，继续培养4小时，弃上清，每孔加入100 μLDMSO，振荡混匀，用酶标仪在570nm处测定吸光度值，采用IC50计算软件求出半数抑制浓度(IC50).

1.4统计学方法

将所得数据用SPSS11.0统计学软件进行录入、分析、处理，计量资料用(x±s)表示，两组间的计数资料比较进行t检验，以P<0.05为差异具有统计学意义.

2结果与讨论

2.1对称双氮杂靛红席夫碱化合物的合成

按照上述实验步骤，合成了10个对称双5-N杂靛红席夫碱化合物(1-10)和10个对称双7-N杂靛红席夫碱化合物(11-20)，如表1所示.

表1　合成的对称双氮杂靛红席夫碱类化合物

2.2对称双氮杂靛红席夫碱化合物的抗肿瘤活性

经MTT法对化合物1-20 进行初步的抗肿瘤活性测试，结果如表2所示.

表2　化合物对不同肿瘤细胞的半数抑制浓度IC50(单位：μmol/L)

从表2 可以看出，化合物1-20对三个细胞株均具有一定的抑制作用，其中化合物1、6、7、11、12、18、19的活性较好，尤其是对HepG2细胞株的活性较高.引起活性差异的原因可以归结为取代基之间的差别，由此可推断，对于双5-N杂靛红席夫碱化合物，R1取代基为低级烷基时的抗肿瘤活性优于取代或未取代的苯基，R2取代基为卤素时会提高化合物活性.对于双7-N杂靛红席夫碱化合物，R3取代基为卤素时活性较高，其中氯原子取代的活性优于溴原子取代，R4取代基为氢时活性优于其他取代基，这可能与氮原子上取代基的分子量增大会导致其水溶性差有关.

2.3对称双氮杂靛红席夫碱化合物的结构及表征

化合物 1-20 的结构经1H-NMR，13C-NMR与HRMS确认，波谱数据如下：

2.3.1化合物(1)

名称：(3Z,3′Z)-3,3′-(hydrazine-1,2-diylidene)bis(1H-pyrrolo[3,2-c]pyridin-2(3H)-one)，结构如图3所示.

图3　化合物(1)的化学结构

红色结晶粉末，M.P.178.0 ℃.1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ (ppm):9.6(2H,s),8.95(2H,s),8.78(2H,d,J=4.9Hz),7.20(2H,d,J=6.4Hz);13C-NMR(100MHz,DMSO-d6)δ(ppm):169.1,155.9，152.6,150.5,138.2,112.7,109.9;HRMS(ESI)for(M+H)+:calcd292.070 9,found292.071 3.

2.3.2化合物(2)

名称：(3Z,3′Z)-3,3′-(hydrazine-1,2-diylidene)bis(1-methyl-1H-pyrrolo[3,2-c]pyridin-2(3H)-one)，结构如图4所示.

图4　化合物(2)的化学结构

红色结晶粉末，M.P.178.0 ℃.1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm):8.94(2H,s),8.76(2H,d,J=4.5Hz),7.18(2H,d,J=5.3Hz),3.42(6H,s);13C-NMR(100MHz,DMSO-d6)δ(ppm):163.7,156.0，152.6,150.5,138.2,112.7,109.9,30.3;HRMS(ESI)for(M+H)+:calcd320.102 4,found320.102 7.

2.3.3化合物(3)

名称：(3Z,3′Z)-3,3′-(hydrazine-1,2-diylidene)bis(1-ethyl-1H-pyrrolo[3,2-c]pyridin-2(3H)-one)，结构如图5所示.

图5　化合物(3)的化学结构

暗红色色结晶粉末，M.P.194.5 ℃.1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm):8.94(2H,s),8.76(2H,d,J=7.2Hz),7.18(2H,d,J=5.6Hz),4.30(4H,q),1.39(6H,t);13C-NMR(100MHz,DMSO-d6)δ(ppm):163.4,156.0,152.7,150.5,138.2,112.7,109.8,42.4,13.9;HRMS(ESI)for(M+H)+:calcd348.358 5,found348.358 9.

2.3.4化合物(4)

名称：(3Z,3′Z)-3,3′-(hydrazine-1,2-diylidene)bis(1-propyl-1H-pyrrolo[3,2-c]pyridin-2(3H)-one) ，结构如图6所示.

图6　化合物(4)的化学结构

红色结晶粉末，M.P.184.3 ℃.1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm):8.94(2H,s),8.76(2H,d,J=6.8Hz),7.18(2H,d,J=7.3Hz),4.30(4H,q),1.75 (4H,m),0.98(6H,t);13C-NMR(100MHz,DMSO-d6)δ(ppm):163.3,155.9,152.5,150.6,138.2,112.6,109.8,44.7,20.6,11.7;HRMS(ESI)for(M+H)+:calcd376.165 0,found376.165 3.

2.3.5化合物(5)

名称：(3Z,3′Z)-3,3′-(hydrazine-1,2-diylidene)bis(1-isopropyl-1H-pyrrolo[3,2-c]pyridin-2(3H)-one)，结构如图7所示.

图7　化合物(5)的化学结构

暗红色结晶粉末，M.P.175.6 ℃.1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm):8.98(2H,s),8.77(2H,d,J=6.9Hz),7.18(2H,d,J=10.3Hz),3.96(2H,m),1.29(12H,s);13C-NMR(100MHz,DMSO-d6)δ(ppm):163.0,155.9,152.6,150.5,138.2,112.7,109.9,58.6,20.7;HRMS(ESI)for(M+H)+:calcd376.164 9,found376.165 2.

2.3.6化合物(6)

名称：(3Z,3′Z)-3,3′-(hydrazine-1,2-diylidene)bis(7-chloro-1H-pyrrolo[3,2-c]pyridin-2(3H)-one)，结构如图8所示.

图8　化合物(6)的化学结构

棕色结晶粉末，M.P.198.9 ℃.1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm):8.94(2H,s),8.77(2H,d,J=6.1Hz),7.18(2H,d,J=11.2Hz);13C-NMR(100MHz,DMSO-d6)δ(ppm):166.4,155.9,152.6,150.5,138.1,112.6,109.8;HRMS(ESI)for(M+Na)+:calcd359.992 9,found359.993 4.

2.3.7化合物(7)

名称：(3Z,3′Z)-3,3′-(hydrazine-1,2-diylidene)bis(7-bromo-1H-pyrrolo[3,2-c]pyridin-2(3H)-one),结构如图9所示.

图9　化合物(7)的化学结构

褐色结晶粉末，M.P.218.4 ℃.1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm):8.94(2H,s),8.76(2H,d,J=7.8Hz),7.17(2H,d,J=12.5Hz);13C-NMR(100MHz,DMSO-d6)δ(ppm):166.6,155.9,152.6,150.5,138.1,112.6,109.9;HRMS(ESI)for(M+H)+:calcd447.891 9,found447.892 5.

2.3.8化合物(8)

名称：(3Z,3′Z)-3,3′-(hydrazine-1,2-diylidene)bis(1-benzyl-1H-pyrrolo[3,2-c]pyridin-2(3H)-one)，结构如图10所示.

图10　化合物(8)的化学结构

棕色结晶粉末，M.P.208.5 ℃.1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm): 8.94(2H,s),8.75(2H,d,J=8.3Hz),7.5-7.2 (12H,m,J=6.0Hz), 4.96(4H,s);13C-NMR(100MHz,DMSO-d6)δ (ppm): 163.7,155.9,152.5,150.6,138.2,136.3,128.7,127.0,126.8,112.6,109.9,47.4;HRMS(ESI)for(M+Na)+:calcd472.164 9,found472.165 3.

2.3.9化合物(9)

名称：(3Z,3′Z)-3,3′-(hydrazine-1,2-diylidene)bis(1-(4-nitrobenzyl)-1H-pyrrolo[3,2-c]pyridin-2(3H)-one)，结构如图11所示.

图11　化合物(9)的化学结构

深褐色粉末，M.P.212.5 ℃.1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm):8.96(2H,s),8.76(2H,d,J=8.7Hz),8.16(4H,d,J=13.2Hz),7.97(4H,d),7.18(2H,d,J=2Hz),4.96 (4H,d);13C-NMR(100MHz,DMSO-d6)δ (ppm):163.6,155.9,152.6,150.5,146.0,142.4,138.2,127.9,123.8,112.6,109.8,47.5;HRMS(ESI)for(M+Na)+:calcd562.134 8,found9 562.135 2.

2.3.10化合物(10)

名称：(3Z,3′Z)-3,3′-(hydrazine-1,2-diylidene)bis(1-(4-methoxybenzyl)-1H-pyrrolo[3,2-c]pyridin-2(3H)-one)，结构如图12所示.

图12　化合物(10)的化学结构

红棕色结晶粉末，M.P.228.7 ℃.1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm):8.92(2H,s)，8.76(2H,d,J=8.6Hz),7.26(4H,d,J=11.5Hz),7.18(2H,d,J=10.5Hz), 6.89(4H,d,J=9.3Hz),4.96(2H,s),3.85(6H,s)；13C-NMR(100MHz,DMSOd6)δ(ppm):163.7,158.8,155.9,152.6,150.5,138.2,130.7,128.6,114.3,112.7,109.9, 55.9,47.4;HRMS(ESI)for(M+Na)+:calcd532.185 8,found532.186 1.

2.3.11化合物(11)

名称：(3Z,3′Z)-3,3′-(hydrazine-1,2-diylidene)bis(5-chloro-1H-pyrrolo[2,3-b]pyridin-2(3H)-one) ，结构如图13所示.

图13　化合物(11)的化学结构

黄棕色结晶粉末，M.P.195.0 ℃.1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm):9.65(2H,s),8.28-8.35(4H,m);13C-NMR(100MHz,DMSOd6)δ(ppm):167.2,160.4,153.0,146.5,139.4,138.1,123.7,112.5;HRMS(ESI)for(M+H)+:calcd359.993 0,found359.993 5.

2.3.12化合物(12)

名称：(3Z,3′Z)-3,3′-(hydrazine-1,2-diylidene)bis(5-bromo-1H-pyrrolo[2,3-b]pyridin-2(3H)-one)，结构如图14所示.

图14　化合物(12)的化学结构

红褐色结晶粉末，M.P.212.9 ℃.1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm):9.74(2H,s),8.53(2H,s),8.09(2H,s);13C-NMR(100MHz,DMSO-d6)δ(ppm):167.1,160.9,155.4,141.5,138.2,112.9,104.8;HRMS(ESI)for(M+H)+:calcd448.899 4,found448.899 7.

2.3.13化合物(13)

名称：(3Z,3′Z)-3,3′-(hydrazine-1,2-diylidene)bis(5-bromo-1H-pyrrolo[2,3-b]pyridin-2(3H)-one)，结构如图15所示.

图15　化合物(13)的化学结构

红色结晶粉末，M.P.174.2 ℃.1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm):9.48 (2H,s),8.05-8..12(4H,m),2.33(6H,s);13C-NMR(100MHz,DMSO-d6)δ(ppm):167.2,159.7,158.8,138.2,136.5,119.2,110.9,18.1;HRMS(ESI)for(M+H)+:calcd320.102 4,found320.102 7.

2.3.14化合物(14)

名称：(3Z,3′Z)-3,3′-(hydrazine-1,2-diylidene)bis(5-methyl-1H-pyrrolo[2,3-b]pyridin-2(3H)-one，结构如图16所示.

图16　化合物(14)的化学结构

红色结晶粉末，M.P.203.0 ℃.1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm):8.33(2H,d,J=7.5Hz),7.96(2H,d,J=8.5Hz),6.88(2H,t),3.42(6H,s);13C-NMR(100MHz,DMSO-d6)δ(ppm):163.6,161.8,153.2,138.7,138.2,113.5,111.7,31.4;HRMS(ESI)for(M+H)+:calcd320.102 4,found320.102 7.

2.3.15化合物(15)

名称：(3Z,3′Z)-3,3′-(hydrazine-1,2-diylidene)bis(1-methyl-1H-pyrrolo[2,3-b]pyridin-2(3H)-one)，结构如图17所示.

图17　 化合物(15)的化学结构

暗红色结晶粉末，M.P.215.6 ℃.1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm):8.33(2H,s,J=7.9Hz),7.96(2H,d,J=8.5Hz),6.87(2H,t),4.29(4H,q),1.39(6H,t);13C-NMR(100MHz,DMSO-d6)δ(ppm):163.4,161.7,153.3,138.7,138.2,113.5,111.8, 48.9,13.8;HRMS(ESI)for(M+Na)+:calcd348.133 6,found348.133 9.

2.3.16化合物(16)

名称：(3Z,3′Z)-3,3′-(hydrazine-1,2-diylidene)bis(1-ethyl-1H-pyrrolo[2,3-b]pyridin-2(3H)-one)，结构如图18所示.

图18　化合物(16)的化学结构

暗红色结晶粉末，M.P.224.0 ℃.1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm):8.33(2H,d,J=6.8Hz),7.96(2H,d,J=7.9Hz),6.89(2H,t),3.96(2H,m),1.29(12H,d);13C-NMR(100MHz,DMSO-d6)δ (ppm):1 63.0,161.8,153.2,138.6,138.4,113.5,111.8,58.6,20.8;HRMS(ESI)for(M+Na)+:calcd376.164 9,found376.165 2.

2.3.17化合物(17)

名称：(3Z,3′Z)-3,3′-(hydrazine-1,2-diylidene)bis(1-isopropyl-1H-pyrrolo[2,3-b]pyridin-2(3H)-one)，结构如图19所示.

图19　 化合物(17)的化学结构

棕色粉末，M.P.189.5 ℃.1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm):8.32(2H,s,J=10.2Hz),7.96(2H,d,J=10.5Hz),7.22-7.33(10H,m),6.87(2H,t),4.79(4H,s);13C-NMR(100MHz,DMSO-d6)δ(ppm):163.7,161.8,153.3,138.6,138.2,136.2,128.7,127.0,126.9,111.8,49.5;HRMS(ESI)for(M+Na)+:calcd472.164 6,found472.164 9.

2.3.18化合物(18)

名称：(3Z,3′Z)-3,3′-(hydrazine-1,2-diylidene)bis(1-benzyl-1H-pyrrolo[2,3-b]pyridin-2(3H)-one)，结构如图20所示.

图20　化合物(18)的化学结构

黄棕色结晶粉末，M.P.191.8 ℃.1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm):8.34(1H,s),8.29(1H,s),8.22(1H,s),6.76(1H,s),3.42(6H,s);13C-NMR(100MHz,DMSO-d6)δ(ppm):163.6,162.3,160.4,156.2,153.0,141.9,138.5,138.1,123.7,113.9,112.5,110.6,31.3;HRMS(ESI)for(M+H)+:calcd388.024 3,found388.024 7.

2.3.19化合物(19)

名称：(3Z,3′Z)-3,3′-(hydrazine-1,2-diylidene)bis(5-chloro-1-methyl-1H-pyrrolo[2,3-b]pyridin-2(3H)-one) ，结构如图21所示.

图21　化合物(19)的化学结构

红棕色结晶粉末，M.P.228.0 ℃.1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm):8.52(2H,s),8.10(2H,s),3.42(6H,s);13C-NMR(100MHz,DMSO-d6)δ(ppm):163.7,160.9,155.4,141.5,138.2,112.9,104.8,31.4;HRMS(ESI)for(M+Na)+:calcd475.923 4,found475.923 7.

2.3.20化合物(20)

名称：(3Z,3′Z)-3,3′-(hydrazine-1,2-diylidene)bis(5-bromo-1-methyl-1H-pyrrolo[2,3-b]pyridin-2(3H)-one) ，结构如图22所示.

图22　化合物(20)的化学结构

红褐色结晶粉末，M.P. 217.5 ℃.1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm):8.34(1H,s),8.29(1H,s),8.22(1H,s),6.76(1H,s),4.29(4H,q),1.39(6H,t);13C-NMR(100MHz,DMSO-d6)δ(ppm):163.4,162.3,160.4,153.0,141.9,138.5,138.2,123.7,113.9,112.5,110.5,48.9,13.8;HRMS(ESI)for(M+H)+:calcd416.055 4,found416.055 8.

3结论

本文以氮杂靛红及其衍生物、水合肼为原料，成功合成了一系列对称双氮杂靛红席夫碱，采用核磁共振氢谱、碳谱对所合成的席夫碱进行了结构表征，并使用HepG2、A-549与SGC-7901三种细胞株进行了初步的抗肿瘤活性测试，结果显示大部分化合物对三种肿瘤细胞株表现出不同程度的抑制作用，其中化合物1、6、7、11、12、18、19的活性较好，且对HepG2细胞株的抑制活性突出.尤其是化合物6、11、12的活性接近或优于对照物阿糖胞苷(Ara-C)，可供进一步研究.

此外，我们比较了不同取代基对化合物抗肿瘤活性的影响，结果发现R1取代基对化合物抗肿瘤活性的影响顺序为：氢>烷基>取代或未取代的苯基;R2取代基为卤素是会提高化合物的活性;R3取代基对化合物抗肿瘤活性的影响顺序为：卤素>氢>烷基;R4取代基对化合物抗肿瘤活性的影响顺序为：氢>烷基>苯基.由此可知，卤素取代基有利于对称双氮杂靛红席夫碱类化合物抗肿瘤活性的提高.

综上所述，经初步活性测试，本文合成的一系列对称双氮杂靛红席夫碱类化合物具有抗肿瘤活性.对称双氮杂靛红席夫碱类化合物的体内抗肿瘤活性、作用机制研究、以及药代动力学实验仍然需要进一步的研究与探索，以期为合成和筛选更好的双氮杂靛红席夫碱候选药物提供依据.

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【责任编辑：陈佳】

Synthesisandantitumoractivityevaluationofsymmetricalbis-schiffbaseofnitrogenheterocyclicisatin

WANGLan1，SONGHui-hui1，LIANGCheng-yuan1，XIAOYa-dong2

(1.SchoolofFoodandBiologicalEngineering,ShaanxiUniversityofScience&Technology,Xi′an710021,China；2.GuangzhouVocationalCollegeofScienceandTechnology,Guangzhou510550,China)

Abstract:Studies showed that the schiff base compounds had significant antitumor activities.In order to further enrich and extend the research of schiff base,a series of symmetric bis-schiff base of nitrogen heterocyclic isatin as well as derivatives have been synthesized with hydrazine hydrate,the structure of the compounds were characterized by NMR and HRMS.Additionally,the antitumor activity of the synthesized compounds have also been preliminarily investigated by MTT method.The results revealed that these compounds have moderate to intensive antitumor activities on different cell lines,specifically,compounds 1,6,7,11,12,18,19 have stronger activities on HepG2 cells.The effect of nitrogen heterocyclic isatin substituents on antitumor activity has also been studied,which indicated that halogen is crucial for the antitumor activity of synthesized compounds.In brief,our research can provide an experimental basis for the further synthesis and screening of candidate compounds.

Key words:nitrogen heterocyclic isatin；schiff base；antitumor activity；drug synthesis

*收稿日期:2016-05-21

基金项目：陕西省教育厅专项科研计划项目(15JK1076)；陕西省人力资源与社会保障厅博士后基金项目(2015)

作者简介:王兰(1963-)，女，辽宁沈阳人，教授，研究方向：药物新机型与新技术

文章编号：1000-5811(2016)04-0136-09

中图分类号：R914.5

文献标志码：A