云南省昌宁猪场猪圆环病毒2型血清学调查

舒相华 李晓红 曲伟杰 王绍卿 宋春莲

（云南农业大学动物科学技术学院，云南昆明 650201）



云南省昌宁猪场猪圆环病毒2型血清学调查

舒相华 李晓红 曲伟杰 王绍卿 宋春莲

（云南农业大学动物科学技术学院，云南昆明 650201）

［摘 要］猪圆环病毒2型是现在危害我国养猪业最严重的疫病之一，为了解云南省昌宁县猪圆环病毒2感染情况，为全县防控该病提供数据。2015年以全县示范基地、规模户、公猪站为对象，采集7个乡镇72家养猪场（户）的2413头种猪血液，用ELISA方法检测免疫抗体、PCR检测病毒核酸。结果显示：猪圆环病免疫抗体阳性率为68.89%，带毒率为4.99%。种母猪的免疫抗体阳性率率为54.54%，带毒率为6.1.%；种公猪的免疫抗体阳性率为65.52%，带毒率为4.93%，昌宁县种猪群的猪圆环病毒2型病经过多年努力已得到基本控制，种公猪是今后防控的重点。

［关键词］猪圆环病毒2型ELISA PCR血清学调查

猪圆环病（Porcine circovirus infection）是由猪圆环病毒引起的猪的一种新的传染病。猪圆环病毒（Porcine circovirus，PCV）为圆环病毒属的成员之一。猪圆环病可以分为2种血清型，即PCV-1和PCV-2，其中最重要的为PCV-2型，而且PCV-2对猪的危害极大，甚至会引起一系列的临床症状等等［1］。目前，猪圆环病毒在全国都存在，在部分猪场感染率很高，能引起很多疫病发生及混合感染，造成养猪业巨大损失。对该病的防控主要使用弱毒疫苗和灭活疫苗。该病毒感染还能引起免疫抑制，造成其他疫病免疫失败，为综合防控猪场疫病发生，就要控制住该病在猪场的感染，就要定期对该病进行流行病学调查，掌握该病在猪场和一个地区的发病和预防状况，才能做出科学的防控措施。

1　材料与方法

1.1材料来源与处理

云南省昌宁县7个乡镇72家养猪场（户）的2413头猪，采用前腔静脉采血的方式采集种猪抗凝血和全血各5ml，全血经离心后取上层血清置于-4℃保存备用。

1.2实验试剂

用于猪圆环病2型抗体ELISA检测试剂盒（IDEXX公司和武汉科前试剂盒）。

用于猪圆环病2型抗原检测PCR（厂家）

1.3试验器材

PCR仪，微量移液枪、恒温箱、离心机、酶标仪、烧杯、量筒、微量混匀器

1.4实验过程

1.4.1猪圆环病毒2型ELISA抗体检测按试剂盒说明书操作方法和结果判定标准进行。

1.4.2猪圆环病毒2型PCR的简单操作，PCV-2 PCR反应体系为：PCR总体积为25μl，包括Taq DNA聚合酶12μl，PCV-2-1引物1μl，PCV2-2引物1μl，超纯水10μl，待检DNA模板1μl，瞬时震荡瞬时离心混匀。PCR反应参数为：94℃预变性120 S；94℃变性45 S，58℃退火45 S，72℃延伸45 S，共30个循环；最后72℃延伸8 min。取5μl PCR产物进行1%琼脂糖凝胶电泳，以出现500bp特异性条带的样品为阳性。

2　结果与分析

2.1各乡镇规模养殖场及散养户检测结果

本次实验对昌宁县各乡镇规模养殖场以及一些散养户的猪群进行圆环病流行病学调查，结果如下：

结果显示：猪圆环病免疫保护率为68.89%，感染率为4.99%。

2.2种公、母猪种猪猪圆环病毒2型、抗体检测

表2　种公、母猪圆环、ELISA抗体检测和PCR抗原检测结果

结果显示：种母猪的免疫保护率为54.54%，感染率为6.1.%；种公猪的免疫保护率为65.52%，感染率为4.93%。母猪的免疫保护率低于公猪，且感染率高于公猪。表明对猪圆环病母猪比公猪更为易感。

2.3进行疫苗和不进行疫苗的猪场抗原阳性

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对72家猪场调查分析显示：一共进行了72家调查，进行疫苗防疫的有7家，不进行疫苗防疫的有66家，进行疫苗防疫的有1家有少数表现出阳性，不进行疫苗防疫的都存在阳性。

3　讨论

（1）猪圆环病毒2型危害极大，往往伴随着一系列其他病原的发生。如可以引起猪圆环病与猪伪狂犬病的混合感染、猪圆环病与细小病的混合感染等等。如李海超等等［2］通过PCR设计引物检测来自自山东、福建、安徽、河北、河南、广西、辽宁和湖北八个省猪圆环病毒2型与猪细小病毒混合感染，其中在被检测的227份病料中，PCV-2扩增阳性的病料为162份，细小病毒1阳性病料135份，细小病毒2阳性病料107份，表明在采样的8个省份的猪群中普遍存在细小病毒病 和PCV-2的感染，其中两种病原体的混合感染较为普遍。PCV-2在上述省份的感染率最高（50% ～100%），总阳性率达到71.37%，安徽省样品的感染率最高为100%；其次为细小病毒1，总感染率为59.47% （26.67% ～100%），除了河南省和湖南省以外，其他6个省的感染率均在60%以上。细小病毒2的感染率较低，为47.14% （27.27%～81.82%），安徽、河北、辽宁和广西的感染率均在50%以上。各省PCV-2与细小病 感染的总阳性率达到51.54%，其中PCV-2与细小病毒病1的混合感染率为44.05%，3种病原体的混合感染率均很低（低于20%）。整体上各病原体的流行分布没有一定的地域性，而是与PPCV-2的流行情况成正比。由此，表明猪圆环病毒2型危害极大，而且圆环病毒2型的发生往往伴随着其他病的发生。黎发金等［3］曾表示猪圆环病危害极大，应严格执行各项生物安全措施，加强环境消毒、加强饲养管理、减少诱因等。如舍内和舍外要进行定期的消毒，进出养殖场的人员和车辆也要进行消毒措施，定期灭蝇灭鼠，粪污无害化处理等措施，和严格把好引种关以及疫苗接种，都是良好且有效的猪圆环病防治措施。

（2）通过对昌宁县部分猪场猪圆环病ELISA抗体检测和PCR抗原检测，显示猪圆环病免疫保护率为68.89%，带毒率或者感染率为4.99%。崔亚兰等［4］收集2007至2011年贵州省9个市（州）不同饲养规模（养猪户）及屠宰场未免疫猪血清样本共4980头份，2011年19个猪场（屠宰场）存在的可疑病料有133份，分别采用ELISA及PCR方法对PCV2抗体及抗原进行检测。证明，猪圆环病是可以通过合理的防治及防控操作和有效的免疫程序将感染率降低。鲁富有等［5］对普洱市猪圆环病2型的血清学调查采自10县（区）103个乡（镇）30个规模养猪场1430户散养户的3379头份猪血清样品，采用ELISA方法进行猪圆环病毒-2型血清学调查。结果显示，普洱市10县（区）阳性感染率从2005年的10.12% 逐年上升至2013年的67.66%。说明昌宁县的种猪猪圆环病的阳性率高于普洱市的，需要进行防控，进一步防治猪圆环病，降低患病率。肖俊等［6］为了解楚雄州猪圆环病毒病流行情况，采用ELISA 方法对采自楚雄州9县1市规模化猪场及散养户猪只血清共362份，进行猪圆环病毒2型感染的血清流行病学调查。结果表明：共检出阳性有347份，阳性率为95.86%。其中采自规模猪场的222份样品中，阳性有210份，阳性率为94.56%；农户散养户140份样品，阳性有137份，阳性率为97.86%。说明昌宁县猪圆环病得到有效的防控，可以通过免疫降低患病率。

（3）本次试验结果表明，种母猪的感染率为6.1.%；种公猪的感染率为4.93%，同时种公猪的抗体保护率也高于母猪的抗体保护率，进一步表明，对于猪圆环病种母猪比种公猪更为易感。进行疫苗的家数患病少，不进行疫苗的基本患病。所以猪场应该定期进行疫苗，进行免疫接种，防止猪圆环病2型的发生。王一平等［7］研究PCV-2疫苗的特性和免疫效力，并对近年来有关PCV-2活载体疫苗、核酸疫苗及标记疫苗等新型疫苗的研究进展进行综述，以防止猪圆环病毒2型的发生。

（4）PCV-2 的感染及引起疾病已经成为全球养猪产业的一大问题，这是继猪繁殖与呼吸综合征之后出现的又一重大养猪业的疾病。欧美等国至今对PCV-2 感染的控制仍是束手无策普遍采取的策略是控制继发感染，所以，对猪圆环病的控制不仅应在做好猪场的卫生消毒工作、应激因素的降低或避免、饲养管理水平的提高和改善断奶仔猪的营养水平的基础上，还要重点采取药物预防方案控制如猪副嗜血杆菌、猪传染性胸膜肺炎放线杆菌、猪链球菌等其他病原菌的继发感染，最大限度地降低猪群的死亡率，减少经济损失。

4　结论

结果说明，猪圆环病毒病在昌宁县已局部控制住流行态势，建议猪场及时免疫疫苗，并对种猪群定期监测和检测等防预措施。定期进行疫苗防控，并且保证畜舍卫生，如定期灭鼠、驱赶苍蝇蚊虫等等，逐步减少疫病的发生，再进一步防控疫病。

参考文献

［1］ 陈薄言，王川庆.兽医传染病学（第五版）［M］.中国农业出版社，2015：231-233.

［2］ 李海超，王娟，李一经，等.八省份猪群猪圆环病毒2型与猪细环病毒混合感染的调查［J］.中国兽医科学，2013，43（12）：1313-1320.

［3］ 黎发金，诸云本，周剑敏.等猪圆环病毒病的危害及防控对策［J］.现代农业科技，2014，（18）：259-266.

［4］ 崔亚兰，王开功，张华，等.2007-2010年贵州省猪圆环病毒感染的流行病学调查［J］.畜牧与兽医，2013，45（3）：70-73.

［5］ 鲁富有，彭海生，解明华，等.普洱市猪圆环病毒-2型的血清学调查与分析［J］.上海畜牧兽医通讯，2015，（1）：53-57.