铜绿假单胞菌β-内酰胺酶的检测及耐药性分析

周 星

铜绿假单胞菌β-内酰胺酶的检测及耐药性分析

周 星

目的 探讨铜绿假单胞菌β-内酰胺酶的检测及耐药性分析。方法 抽取铜绿假单胞菌株123株，对其展开体外药敏试验，对耐药率进行统计，而后对β-内酰胺酶进行检测，对比分析β-内酰胺酶阳性与阴性菌株的耐药率。结果 经统计发现，本组123株铜绿假单胞菌株中，检出产金属β-内酰胺酶菌株26株，阳性率为21.14%；金属β-内酰胺酶阳性菌株对头孢哌酮、头孢曲松、哌拉西林/他唑巴坦、阿米卡星、头孢哌酮／舒巴坦、头孢他啶、哌拉西林、头孢吡肟、亚胺培南的耐药率分别为100.00%、100.00%、73.08%、26.92%、69.23%、76.92%、100.00%、80.77%、100.00%，均明显高于金属β-内酰胺酶阴性菌株的30.93%、63.92%、10.31%、8.25%、1.03%、21.65%，差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 铜绿假单胞菌对β-内酰胺类抗菌药物存在明显耐药性的主要机制为产金属β-内酰胺酶，因此临床用药过程中，及时展开细菌培养和药敏试验的意义重大，能够有效促进临床合理用药，减少耐药性的发生。

铜绿假单胞菌；β-内酰胺类抗生素；合理用药；耐药性

临床上检测到的铜绿假单胞菌属于条件致病菌的一种，可对人体的各个系统产生感染，其具有相对复杂的耐药机制，从而使其成为现阶段临床上所面临的严峻考验。曾有研究指出，金属β-内酰胺酶的产生是铜绿假单胞菌对β-内酰胺类抗菌药物存在明显耐药性的主要机制，从而使得临床用药治疗的难度增加[1]。在临床抗菌治疗的过程中，对病原菌的耐药性进行了解对于临床合理用药，改善疗效，降低耐药性等均具有重要意义[2]。本次研究中出于对铜绿假单胞菌β-内酰胺酶的检测及耐药性进行分析探讨，为今后的临床治疗工作中合理用药提供可靠的参考依据的目的，对123株铜绿假单胞菌株的耐药性以及产金属β-内酰胺酶情况进行了检测分析，现汇报结果如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 研究中资料来源于本院2013年1月～2014年12月收集到的123株铜绿假单胞菌株，菌株来源于本院收治的临床确诊的门诊以及住院患者的痰液、脓液、分泌物、引流液以及尿液标本。

1.2 方法

1.2.1 研究方法 对收集到的123株铜绿假单胞菌株展开体外药敏试验，对耐药率进行统计，而后对β-内酰胺酶进行检测，对比分析β-内酰胺酶阳性与阴性菌株的耐药率。

1.2.2 药敏试验 研究中药敏试验采取K-B法，实验操作依照临床和实验室标准化协会2011年的标准[3]进行，并对药敏结果进行判断。

1.2.3 金属β-内酰胺酶的检测 β-内酰胺酶检测采取纸片协同法进行，金属离子与乙二胺四乙酸络合可使金属酶失去活性，依据该特性，将待测菌株制备成0.5麦氏单位的菌液，将其均匀的涂布在M-H琼脂平板上，并将2张亚胺培南纸片贴在平皿上，纸片之间的距离为2 cm，在其中1张亚胺培南纸片上加入5 μL的EDTA，结果判断阳性标准：含EDTA的亚胺培南纸片的抑菌圈直径相对于亚胺培南纸片增加6 cm，也就是表示该菌株可以产金属酶。

1.3 统计学方法 采用SPSS 18.0统计学软件，计数资料用例数（n）表示，计数资料组间率（%）的比较采用χ2检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 β-内酰胺酶检测结果 本组123株铜绿假单胞菌株中，检出产金属β-内酰胺酶菌株26株，阳性率为21.14%。

2.2 药敏试验结果 研究中对铜绿假单胞菌对临床常用的

12种抗菌药物的耐药性进行了检测，结果发现，铜绿假单胞菌对氨曲南、庆大霉素、头孢哌酮的耐药率超过了40%，而对头孢曲松的耐药率则超过了70%，铜绿假单胞菌对哌拉西林/他唑巴坦、阿米卡星、头孢哌酮／舒巴坦等抗菌药物的耐药率则不足30%。见表1。

2.3 β-内酰胺酶阳性与阴性菌株药敏试验结果对比 金属β-内酰胺酶阳性菌株与阴性菌株对头孢哌酮、头孢曲松、哌拉西林/他唑巴坦、阿米卡星、头孢哌酮／舒巴坦、头孢他啶、哌拉西林、头孢吡肟、亚胺培南的耐药率比较，差异有统计学意义（P＜0.05）；对氨曲南、庆大霉素、左氧氟沙星的耐药率比较，差异

3 讨论

铜绿假单胞菌为临床上十分常见的一种条件致病菌，研究发现，铜绿假单胞菌可以诱发机体多系统、多脏器、多部位的感染。流行病学调查结果显示，在呼吸科多数老年患者的体质虚弱，存在慢性疾病基础，抵抗力较低，因此多长期住院治疗，从而导致患者机体的微生态失衡，造成体内菌群失调，这就为铜绿假单胞菌的生长和繁殖创造了良好的条件[4]。曾有文献报道，铜绿假单胞菌对β-内酰胺类抗生素的耐药性明显，经研究发现，其可能与其产金属β-内酰胺酶有关[5-6]。本次研究中出于对铜绿假单胞菌β-内酰胺酶的检测及耐药性进行分析探讨，为今后的临床治疗工作中合理用药提供可靠的参考依据的目的，对我院收集到的123株铜绿假单胞菌株的耐药性以及产金属β-内酰胺酶情况进行了检测分析，结果发现，铜绿假单胞菌对氨曲南、庆大霉素、头孢哌酮的耐药率超过了40%，而对头孢曲松的耐药率则超过了70%，铜绿假单胞菌对哌拉西林/他唑巴坦、阿米卡星、头孢哌酮／舒巴坦等抗菌药物的耐药率则不足30%；123株铜绿假单胞菌株中，检出产金属β-内酰胺酶菌株26株，阳性率为21.14%，并且金属β-内酰胺酶阳性菌株与阴性菌株对头孢他啶、头孢吡肟、头孢哌酮／舒巴坦、亚胺培南、哌拉西林、头孢曲松、哌拉西林/他唑巴坦、阿米卡星、头孢哌酮的耐药率比较差异有统计学意义；对氨曲南、左氧氟沙星、庆大霉素的耐药率比较则差异无统计学意义。这一结果与相关文献报道结果一致[7-8]，由此证实了，铜绿假单胞菌对β-内酰胺类抗菌药物存在明显耐药性的主要机制为产金属β-内酰胺酶，因此临床用药过程中，及时展开细菌培养和药敏试验的意义重大，能够有效促进临床合理用药，减少耐药性的发生。

[1] 余广超,徐霖,袁广卿，等.亚胺培南耐药铜绿假单胞菌的金属β-内酰胺酶检测［J］.中国抗生素杂志,2011,36(3):223-225．

[2] 张娟,叶聪秀，曹开源，等.耐碳青霉烯类铜绿假单胞菌金属β-内酰胺酶基因检测及其与整合子的关系研究[J].中国抗生素杂志,2013,38(9):705-710．

[3] 陈东科，孙长贵．实用临床微生物学检验与图谱［M］.北京:人民卫生出版社,2011：99-102.

[4] 张淑明,马国贤,李晓辉,等.2011年本院铜绿假单胞菌分布及耐药情况分析［J］.中国临床药理学杂志,2012,28(9):650-652．

[5] 屠涌涛,肖美英,糜祖煌.一组泛耐药铜绿假单胞菌耐药相关基因的样本聚类分析[J].实用医学杂志,2013,29(9):1515-1517．

[6] 周志慧，吕芳芳,周建英,等.中国部分地区铜绿假单胞菌耐药性及主要β-内酰胺酶基因型分布[J].中华传染病杂志,2010, 28(10):577-581．

[7] 王绍志,柴连海,张勇，等.ICU患者感染铜绿假单胞菌对抗菌药物耐药性机制分析及检测方法评价[J].中国急救医学,2015,25(6):510-513.

[8] 杨艳,王厚照,张玲，等.多重耐药鲍曼不动杆菌耐药性及β－内酰胺酶耐药基因的研究[J].微生物学杂志,2015,18(4):62-66.

湖南 411400 湘乡市人民医院检验科 （周星）无统计学意义。见表2。

表1 123株铜绿假单胞菌株药敏试验结果统计

抗菌药物敏感(n)敏感率(%)耐药(n)耐药率(%)氨曲南7056.915343.09庆大霉素7157.725242.28头孢哌酮6754.475645.53头孢曲松3528.468871.54哌拉西林/他唑巴坦9476.422923.58阿米卡星9879.672520.33头孢哌酮／舒巴坦10484.551915.45头孢他啶8266.674133.33左氧氟沙星8065.044334.96哌拉西林7863.414536.59头孢吡肟7863.414536.59亚胺培南9778.862621.14

表2 β-内酰胺酶阳性与阴性菌株药敏试验结果对比[n(%)]

抗菌药物金属酶阳性（n=26）金属酶阴性（n=97）χ2值P值敏感耐药敏感耐药氨曲南15（57.69）11（42.31）55（56.70）42（43.30）0.00820.3982庆大霉素14（53.84）12（46.16）57（58.76）40（41.24）0.20310.4412头孢哌酮0（0）26（100.00）67（69.07）30（30.93）39.44510.0212头孢曲松0（0）26（100.00）35（36.08）62（63.92）13.11270.0276哌拉西林/他唑巴坦7（26.92）19（73.08）87（89.69）10（10.31）44.83280.0187阿米卡星19（73.08）7（26.92）89（91.75）8（8.25）5.04840.0421头孢哌酮／舒巴坦8（30.77）18（69.23）96（98.97）1（1.03）67.88970.0243头孢他啶6（23.08）20（76.92）76（78.35）21（21.65）28.18950.0194左氧氟沙星15（57.69）11（42.31）65（67.01）32（32.99）0.78300.3287哌拉西林0（0）26（100.00）78（80.41）19（19.59）57.14640.0102头孢吡肟5（19.23）21（80.77）73（75.26）24（24.74）27.74200.0113亚胺培南0（0）26（100.00）97（100.00）0（0）123.00000.0098

10.3969/j.issn.1009-4393.2016.13.102