张秋萍,陈雪梅,李少华,王增烈,高忠坂
(1.厦门市中医院药剂科,福建厦门361009;2.武夷学院茶与食品学院,福建武夷山354300;3.厦门市马巷卫生院药剂科,福建厦门361009;4.三明市食品药品检测中心,福建三明365001)
天仙果预防关节炎活性部位筛选
张秋萍1,陈雪梅1,李少华2,王增烈3,高忠坂4
(1.厦门市中医院药剂科,福建厦门361009;2.武夷学院茶与食品学院,福建武夷山354300;3.厦门市马巷卫生院药剂科,福建厦门361009;4.三明市食品药品检测中心,福建三明365001)
摘要:采用溶剂法提取分离天仙果不同极性部位,以Freund's完全佐剂型关节炎大鼠模型对天仙果提取分离的各部位进行预防关节炎的药效学筛选。实验表明天仙果醇提、醇提水沉部位具有明显的预防关节炎作用,其中以醇提水沉组效果最佳,即中等极性部位具有预防关节炎作用。
关键词:天仙果;活性部位;预防关节炎;Freund's完全佐剂
天仙果为桑科榕属植物天仙果(Ficus erecta)的根,俗称“牛奶籽根”、“牛奶浆根”。在福建省武夷地区民间常将天仙果与肉类煲汤食用,香气四溢,汤水醇美,是当地居民预防关节炎药膳煲汤首选食材。本文以佐剂性关节炎大鼠模型[1]对天仙果提取分离的各部位[2]进行预防关节炎的药效学筛选,现将结果报道如下。
1.1 材料
天仙果,购于福建省武夷山市,足容量测量装置,70%酒精(食用级),Freund's完全佐剂(批号:SLBK1731V sigma),蒸馏水。
1.2 动物
Wistar大鼠,体质量(180±20)g,清洁级(上海斯莱克公司,合格证号:2014-0005)。正常饲养3天后供试。
2.1 天仙果不同部位的制备
2.1.1 天仙果水提部位的制备:
取天仙果粉末(过12目筛)40 g,置于1 L烧瓶中,加20倍量水,浸泡1 h,煎煮两次,每次1 h,滤过,合并滤液,浓缩至2.5 g/mL(以生药量计),备用。
2.1.2 天仙果水提醇沉部位的制备:
取天仙果粉末(过12目筛)40 g,置于1 L烧瓶中,加20倍量水,浸泡1 h,煎煮两次,每次1 h,滤过,合并滤液,浓缩至1∶1.1,加3倍量70%乙醇沉淀,冰箱静置过夜,除去上清液,下层溶液回收乙醇至无醇味,加水调整为2.5 g/mL(以生药量计),备用。
2.1.3 天仙果醇提部位的制备:
取天仙果粉末(过12目筛)40 g,置于1 L烧瓶中,加20倍量70%乙醇,浸泡1 h,煎煮两次,每次1 h,滤过,合并滤液,回收乙醇至无醇味,加水调整为2.5 g/mL(以生药量计),备用。
2.1.4 天仙果醇提水沉部位的制备:
取天仙果粉末(过12目筛)40 g,置于1 L烧瓶中,加20倍量70%乙醇,浸泡1 h,煎煮两次,每次1 h,滤过,合并滤液,回收乙醇至无醇味,加3倍量水沉淀,冰箱静置过夜,除去上清液,浓缩,加水调整为2.5 g/mL(以生药量计),备用。
2.2 方法与结果
2.2.1 天仙果提取物对弗氏完全佐剂型大鼠足肿胀度的影响
取(180±20)g Wistar雄性大鼠,实验前先适应性喂养3 d,随机分为六组,每组10只,预留一组做为空白对照组,其余各组于每只大鼠右后足跖皮内注射Freund's完全佐剂0.1 mL致炎。测量致炎及给药后大鼠足肿胀度,造模后第8 d开始灌胃给药,连续给药7 d,各给药组按照为5 g/kg(以生药量计)体重剂量的灌胃,空白对照组、模型对照组给予相同体积的生理盐水。观察天仙果提取物对弗氏完全佐剂型大鼠足肿胀度的影响[3]。
用蓝色记号笔在大鼠右足踝关节处划圈,用足容量测量装置测量大鼠足肿胀度。采用graphpad prism5.01[4],各组结果以(mean±s)表示,组间比较采用均数比较法,实验结果见表1,分析结果见图1。计算公式:
其中Ec和Et分别代表模型对照组和给药组的平均肿胀度。
表1 天仙果提取物对弗氏完全佐剂型大鼠足肿胀度的影响(mean±s,n=10)
图1 天仙果提取物对弗氏完全佐剂型大鼠足肿胀度的影响
根据统计,模型组与空白组比较,受试大鼠足肿胀度P<0.01,差异具有高度统计学意义,提示造模成功;给药后,醇提部位组与模型组比较P<0.05,差异具有统计学意义;醇提水沉组与模型组比较P<0.05,差异不具有统计学意义。
2.2.2 天仙果提取物对弗氏完全佐剂型大鼠体质量的影响
称量致炎前及给药前后2.2.1中大鼠体质量,采用graphpad prism5.01,各组结果以(mean±s)表示,组间比较采用均数比较法,实验结果见表2,分析结果见图2。
表2 天仙果提取物对弗氏完全佐剂型大鼠体重的影响(mean±s,n=10)
图2 天仙果提取物对弗氏完全佐剂型大鼠体质量的影响
各组在造模前和给药后体质量比较P>0.05,差异不具有统计学意义。
类风湿性关节炎是一类致残性极高的自身免疫功能障碍性疾病,现今抗风湿药物一线药物以激素、非甾体抗炎药为主,疗效明确、毒副作用较大。天仙果作为武夷山地区民间药食同源植物,主要用于预防关节炎性疾病,因此本实验选用弗氏完全佐剂型关节炎模型,采用造模后7 d给药方法进行研究,实验结果表明,天仙果对弗式完全佐剂型关节炎模型具有明显的效果,其中尤以醇提、醇提水沉组效果为佳,也侧面印证了当地民众将天仙果与肉类煲汤方法的科学性;通过对弗氏完全佐剂型大鼠体重的分析,天仙果各提取部位均对大鼠体重无影响,不影响大鼠体重的正常增长,大鼠的体重波动都在正常范围内。
参考文献:
[1]夏丽娟,陈飞虎,阮晶晶,等.重组人内抑素诱导佐剂性关节炎大鼠滑膜细胞凋亡的研究[J].中国药理学通报,2008,24 (8)∶52-56.
[2]龚莉,向大雄,隋艳华.黄精心血管活性部位的筛选[J].中药新药与临床药理,2007,18(4)∶301-302.
[3]徐叔云,卞如濂,陈修.药理实验方法学[M].北京∶人民卫生出版社,2001∶920-921.
[4]彭芳,金建华,余方.Graphad prism 5.01在科技期刊统计图表中的应用[J].中国科技纵横,2010(1)∶104-105.
(责任编辑:夏婷婷)
Screening on the Active Fractions of Prevent Arthritis from Ficus Erecta
ZHANG Qiuping1,CHEN Xuemei1,LI Shaohua2,WANG ZengLie3,GAO Zhongban4
(1.Department of Pharmacy,Xiamen TraditionaL Chinese HospitaL,Xiamen,Fujian 361009;2.SchooL of Tea and Food Science,Wuyi University,Wuyishan,Fujian 354300;3.Xiamen Maxiang HospitaL Pharmacy,Xiamen,Fujian 361009;4.Sanming Food and Drug Inspection Center,Sanming,Fujian 365001)
Abstract:The active components from Ficus erecta were extracted by soLvent separation methods,and their Prevent Arthritis effects on AA rat modeL. Among the extracts from Ficus erecta,ethanoL and ethanoL-water extract has good Prevent arthritis effect,ethanoL-water extract better,the parts with medium poLarity from Ficus erecta have the best Prevent arthritis.
Key words:Fairy fruit;active site;prevent arthritis;Freund 's compLete adjuvant
中图分类号:R284.2
文献标识码:A
文章编号:1674-2109(2016)03-0015-03
收稿日期:2015-09-10
基金项目:福建省卫生厅青年课题(2013-2-97)。
作者简介:张秋萍(1985-),女,汉族,药师,主要从事中药制剂学方向研究。