气相色谱法测定有机氯农药随饮片煎煮前后的转移率

吕　倩，王国海

(1.渭南市食品药品检验所中药室，陕西 渭南　714000；2.陕西省食品药品检验所中药室，陕西 西安　710061)

气相色谱法测定有机氯农药随饮片煎煮前后的转移率

吕倩1，王国海2

(1.渭南市食品药品检验所中药室，陕西 渭南714000；2.陕西省食品药品检验所中药室，陕西 西安710061)

摘要：目的通过测定14种有机氯农药随当归、白芷、甘草饮片煎煮前后的转移率，为制剂的安全性评估提供参考依据。方法采用磺化法制备样品，用气相色谱法―ECD电子捕获检测器测定，DB-1701(30 m×0.32 mm×0.25 μm)毛细管色谱柱，程序升温，进样口温度230℃，检测器温度250℃。结果3种饮片中14种有机氯农药转移率分别在0～32.9%与0～49.1%之间。结论有机氯农药在伴随饮片煎煮前后有较大的损失，不同农药其转移率存在一定的差异，监测农药残留有一定的必要性，为药品的安全性提供保障。

关键词：饮片;农药残留量;气相色谱-质谱法

随着中医药事业的快速发展，中药材的需求量剧增，在天然药用资源供不应求的今天，人工栽培已经成为了中医药产业发展中举足轻重的一环。中药种植过程中易受到病虫危害越，农药虽然可以很好地进行控制，但同时也带来了污染[1]，一定程度上制约了中药材、中药饮片及其制剂的发展。我国于20世纪80年代末宣布禁止使用滴滴涕、六六六等有机氯农药，但由于此类农药为高效广谱杀虫剂，具有稳定性高、半衰期长、不易降解和代谢、可引起积蓄性中毒等特点[2-3]，因此近年来在中药材六六六、滴滴涕等农药残留量测定方面的报道很多[4-7]，但农药残留量在制剂过程中的转移率尚不明确。因此，研究农药在饮片、制剂中的残留转移情况有着重要的意义。

1仪器与试药

1.1仪器Agilent 6890气相色谱仪，电子捕获检测器(ECD)；超声波提取仪(昆山市超声仪器有限公司)。

1.2试药农药对照品：六六六包括(α-BHC，GBW(E)06008112001，49.8 mg·L-1；β-BHC，GBW(E)06008212002，50.0 mg·L-1；γ-BHC，GBW(E)06008312001，50.2 mg·L-1；δ-BHC，GBW(E)06008412001，50.1 mg·L-1)4种异构体，滴滴涕包括(PP’-DDT，GBW(E)06010212001，50.2 mg·L-1；OP’-DDT，GBW(E)06010312001，50.0 mg·L-1；PP’-DDE，GBW(E)06010412002，50.0 mg·L-1；PP’-DDD，GBW(E)06010512001，50.0 mg·L-1)4种异构体，六氯苯(GSB05-1846-2008，100.0 mg·L-1)，七氯(GSB05-2316-2008，100.0 mg·L-1)，艾氏剂(GSB05-2320-2008，100.0 mg·L-1)，反氯丹(SB05-065-2008，20.0 mg·L-1)，顺氯丹(SB05-064-2008，20.0 mg·L-1)，环氧七氯(GSB05-2317-2008，100.0 mg·L-1)均由中国计量科学研究院提供；当归、白芷、甘草由制药企业提供；正己烷为色谱纯，二氯甲烷、浓硫酸、丙酮均为分析纯。

2方法与结果

2.1色谱条件色谱柱：DB-1701毛细管柱(30 m ×0.32 mm×0.25 μm)；程序升温：初始温度140 ℃，以5 ℃·min-1的速率升温至230 ℃，保持10 min；进样口温度230 ℃，ECD检测器，检测器温度250 ℃，进样量1 μL，不分流进样，载气(氮气)，流速：1.5 mL·min-1；尾吹气：50 mL·min-1。在此条件下色谱图见图1，各成分保留时间见表1。

A对照品溶液B白芷供试品溶液

注：1.六氯苯；2.α-BHC；3.γ-BHC；4.七氯；5.艾氏剂；6.β-BHC；7.δ-BHC；8.环氧七氯；9.反氯丹；10.顺氯丹；11.PP'-DDE；12.OP'-DDT；13.PP'-DDD；14.PP'-DDT。

图1　14种有机氯农药混合对照品溶液(A)和白芷供试品溶液(B)色谱图

2.2标准溶液的制备精密吸取14种农药对照品溶液适量，置100 mL的量瓶中，用正己烷稀释并定容至刻度，摇匀，作为混合标准液的浓溶液，品种及浓度见表2。分别精密吸取浓溶液1、2、4、6、8、10 mL至10 mL量瓶中，用正己烷定容至刻度，作为系列对照溶液。

表2　混合对照品浓溶液的浓度

2.3供试品溶液的制备

2.3.1药材供试液的制备[8-9]取当归、白芷、甘草药材粉末各5 g，精密称定，分别置100 mL具塞锥形瓶中，加水20 mL浸泡过夜，精密加丙酮40 mL，称定重量，超声处理30 min，放冷，再称定重量，用丙酮补足减失的重量，加氯化钠约6 g，精密加二氯甲烷30 mL，称定重量，超声处理15 min，再称定重量，用二氯甲烷补足减失的重量，静置使分层(必要时可离心)，将有机相迅速移入装有适量无水硫酸钠的100 mL具塞锥形瓶中，放置4 h。精密量取35 mL，氮吹至近干，加少量正己烷如前反复操作至二氯甲烷及丙酮除净，用正己烷溶解并转移至10 mL具塞刻度离心管中，加正己烷精密稀释至5 mL，缓慢加入硫酸1 mL，振摇1 min，离心10 min，取上清液，滤过，即得。

2.3.2浸膏的制备由于原药材中农药种类及残留量都有限，需加入适量农药来模拟试验。精密称取当归、白芷、甘草药材粉末各4份，每份120 g，均将其平均分为两组，每组每份样品中均加入14种有机氯农药的浓溶液，见表3，一组加水(8倍量)回流提取两次，另一组加70%乙醇(8倍量)回流提取两次，每次4 h，滤过，合并提取液，分别置称定的蒸发皿中，于水浴锅上浓缩为浸膏，称定浸膏与蒸发皿总重，计算浸膏量，浸膏备用。

表3　药材中添加农药的品种及添加量

2.3.3浸膏供试液的制备各精密称取相当于5 g原药材粉末量的浸膏,分别置100 mL具塞锥形瓶中，自“2.3.1”项下“加水20 mL……”起重复操作，制备供试品溶液。

2.4精密度试验取测定项下的同一种对照品溶液连续进样6次，记录各峰面积，α-BHC、β-BHC、γ-BHC、δ-BHC、环氧七氯、PP'-DDE、OP'-DDT、PP'-DDT、PP'-DDD、顺氯丹、七氯、反氯丹、艾氏剂、六氯苯峰面积的RSD值分别为1.2%、1.0%、1.3%、0.9%、0.8%、1.1%、1.2%、1.1%、1.3%、0.9%、0.7%、1.5%、1.0%、1.0%，表明仪器精密度良好。

2.5加样回收试验精密称取白芷药材粉末6份，每份5 g,分别置100 mL具塞锥形瓶中，各加入混合标准液1 mL，自“2.3.1”项下 “加水20 mL……”起重复操作，制备供试品溶液。按“2.1”项下色谱条件进样，计算其回收率，结果见表4。

表4　加样回收试验结果

表5　转移率结果

注：“-”标示浸膏中农药残留量低于检出限。

2.6检测限试验精密量取混合标准液的浓溶液1 mL，置100 mL量瓶中，用正己烷稀释至刻度，作为混合标准溶液。按“2.1”项下色谱条件检测，根据不同农药的信噪比，将该标准液再稀释一定倍数后按上述色谱条件检测，结果α-BHC、β-BHC、γ-BHC、δ-BHC、环氧七氯、PP'-DDE、OP'-DDT、PP'-DDT、PP'-DDD、顺氯丹、七氯、反氯丹、艾氏剂、六氯苯的检测限分别为0.2、0.2、0.2、0.2、0.2、0.2、0.5、0.2、0.4、0.5、0.2、0.2、0.5、0.2 μg·L-1。

2.7转移率的测定原药材粉末中农药残留测定结果均低于检出限，因此，浸膏中所含农药的总量可视为由所加入农药转移而来，其转移率结果见表5。

3讨论

通过对上述14种有机氯农药在当归、白芷、甘草药材水提取和70%乙醇提取前后转移率结果进行比较发现，有机氯农药在提取过程中的分解、降解程度有一定的差异，70%乙醇提取前后的有机氯农药转移率普遍高于水提取的转移率，δ-BHC农药的转移率最高。

进行有机氯农药随饮片煎煮前后的转移率试验研究为制剂的安全性评估提供了参考依据，因此对制剂中有机氯农药残留的监测有一定的必要性。

参考文献

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Determination of transfer rates of organochlorine pesticides with medicinal slices decocting rate of before and after by gas chromatography method

LUE Qian1,WANG Guo-hai2

(1.TraditionalChinesemedicineroomofWeinanInstituteforControlofFoodandDrug.Weinan,Shaanxi714000;2.TraditionalChineseMedicineRoomofShaanxiProvincialInstituteforControlofFoodandDrug,Xi′an,Shaanxi710061,China)

Abstract:ObjectiveBy determining the transfer rates of fourteeen organochlorine pesticides with Angelica sinensis.Radix Angelicae Dahuricae.Radix Glycyrrhiza medicinal slices decocting of before and after to provide some references for safety evalustion.MethodsUsing sulfonated prepared samples.Determining by Gas Chromatograph (GC)-Electron Capture Detector(ECD) with DB-1701 capillary column(30 m ×0.32 mm×0.25 μm).The column temperature was programmed,injection temperature was 230℃，detector temperature was 230℃.ResultsThe transfer rates of fourteeen organochlorine pesticides with three medicinal slices between 0～32.9% and 0～49.1%.ConclusionOrganochlorine pesticides have bigger loss with medicinal slices decocting of before and after.The transfer rates of different organochlorine pesticides have difference.Detection of pesticide residues has certain necessity and provide safety nets for drugs.

Key words:HERBAL PIECES FOR DECOCTION;Pesticide Residues;Gas Chromatography-Mass Spectrometry

doi:10.3969/j.issn.1009-6469.2016.05.012

(收稿日期：2016-02-07，修回日期：2016-03-28)