一例獭兔兔瘟的诊断与治疗

吴孝杰，吴　红

(甘肃畜牧工程职业技术学院，甘肃 武威733006)

一例獭兔兔瘟的诊断与治疗

吴孝杰，吴红*

(甘肃畜牧工程职业技术学院，甘肃 武威733006)

摘要：兔瘟是由兔出血症病毒引起一种急性、热性、高度接触性、高度致死性传染病，发病迅速，传播猛烈，发病率及病死率很高，对养兔业危害甚大，造成巨大的经济损失。本文结合养殖场的实际案例，从该病的临床症状、剖检特征、诊断及防治措施等进行阐述，希望对该病预防和治疗的方法有所帮助。

关键词：兔瘟；诊断；防治

兔瘟(rabbit hemorrhagic disease,RHD)，是一种急性、热性、高度接触性、高度致死性传染病，是由兔出血症病毒引起的一种以呼吸系统出血、肝坏死、实质器官水肿、瘀血和出血为特征的传染疾病。该病主要经消化道、呼吸道和皮肤伤口传播，自然潜伏期2～3 d，根据症状分为最急性、急性和慢性三种型。不同品种和性别的兔均可感染发病，但以长毛兔最敏感，3月龄以上的青年兔与成年兔发病率和死亡率最高(90%～100%)，2月龄以内的仔兔感染一般发病较少。病兔、隐性感染兔和康复兔为主要传染源。本病因潜伏期短，发病急、病程短、传播快、发病率和病死率极高，常呈暴发性流行，给养兔业造成极大的经济损失，已成为危害养兔业最严重的一种疾病。2015年11月初，武威市凉州区某獭兔场发生兔瘟，现将这起兔瘟的诊断和治疗情况报道如下，以供参考借鉴。

1基本情况和临床症状

2015年11月12日武威市凉州区小泉村一獭兔场发病，繁殖兔舍共有106只母兔和340只哺乳仔兔，5 d内不明原因死亡42只母兔，仔兔死亡68只。养殖者用氨基糖苷类与喹诺酮类药物饮水、青霉素和链霉素注射治疗，效果不理想。据发病症状分析及死亡兔的剖检变化可判断是兔瘟。随即交待养殖者按照笔者开具的治疗办法进行治疗，7 d后，对养殖者进行回访得知病情基本得到了控制，继发感染停止，其中母兔死亡 11只，仔兔死亡2只，其他发病轻的病情逐渐好转，可以少量进食，精神逐渐恢复。

经问诊、现场查看，病兔主要表现为食欲不振，饮水增加，精神萎顿，皮毛无光泽，迅速消瘦；测量发现病兔体温高达41 ℃。临死前病兔表现短期兴奋、狂奔、惊跑、咬笼架，继而前肢俯伏，后肢支起，全身颤抖，倒地抽搐，四肢不断划动，角弓反张并发出悲惨的尖叫声，死前肛门松弛，肛门四周被毛和粪球上附有少量淡黄色黏液。

2剖检特征

对具有代表性的可疑病兔和病死兔15只进行病理剖检，病死兔外观呈角弓反张状，鼻孔流出鲜红色分泌物，脏器病变主要表现为广泛性实质器官和官腔器官的淤血、出血、水肿、坏死。鼻腔、喉头和气管黏膜有小点状或弥漫性出血，气管内充满大量浅红色带血泡沫状液体。肺脏有不同程度充血、出血，出现数量不等的出血斑点。脾脏充血肿胀，由正常宽3 mm、长4 cm变为宽1 cm、长7 cm，颜色变为青紫色。肝脏淤血肿大，有出血斑点，呈浅黄色，表面有灰白色坏死灶、质脆。肾脏充血肿大，呈紫黑色。膀胱积尿，内有黄褐色浓稠尿液。十二指肠和空肠黏膜有点状出血，肠系淋巴结肿大，有出血点。

3诊断

3.1初步诊断

根据传染性极强，呼吸系统出血，实质器官水肿、淤血和出血性变化等流行特点，结合该獭兔场发病情况、临床症状和剖检变化初步诊断为兔瘟，并分别采集病死兔脾、肝、肺、肾等典型病变脏器进行实验室诊断。

3.2细菌试验

因兔瘟与兔巴氏杆菌病临床症状和病理变化有很多相似之处，故无菌取肺、肝、脾等病料分别接种于普通琼脂平板、鲜血琼脂平板上，于37 ℃温箱中培养48 h，未见细菌生长；用病料涂片，进行碱性美蓝染色、镜检，也未见两极浓染的短小杆菌，故可排除巴氏杆菌感染。

3.3血凝试验

利用兔瘟病毒能够凝集人“O”型红细胞的特性，通过血凝试验可以确定病死兔体内是否含有该病毒。无菌采集的病兔肝脏、肺脏、脾脏剪碎，用PBS做1:10倍稀释，研磨制成乳剂，将乳剂倍比稀释，使其稀释度为10、20、40、80、160、320、640、1280。采用玻片凝集法，取倍比稀释的乳剂各50 uL滴于玻璃板上，再取50 uL 2% 人“O”型红血球悬液与乳剂混合，轻轻摇动玻板，置室温5 min，观察结果。设PBS稀释液作阴性对照。结果显示：PBS中红细胞均匀、浑浊，而被检乳剂中红细胞呈块状凝集，HA效价为1:80-1:640。因此说明样品中含有兔瘟病毒。

3.4RT-PCR

参照兔出血病病毒(RHDV)基因序列(GenBank Aeession AF45761)，设计一对引物，扩增的片段大小为581 bp。按Trizol法提取RNA后，按照胡迎东等方法进行RT-PCR反应。PCR反应条件为：94 ℃ 1 min，61 ℃ 1 min，72 ℃ 1 min，94 ℃ 3 min，35个循环后，于72 ℃延伸5 min。取5 uL PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳。结果显示样品在581处有光亮条带，与理论设计值大小相符(见图1)。因此可确定此分离病毒为兔出血病病毒。

图1　RT-PCR扩增凝胶电泳图

3.5动物感染试验

将12只3月龄健康獭兔分成3组，每组4只，取病料悬液采用肌肉注射第1组家兔，每只0.5 mL；将该病料悬液与兔瘟阳性血清混合均匀，37 ℃作用2 h左右，然后再皮下注射第2组家兔，每只0.5 mL；第3组为对照组。结果发现，第1组家兔在接种后2-36 h死亡，其临床症状和病理变化与病死兔一致；而第2组和第3组獭兔连续观察7 d，仍健康无发病现象，故可确诊造成家兔感染死亡的原因为兔瘟病毒感染。

4防控措施

4.1隔离消毒

搞好卫生，严格消毒，病死兔作无害化处理。兔舍、兔笼、用具及周围环境加强消毒，每天5% 来苏尔消毒2次。对饲养管理用具、污染的环境、粪便等用2% 烧碱溶液消毒，对被污染的饲料进行高温等无害化处理，兔毛和兔皮用福尔马林熏蒸消毒，及时隔离病兔及可疑兔，封锁疫点，将病死兔焚烧深埋，以切断污染源。

4.2紧急接种

对所有尚未发病兔采用兔瘟组织灭活疫苗进行紧急免疫接种。其过程如下：将剖检症状明显的病兔的肝、肾、脾、肺脏无菌取出，分别剔除结缔组织后，用生理盐水清洗，于每100 g含毒组织中加入事先经预热的含1.2% 甲醛的无菌生理盐水溶液450 mL，置于高速的组织捣碎机(10 000～20 000 r/min)中捣碎4～5 min,取出后以3层灭菌纱布过滤于玻璃容器中，于37 ℃恒温培养箱中灭活48 h，每天上午、下午各均匀摆动两次，取出后再加等量的不含甲醛的无菌生理盐水，摇匀后分装于灭菌的玻璃瓶中，再于每500 mL中加入青霉素、链霉素各100万IU，摇匀。45日龄以上兔每只皮下注射1 mL，45日龄以下兔每只皮下注射0.5 mL，21 d后加强免疫一次。

4.3及时治疗

对隔离的病兔立即注射兔瘟高免血清，每只3 mL，10 d后再注射兔瘟疫苗。对所有存栏兔全部用复方大青叶注射液2 mL肌肉注射，每天一次，连用3 d。对体质虚弱的獭兔可用5% 葡萄糖盐水20～30 mL、维生素C 2～5 mL、维生素B1 2～5 mL，一次性耳静脉缓慢注射；伴有腹泻者可加入庆大霉素2～5万IU，每天2次，两用3-5 d。经采取以上措施，疫情从防治后第5 d即开始趋向好转，除少数患兔死亡外，疫情基本得到控制，到12月10日以后没有再出现死亡。

5讨论与小结

5.1 重在预防

兔瘟发病急、传播快，流行面广，病情严重，死亡率高。因此，重在预防。目前，最有效的预防措施是定期预防接种病毒性出血症灭活苗。仔兔35～40日龄首免，55～60日龄加强免疫，以后每隔4个月免疫一次，剂量1 mL/只。注射后3 d即能产生高滴度的内源性干扰素阻止病毒复制；注射后7 d～10 d产生免疫力。

坚持自繁自养，从不从疫区购买种兔，并认真执行兽医卫生防疫措施；定期消毒，禁止外人进入兔场；引种时严格检疫，并隔离饲养观察至少两周，无病时方可入群饲养。加强饲养管理，提高兔群抗病力，搞好环境卫生，做好兔舍、兔笼、用具及周围环境的定期消毒工作。

5.2控制措施

本病尚无特效药物治疗，预防接种是防止兔瘟的最佳途径。一旦发生本病，封锁疫点、暂时停止种兔调剂，关闭兔及兔产品交易市场。对病兔立即进行扑杀深埋或焚烧，对兔舍和笼具用3% 氢氧化钠严格消毒，按预防量的3倍量紧急注射兔瘟疫苗，以上对控制疫情的扩大具有积极作用。

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A Diagnosis and Cure of Rabbit Hemorrhagic Disease

WU Xiao-jie, WU Hong

(GansuPolytechnicCollegeofAnimalHusbandryandEngineering,WuweiGansu733006)

Abstract:Rabbit hemorrhagic disease is caused by the rabbit hemorrhagic disease viral. It’s an acute, febrile, high direct contact and lethal diseases. Moreover, the characteristic of Rabbit hemorrhagic disease are develop rapidly, spread fiercely, high incidence and mortality, and it can create huge harm and economic loss. This paper integrated a practical case of a farm, and summarized from the clinical symptoms, pathological traits, laboratory diagnosis, prevention, control and other aspects. The aim was to help counterparts to prevent and control the rabbit plague.

Key words:rabbit hemorrhagic disease;diagnose;prevention and cure

[收稿日期]2015-10-18

[作者简介]吴孝杰(1983-)，女，吉林永吉人，讲师，硕士，从事畜牧兽医专业教学。E-mail：wuxiaojie334@163.com *[通讯作者]吴红(1970-)，女，甘肃酒泉人，本科，高级实验师，主要从事动物疫病诊疗和实验室化验工作。E-mail：wuxiaojie334@163.com

[中图分类号]S 858.291

[文献标识码]C

[文章编号]1004-6704(2016)02-0137-03