核桃叶提取液对小鼠红细胞渗透脆性的实验研究

李　冲，许火龙，韦晓慧，钟祖利，李华根，王彩冰

(右江民族医学院1.2013级临床医学本科；2.生理学教研室,百色 533000)



核桃叶提取液对小鼠红细胞渗透脆性的实验研究

李冲1，许火龙1，韦晓慧1，钟祖利1，李华根1，王彩冰2▲

(右江民族医学院1.2013级临床医学本科；2.生理学教研室,百色 533000)

【关键词】核桃叶；小鼠；红细胞渗透脆性

近年来研究发现，核桃叶具有抗菌消炎、抗肿瘤、抗衰老、增强记忆力和免疫力、抑制心肌收缩力、增强小肠平滑肌收缩力等作用[1～3]。但国内外尚未发现有核桃叶对血细胞影响的文献报道，为了解核桃叶对红细胞膜稳定性是否有影响，本课题组设计核桃叶对小鼠红细胞(RBC)渗透脆性的实验，旨在为核桃叶的开发和应用提供实验依据。

1材料与方法

1.1实验动物昆明种小鼠，雌雄各半，体重20～30 g，由右江民族医学院实验动物中心提供(许可证号：SYXZ桂2011-0010)。

1.2药材、药品核桃叶采于广西百色市郊，晒干备用。0.9% NaCl注射液(贵州天地药业有限责任公司，批号：H52020069)；肝素钠注射液(上海第一生化药业有限公司，批号：H31022051)。

1.3核桃叶提取液的制备干核桃叶100 g，加入4000 ml蒸馏水，室温浸泡1 h，大火煮沸，文火煎至200 ml，纱布过滤除渣，水浴浓缩至100 ml(相当于生药 1 g/ml)，冷却后放入冰箱4℃保存，给小鼠灌胃时用生理盐水分别配制成150 mg/ml、600 mg/ml的浓度。

1.4动物分组与给药方法取小鼠30只，随机均分为正常对照组(给予0.9% NaCl灌胃)、核桃叶低剂量和高剂量组(分别给予150、600 mg/ml核桃叶提取液灌胃)，共3组，雌雄各半，按小鼠的体重计算灌胃量(10 ml·kg-1)，1次/d，连续14 d。

1.5NaCl溶液的浓度设定不同浓度NaCl溶液均由0.9% NaCl注射液和蒸馏水按不同比例配置，浓度分别为0、0.25%～0.64%(梯度为0.03%)、0.9%，共16个浓度，其中以0和0.9% NaCl浓度作为红细胞完全破裂和未破裂的参考标准。各浓度的NaCl溶液均取2 ml置入10 ml规格的试管中备用，16个浓度构成一组，供1只小鼠红细胞渗透脆性的测定。

1.6红细胞渗透脆性的测定小鼠末次给药后1 h，眼球摘除采血放入肝素试管中，吸管吸血分别垂直悬滴入盛有不同浓度的NaCl溶液试管中1滴，静置1 h时观察红细胞情况，分别记录红细胞开始破裂和红细胞全部破裂的NaCl浓度；从高浓度依次观察判断，红细胞开始破裂：管底有细胞沉淀，试管中上清液呈浅红色(溶液不混浊)；红细胞全部破裂：管底无细胞沉淀，整管溶液呈深红色(无混浊)[4]。

2结果

正常对照组、核桃叶低剂量和核桃叶高剂量组的红细胞开始破裂和完全破裂的NaCl浓度分别比较差异均无统计学意义(P>0.05)。见表1。

表1　核桃叶提取液对小鼠RBC渗透脆性的比较±s)

3讨论

红细胞渗透脆性是指红细胞在低渗盐溶液中会发生膨胀破裂的特性。血液中的红细胞对低渗盐溶液的抵抗力各不相同，红细胞渗透脆性越大，红细胞膜的稳定性就越差，发生溶血的概率就越高[5]。红细胞在不同浓度的低渗盐溶液中则表现出不同的现象，红细胞开始破裂的NaCl浓度为红细胞最大脆性值，代表该血液红细胞的最小抵抗力；红细胞完全破裂的NaCl浓度为最小脆性值，代表该血液红细胞的最大抵抗力[4]。

本实验结果显示：三组红细胞开始破裂和完全破裂的NaCl浓度分别比较差异均无统计学意义，说明核桃叶不影响红细胞渗透脆性，即核桃叶不影响红细胞膜的稳定性和寿命，不会诱发溶血。但老年人易发生炎症感染、肿瘤繁殖、衰老、心脑疾病、消化不良等不良状况，而核桃叶具有抗菌消炎、抗肿瘤、抗衰老、增强记忆力和免疫力、抑制心肌收缩力、增强小肠平滑肌收缩力等作用[1～3]，所以，核桃叶有望成为老年人的治疗和保健食品；可老年人易发生老年性贫血[6]，因此老年人用药时更需评估药物有无溶血作用。本研究结果表明核桃叶不影响红细胞膜的稳定性和寿命，这有利于核桃叶的应用推广。

参考文献

[1]许青松,陈新用,宋卫锋,等,核桃叶水提取物对小鼠炎症及免疫功能的影响[J].延边大学医学学报,2008,31(2):93-95.

[2]宋庆,刘亭秀,李静，等.核桃叶提取液对离体灌流蛙心活动的实验研究[J].中外医学研究,2015,13(2):3-5.

[3]刘亭秀,宋庆,李静，等.核桃叶提取液对家兔离体小肠平滑肌收缩活动的影响[J].右江民族医学院学报,2015,37(1):11-13.

[4]梁兴东,韦廷安,黎华连.一种改良的红细胞渗透脆性试验方法[J].国际检验医学杂志,2012,33(10):1237-1238.

[5]白波,杜友爱.生理学[M].南京:江苏科学技术出版社,2013:40.

[6]丁琪,蒲晓彦,宋丽洁，等.老年性贫血[J].武警医学,2012,23(2):166-168.

(编辑：梁明佩)

(收稿日期：2016-01-18修回日期：2016-04-18)

中图分类号：R931.71；R285.5

文献标识码：B

DOI:10.3969/j.issn.1003-1383.2016.02.032

作者简介：李冲，男，本科在读。E-mail:240398767@qq.com通信作者：王彩冰，女。E-mail：wangcb4444@163.com

基金项目：2015年广西壮族自治区大学生创新创业训练计划项目(201510599089)