肺腺癌神经内分泌分化及其临床病理学的相关性

黎滨茹　姜又红



肺腺癌神经内分泌分化及其临床病理学的相关性

黎滨茹姜又红

【摘要】目的 探讨肺腺癌的神经内分泌分化（NED）的情况及与肺腺癌转移及分化程度的关系。方法 收集辽宁省肿瘤医院2012年3月～2015年2月手术切除，并经病理切片证实为肺腺癌的病例96例，采用非生物素二步法免疫组化，检测不同生物学行为肺腺癌组织中神经内分泌分化特异性标记物，神经细胞粘附分子（CD 56）、嗜铬蛋白A（CgA）和突触素（Syn）的表达情况。结果 96例肺腺癌中伴神经内分泌分化者21例（占21.88%），CD 56、Syn和CgA阳性表达率分别为23.96%、20.83%和19.79%。CD 56、Syn阳性表达及神经内分泌分化与肿瘤分化程度和肿瘤淋巴结转移相关（P＜0.05），CgA阳性表达及神经内分泌分化仅与肿瘤分化程度相关（P＜0.05）。结论 肺腺癌伴有神经内分泌分化可以作为肿瘤转移及分化程度的判断指标之一。

【关键词】肺腺癌；神经内分泌分化；神经细胞粘附因子；嗜铬蛋白A；突触素

作者单位：110001沈阳，中国医科大学附属第一医院肿瘤生物治疗研究室

原发性支气管肺癌的发病率和病死率呈逐年上升趋势，其中肺腺癌是其中常见的病理类型［1］。肿瘤组织内的神经内分泌分化（Neuroendocrine Differentiation，NED）指肿瘤组织中部分肿瘤细胞出现NED现象，研究发现［2］，NED现象广泛存在于各种非内分泌组织来源的恶性肿瘤中，其中以腺癌多见。NED的肿瘤细胞可以通过多种分泌途径，分泌各种活性物质，刺激周围肿瘤细胞的生长，增强癌细胞的增殖和抗凋亡的能力，造成比一般恶性肿瘤更不良的预后。但恶性肿瘤细胞朝向神经内分泌方向的分化，是肿瘤细胞在侵袭演进过程中的一种转分化，还是肿瘤组织本身所具有的一种非特异性的变化，目前尚未确定。为此我们选择CD 56（神经细胞粘附分子，Neural Cell Adhesion Molecule，NCAM）、嗜铬蛋白A（chromogranin A，CgA）和突触素（synaptophysin，Syn）三种NED特异性标记物，通过观察它们在不同生物学行为肺腺癌组织中的表达情况，探讨肺腺癌的NED与肺腺癌肿瘤淋巴转移、癌细胞分化程度的相关性，为临床治疗与预后评估提供参考。

1　材料与方法

1.1临床资料

收集辽宁省肿瘤医院2012年3月～2015年2月手术切除，并经病理切片证实为肺腺癌的病例及石蜡标本96例，男性60例，女性36例，年龄38～70岁，中位年龄52岁。肿瘤大小、浸润部位及临床分期，按国际抗癌联盟第7版肺癌TNM分期，其中T1：51例，T2：29例，T3：8例，T4：8例；Ⅰ期46例，Ⅱ期31例，Ⅲ期19例。患者行肺叶切除术者67例，全肺切除术者9例，联合肺叶切除术者8例，妥协性亚肺切除术12例。排除其他肺部组组疾病、免疫性疾病史、近期使用抗生素、吸烟、长期使用糖皮质激素等免疫抑制剂史的患者。

1.2试剂与检测方法

在辽宁省肿瘤医院病理科找出96例肿瘤患者的蜡块标本，将标本制成4μm厚连续石蜡切片，每张切片均标记上患者的编号。神经细胞粘附分子（CD 56）、嗜铬素A（CgA）和突触素（Syn）单克隆抗体购于SANTA CRUZ公司，非生物素二步法免疫组化检测试剂盒购于福建迈新生物技术有限公司，并按照说明书操作进行免疫组化检测。

1.3结果判断

免疫组化阳性细胞判断结果参照标准［3］：阳性细胞的表达主要为背景清晰，胞浆内可见明确的棕黄色或棕褐色颗粒，每片切片随机计数10个高倍（×400）视野，阳性染色的目标细胞≤5%为阴性（-），＞5%视为阳性（+），其中阳性细胞染色计数5%～10%视为（+），10%～20%为（++），20%～50%为（+++），有下列情况之一者可确定为神经内分泌分化：CD 56、CgA或者syn阳性表达计数为+++，或CD 56、Cga和Syn三者中至少有两种标志物阳性表达均为+～++。

1.4统计学方法

所得数据使用SPSS15.0统计学软件进行处理分析，计数资料用n，%表示，采用χ2检验或秩和检验，检验水准α=0.05。

2　结果

2.1NED标记物在肺腺癌中的表达

三种神经内分泌标记物均在肺腺癌的细胞膜或细胞质着色，见图1，呈粗细不等的棕色颗粒，其中CD 56呈弥漫性细胞膜和（或）细胞质着色，见图2，Syn细胞膜、细胞质均有着色，见图3，CgA在细胞质呈灶性分布或为弥漫性着色，见图4。96例肺腺癌患者中伴神经内分泌分化者21例（21.88%），不伴有神经内分泌分化者75例，CD 56阳性表达例数23例（23.96%），Syn阳性表达例数20例（20.83%），CgA阳性表达例数为19例（19.79%）。

2.2淋巴结转移情况与NED分化及其标志物的表达

图1　肺腺癌肿瘤细胞（10×40）

图2　肺腺癌肿瘤细胞CD　56　表达（10×40）

图3　肺腺癌肿瘤细胞CgA表达（10×40）

图4　肺腺癌肿瘤细胞Syn表达（10×40）

淋巴结转移情况与CD 56、Syn与CgA阳性表达及神经内分泌分化情况分析，见表1。淋巴结转移组中CD 56与Syn阳性表达与神经内分泌分化情况均高于无转移组，差异具有统计学意义（P＜0.05），但CgA阳性表达两组之间对比，差异不具有统计学意义（P ＞0.05）。

表1　淋巴结转移情况与CD 56、Syn与CgA阳性表达及神经内分泌分化（例）

2.3肺腺癌分化程度与NED分化及其标志物的表达比较

肺腺癌分化程度与CD 56、Syn及CgA阳性表达及神经内分泌分化情况分析，见表2。采用非参数检验可知道，肺腺癌分化程度低、中、高三组中，CD 56、Syn、CgA阳性表达及神经内分泌分化情况差异具有统计学意义（P＜0.05），其中低分化组上述指标高于其余两组。

表2　肺腺癌分化程度与CD 56、Syn及CgA阳性表达及神经内分泌分化（例）

3　讨论

恶性肿瘤有许多特征性表现，但细胞的异常分化是其基本特征表现之一。肿瘤组织中常有部分肿瘤细胞出现NED现象，它不同于一般内分泌腺肿瘤和神经内分泌肿瘤，其是肿瘤组织的一种伴随成分［4］。多种非神经内分泌器官中存在NED现象，恶性肿瘤细胞向NED不但显示了肿瘤主体细胞的结构特点，又显示了胞浆内分泌颗粒。

神经内分泌细胞突起在腺癌病灶中缺乏特征性，在低分化腺癌中神经内分泌化细胞呈圆形、卵圆形或不规则形，极性消失，这些神经内分泌化的细胞与其周围的肿瘤细胞一样具有异型性；神经内分泌化细胞在高分化腺瘤中常呈锥形或长条形，顶端朝向腺腔侧。在肿瘤组织中的神经内分泌细胞，与其所在器官原发癌的类型、分期、分级和预后关系均存在相关性。一部分非小细胞肺癌也具有NED特征，其发生率在10%～30%，在腺癌中最为常见。

目前认为CD 56、CgA、Syn是一组特异性和敏感性较好的共同NED的标记物。CD 56是神经细胞粘附分子中的一种，是唾液酸糖蛋白，属免疫球蛋白超家族成员，在神经系统的生长发育中发挥着重要的作用，与多种肿瘤的进展和转移相关。CgA是一种酸性分泌颗粒基质糖蛋白，是某些生物活性肽的前提，可以参与分泌颗粒基质的构成，组织和加工分泌颗粒，具有调节机体神经-内分泌-免疫网络的功能，是目前国际公认的特异性较强的神经内分泌标记物。Syn是与突触结构和功能密切相关的膜蛋白，分子量为38 kD。在神经内分泌细胞中Syn可能参与突触囊泡的导入、转运以及神经递质的释放全过程，在突触囊泡再循环和突触的发生中具有重要作用，可将突触素作为一种非特异的神经内分泌标记物。

本次研究结果显示，NED现象与肿瘤淋巴转移及肿瘤分化程度相关，并且癌细胞分化程度越低，CD 56、Syn与CgA阳性表达及NED的阳性率越高。肿瘤细胞的生长、增殖与凋亡，可能受到周围NED的肿瘤细胞分泌各种活性物质的刺激，导致不良的预后。腺癌伴有NED的发生率高于其他类型的肺癌，其中低分化癌的NED现象高于高分化，CD 56、CgA和Syn一般在腺癌中表达较多，并且CD 56、CgA和Syn在低分化癌中表达明显，说明肿瘤分化程度越低，越容易形成NED现象，产生异质性肺癌细胞。

综上所述，肺腺癌伴有NED可以作为肿瘤转移及分化程度的判断指标之一，但肺腺癌病理学中NED的异质性，其生物学行为及其临床上有无特殊性，NED与患者术后生存预后的相关性还需进一步研究。

参考文献

［1］梁红.肺癌侵犯胸膜胸壁TNM分期和影像学研究进展［J］.实用放射学杂志，2014，30（9）：1566-1569.

［2］黄宇筠，袁润强，陈应智，等.伴神经内分泌分化肺腺癌血清癌胚抗原水平的分析［J］.分子诊断与治疗杂志，2015，7（4）：261-265.

［3］郭燕，孙雷娜，栾焕玲，等.肺腺癌神经内分泌分化与其生物学行为及预后的相关性研究［J］.中国肿瘤临床，2010，37（6）：323-325.

［4］靳博华，刘建强，胡建立，等.老年恶性肿瘤70例临床分析［J］.癌症进展，2014（1）：98-102.

Clinical Significance of Neuroendocrine Differentiation in Lung Adenocarcinoma

LI Binru JIANG Youhong，Department of Tumor Biological therapy，The First Affiliated Hospital of China Medical University，Shenyang 110001，China

［Abstract］Objective To explore the neuroendocrine differentiation of neuroendocrine in patients with lung adenocarcinoma and tumor lymphatic metastasis and its correlation to cell differentiation degree and metastases.Methods Collected 96 patients who underwent surgical resection and confirmed by pathological biopsy of lung adenocarcinoma in our hospital from March 2012 to February 2015，using the immunohistochemical detection to detect the expression of biotin ldpe-g-nvp，such as CgA，CD56 and Syn in lung adenocarcinoma tissue.Results Among the 96 patients，21 cases（21.88%） appearred neuroendocrine differentiation，positive expression of CD 56，Syn and CgA were 23.96%，20.83% and 19.79% respectively.The positive expression of CD56 and Syn were related to neuroendocrine differentiation，tumor differentiation degree and tumor lymphatic metastasis（P＜0.05），while positive expression of CgA was only related to neuroendocrine differentiation（P＜0.05）.Conclusion Lung adenocarcinoma with neuroendocrine differentiation can be used as a tumor metastasis and differentiation degree of judgment indicator.

［Key words］Lung adenocarcinoma，Neuroendocrine differentiation，CD56，Chromogranin A，Synaptophysin

【中图分类号】R36

【文献标识码】A

【文章编号】1674-9308（2016）08-0041-03

doi：10.3969/j.issn.1674-9308.2016.08.028

通讯作者：姜又红，E-mail：hong_jyh@163.com