IgG抗-E引起新生儿溶血病1例

覃　涛,黄美容

(1．贵州航天医院检验科，贵州遵义 563000;2．贵州遵义医学院附属医院输血科，贵州遵义 563000)

·个案与短篇·

IgG抗-E引起新生儿溶血病1例

覃涛1,黄美容2

(1．贵州航天医院检验科，贵州遵义 563000;2．贵州遵义医学院附属医院输血科，贵州遵义 563000)

本院近期在工作中发现1例由IgG抗-E引起的新生儿溶血病(HDN)，现将其报道如下。

1资料与方法

1.1一般资料新生患儿，男，G1P1，足月，出生后因“出现皮肤黄染半天”于2013年5月29日急诊收入本院新生儿科；外院剖宫产分娩，无输血史；其母年龄 21岁，既往无妊娠史， 但在6年前，因手术治疗曾输过血，血型为A型，RhD(+)。入院检查：总胆红素464.7 μmol/L，直接胆红素13.4 μmol/L；红细胞(RBC)2.48×1012/L，血红蛋白(Hb)108g/L，血细胞比容(HCT)为0.33。临床医生征求家属同意，拟行换血治疗，申请O型洗涤红细胞3 U，AB型血浆200 mL行换血治疗。本科接申请单后，立即定血型：玻片法，B型RhD(+)，然后联系血站，洗涤O型RhD(+)洗涤红细胞3 U。当收到血站送来的洗涤红细胞后，值班人员进行交叉配血。盐水法：主侧无溶血，无凝集，次侧凝集；凝聚胺配血：主侧凝集，次侧凝集。复查双方血型无误后，通知临床从外院抽取患儿母亲的血液送至本科，进行下述试验，最终筛选了Rh血型(CcDee或CCDee)的B型悬浮少白细胞红细胞及AB型新鲜冰冻血浆进行换血，未出现任何输血不良反应，症状得到明显改善。

1.2试剂抗-D(IgM)、抗-A、抗-B、抗IgG、C3d(上海血液生物医药有限责任公司，生产批号：20130130、20121225、20110819)；凝聚胺试剂盒(珠海贝索生物技术有限公司，生产批号：113031)；不规则抗体筛查卡、新生儿ABO/RhD血型鉴定卡、抗球蛋白卡、RH血型抗原检测卡(单克隆抗体)、筛选细胞、谱细胞(长春博迅生物技术有限责任公司，生产批号：20130202、20121101、20121205、20121201、20135608、20135701)。

1.3方法ABO、Rh血型抗原、IgG检测(微柱凝胶法)，将被检者红细胞用生理盐水稀释为0.5%～0.8%的浓度，取50 μL加在相应微柱凝胶卡中，离心观察结果。

直抗试验：取患儿红细胞用生理盐水充分洗涤6次后，配成2%～5%的悬液，各取1滴悬液分别加入到含2滴抗IgG、C3d多抗、抗C3d单抗、抗IgG单抗、生理盐水(对照)中，混匀、离心观察结果。

不规则抗体筛选：将浓度为0.5%～0.8%的筛选细胞Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ号分别加入到不规则抗体筛查卡中，在相应孔中再分别加入待测标本：等量的母亲的血浆、患儿的血浆、患儿红细胞放散液，37 ℃孵育15 min，离心观察结果。

抗体鉴定：将浓度为0.5%～0.8%的谱细胞1～10号分别加入到抗人球蛋白卡中，在相应孔中再分别加入待测标本：等量的母亲的血浆、患儿的血浆、患儿红细胞放散液，37 ℃孵育15 min，离心观察结果。

效价测定：取等量2 mL与母亲血清混匀，37 ℃孵育1 h，用生理盐水对倍稀释，分别加入到等量的含有相应抗原的HDN母体效价检测卡中，37 ℃孵育15 min，离心观察结果。其中抗-E测定细胞抗原：筛选4份Rh(E)阳性的O型献血员洗涤红细胞作为抗原，浓度为0.5%～0.8%。抗-B测定细胞抗原：筛选4份Rh(E)阴性的B型献血员洗涤红细胞作为抗原，浓度为0.5%～0.8%。

排除试验：在抗人球蛋白卡中，分别加入A型、B型、O型红细胞抗原，在对应孔中再分别加入待测标本，等量患儿的血浆、放散液，37 ℃孵育15 min，离心观察结果。其中，A型、B型、O型为Rh(E)阴性的4人份献血员洗涤红细胞。

放散液的制备：将新生儿红细胞用生理盐水充分洗涤后，加入等量生理盐水56 ℃，热放散8 min，离心取放散液备用。

2结果

2.1血型结果新生儿血型为B型，CcDEe；母亲血型为A型，CcDee。

2.2不规则抗体筛查结果新生儿血浆：Ⅰ号、Ⅲ号阳性；新生儿放散液：Ⅰ号、Ⅲ号阳性；母亲血浆：Ⅰ号、Ⅲ号阳性。见表1。

2.3直抗结果新生儿IgG，++++；抗IgG、C3d(强阳性)、抗C3d(阴性)；母亲IgG，阴性；抗IgG、C3d(阴性)；抗C3d(阴性)。

2.4谱细胞抗体鉴定结果新生儿血浆2、3、4、5、8、10号细胞阳性；新生儿放散液：2、3、4、5、8、10号细胞阳性；母亲血浆：2、3、4、5、8、10号细胞阳性。按照谱细胞反应格局，判断该不规则抗体为抗-E。见表2。

2.5效价检测母亲血浆中抗-E效价为1∶256，抗-B效价小于1∶2。

2.6排除试验游离试验无抗A、抗B抗体，放散试验无抗A、抗B抗体。

2.7配血结果明确抗-E导致HDN而引起配血不合，排除ABO系统导致HDN后，筛选Rh(E)阴性的B型红细胞(CcDee或CCDee)，进行交叉配血。结果：盐水法，主次侧无溶血，无凝集；采用凝聚胺法及抗人球蛋白法，主侧，无溶血无凝集，次侧凝集(由于直抗强阳性)。输血后，未出现任何输血不良反应。

表1　　患儿血浆、红细胞放散液及母亲血浆抗体与筛选细胞反应格局

表2　　患儿血浆、红细胞放散液及母体血浆抗体与谱细胞反应格局

3讨论

HDN是指母胎血型不合所致的胎儿或新生儿免疫性溶血性疾病，胎儿从父方遗传所获血型抗原为母方所缺乏，分娩过程中该胎儿血型抗原进入母体，使母体产生抗该血型抗原的抗体(IgG类)[1]。当母体再次妊娠时，抗该血型抗原的抗体(IgG类)可通过胎盘进入胎儿血液循环，使胎儿在宫内或出生后发生大量红细胞破坏，出现一系列溶血性征象的疾病。在本病例中，母亲为G1P1，血型为A型(非O型)，RhD阳性，在产前检查时，很容易就排除了由于母子血型不合导致的HDN。但是产妇曾有输血史，需要引起重视，若在产前检查时，进行不规则抗体筛选，就会发现不规则抗体，并鉴定，然后进行夫妻双方Rh 5个抗原检测，定期监测抗-E的效价。母婴血型不合的免疫性溶血病可以进行早期检查，早期发现，并采用相应的干预治疗，必要时行宫内输血、及时剖宫产、产后新生儿换血等多项措施协同作用才能有效防治新生儿溶血病[2]。所幸，通过实验及时筛选出配合的血液给予换血，无输血不良反应，经临床进一步治疗，患儿病情好转。

在排除试验中，分别筛选Rh(E)阴性的A、B、O型细胞抗原，做了新生儿血样的游离和放散试验，均未检出抗A抗体和抗B抗体。同时，用Rh(E)阴性的B细胞抗原，检测母亲血清抗B效价，抗B效价小于1∶2。所以最终选用Rh(E)阴性的B型少白细胞的红细胞配血。次侧交叉配血中，由于患儿红细胞已经被母体的抗-E致敏，直抗试验为++++，所以在检测IgG类抗体的聚凝胺方法及抗人球蛋白方法中，次侧凝集是由致敏在胎儿红细胞上的抗-E与胎儿本身的E抗原造成，并非是与献血员不相合造成的。因此，直抗阳性的患儿红细胞次侧配血常出现凝集，不作配血禁忌考虑，只要主侧配血相合即可进行输血[3]。

由于Rh血型抗原表位是多肽，在胎儿出生时已发育成熟，与相应的IgG抗体亲和力较强，严重的HDN病例多由Rh血型抗体引起，在HDN的发病方面，Rh血型抗体较ABO血型抗体更为重要[4]。Rh血型系统主要抗原有D、C、c、E和e抗原，以D抗原的抗原性最强。近年来，我国实行Rh(D)相容性输血，绝大多数患者都能接受同型血液输注，因输血所致同种免疫性抗-D越来越少，然而抗-E已逐渐成为最多见的经输血产生的Rh血型抗体[5]。因此，为了减少Rh引起的同种免疫，有必要在输血前、献血员献血时进行Rh 5个抗原的检测，并同型输注；产前检测时，对有输血史、妊娠史、流产史的孕妇，有必要进行孕妇不规则抗体筛选、夫妻双方ABO、Rh 5个抗原的鉴定，并定期监测其效价。

参考文献

[1]胡丽华．临床输血学检验[M]．3版．北京：人民卫生出版社，2012：194.

[2]马印图，刘芳，李振奇，等．母婴血型不合新生儿溶血病早期干预治疗的临床研究[J]．医学研究杂志，2010，39(8)：87-90．

[3]中华人民共和国卫生部医政司．全国临床检验操作规程[M]．3版．南京：东南大学出版社，2006．

[4]Marion ER,Ragnhid O,Marsh WL.The clinical significance of alloantibodies of blood group system[J].Semin Hematol,2000,37(2):197-203.

[5]吴远军，吴勇，陈宝婵，等．Rh血型抗体的检测及结果分析[J]．细胞与分子免疫学杂志，2008，24(6)：604-606．

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.10.070

文献标识码：C

文章编号：1673-4130(2016)10-1446-02

(收稿日期：2016-02-15)