内皮微粒CD31+/CD42b-水平、颈动脉内膜中层厚度与冠状动脉病变程度的相关性

权晓慧　王聪霞　李毓杰　石昭昭　秦少博

(西安市第一医院心血管内科，陕西　西安　710002)

内皮微粒CD31+/CD42b-水平、颈动脉内膜中层厚度与冠状动脉病变程度的相关性

权晓慧王聪霞1李毓杰石昭昭秦少博

(西安市第一医院心血管内科，陕西西安710002)

〔摘要〕目的探讨冠心病患者血浆内皮微粒CD31+/CD42b-水平、颈动脉内膜中层厚度(CIMI)与冠状动脉病变程度的关系。方法选取该院2015年1～6月收治的冠心病患者137例，根据冠状动脉造影结果及临床表现，将患者分为冠状动脉造影正常(对照)组42例，单支病变组35例，双支病变组29例，三支及多支病变组31例，患者行颈动脉超声检查，检测血浆内皮微粒CD31+/CD42b-水平，分析冠状动脉病变程度与内皮微粒、CIMI的相关性。结果与对照组比较，冠心病组CD31+/CD42b-内皮微粒水平及CIMT明显升高〔(1 307.29±382.68)mmol/L vs (835.98±260.85)mmol/L；(0.98±0.13)〕mm vs (0.83±0.11)mm，P<0.05〕。与对照组比较，随着冠状动脉病变程度的加重，CD31+/CD42b-内皮微粒水平及CIMT明显增加( P<0.05)。多元Logistic回归分析显示CD31+/CD42b-内皮微粒水平及CIMT增厚与冠心病严重程度呈独立正相关(OR=2.330，95%CI：1.635～6.356；OR=3.957，95%CI：1.125～4.784，P<0.05)。结论血浆内皮微粒CD31+/CD42b-水平及CIMI与冠状动脉病变程度具有相关性，通过检测内皮微粒及CIMI可预测冠状动脉的病变程度。

〔关键词〕冠心病；内皮微粒；颈动脉内膜中层厚度

内皮微粒(EMPs)是一种在内皮细胞激活或凋亡状态下释放的膜样结构微泡，这种微泡带有大量的内皮表面蛋白和生物信息，是检测内皮功能潜在的生物学标记物〔1,2〕。颈动脉内膜中层厚度(CIMT)是反映颈部血管动脉硬化的早期指标，是诊断和预测冠心病的良好指标。本研究旨在通过对冠心病患者行血浆EMPs检测及CIMT检查，探讨EMPs水平及CIMT与冠脉病变程度的相关性。

1资料与方法

1.1对象选取我院2015年1～6月诊治的冠心病患者137例，自愿加入本研究并签署知情同意书。将调查人群按冠状动脉造影结果进行分组，正常对照组42例、单支病变组35例、双支病变组29例、三支及多支病变组31例。137例患者中男73例，女 64 例，年龄62～83岁，平均(72.7±6.8)岁。排除标准：严重的肝肾功能不全、感染、恶性肿瘤、瓣膜性心脏病、原发性肺动脉高压、肺栓塞、自身免疫性疾病及严重电解质紊乱等。患者相关生化指标包括血脂、血糖的检测由本院生化检验中心完成。

1.2血浆EMPs的检测所有受试对象均在清晨空腹静息状态下采集肘静脉血5 ml，枸橼酸钠抗凝管收集血液，用于EMPs表达水平检测。通过两步离心法取上清，获得贫血小板血浆，于-80℃冰箱保存直至集中检测。检测时，室温下溶解贫血小板血浆，取50 μl加入特异性荧光标记抗体(anti-CD42-PE，anti-CD31-FITC，anti-CD144-APC ，美国BD 公司生产)0.5 μg。在室温下孵育 20 min 后依次加入1 ml PBS 液待测，上机前用直径为1.0 μm的标准微球定位设门，混合液即可上流式细胞仪(BD FACS calibur)检测。

1.3CIMT的测量采用高分辨率的彩色血管多普勒超声仪(型号：Acuson sequoia 512，德国西门子公司)，频率8～12 MHz宽频探头。患者取平卧位，双肩垫枕，头向后略偏向检查侧对侧，充分暴露颈部，测定部位在颈动脉窦近端1 cm总动脉段处、颈总动脉分叉部及其远端1 cm颈内动脉段后壁处，左右各三个点，各测量3次，取平均值为CIMT。所有超声检查由本院超声诊断科同一资深医师完成。

1.4冠状动脉造影方法及冠状动脉病变程度评价冠状动脉造影由经验丰富的心脏介入医生按照常规方法进行。根据冠脉造影结果分为冠心病组95例(左主干、前降支、回旋支、右冠状动脉中至少1支冠状动脉狭窄程度≥50%)和对照组42例(冠状动脉狭窄程度均<50%)。Gensini积分采用美国心脏病协会的标准，最后进行冠状动脉狭窄程度的病变定量评定：无狭窄计0分，狭窄≤25%计1分，26%～50%计2分，51%～75%计4分，76%～90%计8分，91%～99%计16分，100%计32分；不同节段冠状动脉乘以相应系数：左主干病变，得分×5；左前降支近段，得分×2.5，中段得分×1.5，远段得分×1；第一对角支得分×1；第二对角支得分×0.5；左回旋支近段得分×2.5，中段得分×1.5，远段和后降支均得分×1，后侧支得分×0.5；右冠近、中、远段和后降支均得分×1。最终积分为各分支积分之和。

2结果

2.1冠心病组与对照组一般临床资料比较冠心病组总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、空腹血糖(FBG)、尿素氮(BUN)、CIMT及CD31+/CD42b-EMPs数量明显高于对照组(P<0.05)；两组年龄、性别、高血压史、糖尿病史、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、肌酐(Scr)、胱抑素C(Cys C)、体重指数(BMI)比较，差异无统计学意义(P>0.05)，见表1。

表1　冠心病组与对照组一般临床资料比较±s)

2.2各组患者Gensini积分与CIMT、CD31+/CD42b-EMPs数量的比较与对照组比较，单支病变组、双支病变组和三支及多支病变组的CD31+/CD42b-EMPs及CIMT明显增加，而且随着冠状动脉病变程度的加重，CD31+/CD42b-EMPs及CIMT亦随之增加(P<0.05)，见表2。

2.3多因素Logistic回归分析以冠状动脉狭窄程度的积分为因变量，年龄、高血压、糖尿病、TC、TG、HDL-C、LDL-C、FBG、BUN、Scr、Cys C、BMI、CIMT和CD31+/CD42b-为自变量，Logistic回归分析显示，LDL-C、Scr、CIMT和CD31+/CD42b-与冠心病严重程度呈独立正相关(P<0.05)，见表3。

表2　各组患者Gensini积分与CIMT、

与对照组相比：1)P<0.05；与单支病变组相比：2)P<0.05

表3　多因素Logistic回归分析

3讨论

EMPs 作为效应因子,在正常血管内皮细胞的炎性反应和血栓形成等过程中发挥一定作用。因此，EMPs 被认为是连接内皮功能障碍与动脉血栓形成之间的纽带〔3〕。国内外有研究〔4,5〕证实EMPs与冠心病相关，因此检测外周血中EMPs水平对了解内皮细胞的功能状态极为重要。

由于CD31+和CD42b-均表达于血小板膜表面，而内皮细胞膜表面只表达CD31+而不表达CD42b-，这样用流式细胞仪检测EMPs时，就可以定义 CD31+且CD42b-微粒为EMPs，在很多疾病的 EMPs 研究中都采用这种方法〔6，7〕。EMPs作为反映内皮损伤、功能紊乱的指标被国内外学者认可，内皮细胞的功能可因缺血、脂类物质沉着、机械性的血流动力学损伤而受损，从而导致内皮功能不全，继而损伤的内皮可以释放出EMPs，由此可以认为它们参与血管内膜增生和斑块形成〔8，9〕。一项前瞻性研究对488例冠心病高风险患者随访36个月，多因素COX比例风险模型表明EMPs和年龄、超敏C反应蛋白、脑钠肽一样，与心血管事件独立相关〔10〕，提示EMPs有望作为Framingham危险评分的补充，更好地预测冠心病高危人群的心血管事件风险。有研究发现〔11〕，冠心病患者的EMPs水平显著高于健康对照人群，而急性心肌梗死组患者的EMPs水平又高于不稳定心绞痛组患者的水平。本文研究结果与前人研究结果一致，说明EMPs的升高不仅促进动脉斑块的形成，而且增加了无症状患者的发病风险，通过检测EMPs可以筛选出具有心血管疾病的高危患者，做到早期预防。

颈动脉超声作为一种简单易行、重复性好的检查手段，可用于动态观察动脉粥样硬化的进展，CIMT可作为冠心病预测的重要指标〔12〕。颈动脉与冠状动脉不仅在动脉粥样硬化的发病机制上一致，而且在解剖结构上具有相似性，均为平滑肌细胞。本研究结果显示，随着冠状动脉病变程度的加重，CIMT明显增加。Alaee等〔13〕以CIMT>1.2 mm对冠心病进行预测，认为其阳性预测值为81%，阴性预测值为70.51%。Sadasivam等〔14〕在对50例18～25岁有冠心病家族史的健康人群检查研究发现，其CIMT与对照组相比明显增厚，TG水平亦升高，提示有冠心病家族史的年轻人更早出现颈动脉内膜的异常，CIMT可用于动脉粥样硬化的早期筛查。Jeevarethinam等〔16〕同样证实，CIMT是冠心病发生和严重程度的预测因素，并进一步发现颈动脉斑块似乎更优于CIMT 值，但尚需进一步研究证实。

综上所述，CD31+/CD42b-EMPs及CIMT与冠脉病变程度相关，通过CD31+/CD42b-EMPs的检测及CIMT检查，可评估患者血管的病变程度，为冠心病的早期预防提供临床思路。

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〔2015-12-17修回〕

(编辑袁左鸣/徐杰)

基金项目：国家自然科学基金资助项目(No.81273878)；西安市卫生局科技计划项目(J2014005)

〔中图分类号〕R54

〔文献标识码〕A

〔文章编号〕1005-9202(2016)11-2650-03；

doi：10.3969/j.issn.1005-9202.2016.11.037

1西安交通大学医学院第二附属医院心血管内科

第一作者：权晓慧(1979-)，女，硕士，副主任医师，主要从事冠心病发病机制研究。