单笼与群居饲养对雌性食蟹猴生理指标的影响

李 伟, 金 益, 柏 熊, 王晓东, 邢正弘, 王校权

(1. 上海西普尔-必凯实验动物有限公司, 上海 201203; 2. 上海实验动物研究中心, 上海 201203; 3. 上海本庄生物科技有限公司, 上海 201403)

单笼与群居饲养对雌性食蟹猴生理指标的影响

李 伟1,2, 金 益1,2, 柏 熊1,2, 王晓东1,2, 邢正弘1,2, 王校权3

(1. 上海西普尔-必凯实验动物有限公司, 上海 201203; 2. 上海实验动物研究中心, 上海 201203; 3. 上海本庄生物科技有限公司, 上海 201403)

目的 了解单笼与群居饲养雌性食蟹猴生理指标的差异。方法 选取9只4～6岁雌性食蟹猴作为实验对象，前5个月单笼饲养，后5个月群居饲养。对体质量、体温、血常规、血生化、尿常规等生理指标进行测定。采用重复测量方差分析比较两阶段指标是否存在差异。结果 食蟹猴单笼阶段的体质量显著低于群居阶段(P＜0.05)。血常规中，单笼阶段的白细胞计数(WBC)、嗜中性粒细胞计数(NEUT)、嗜中性粒细胞百分比(NEUT%)极显著高于群居阶段(P＜0.01); 单笼阶段的单核细胞计数(MONO)、单核细胞百分比(MONO%)极显著低于群居阶段(P＜0.01); 单笼阶段的淋巴细胞百分比(LYMPH%)显著低于群居阶段(P＜0.05)。血液生化中，单笼阶段的总胆红素(TBIL)极显著低于群居阶段(P＜0.01); 单笼阶段的天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、甘油三酯(TG)显著高于群居阶段(P＜0.05)。单笼阶段的尿常规中的蛋白质阳性率高于群居阶段，组间相比差异显著(P＜0.05)。其余指标组间相比无统计学差异。结论 食蟹猴更适合群居饲养，如果长期单笼饲养，可能对其体质量及血液学和尿常规中某些指标产生较大影响。

食蟹猴; 雌性; 生理指标; 血液学; 尿常规

食蟹猴(Macaca fascicularis)具有许多与人类相似的生物学特性，并且饲养繁殖相对简单，被广泛应用于医学生物学研究中。特别是在基因工程、生物制剂等药物的毒理试验中，食蟹猴作为人类的“替身”，是不可缺少的试验支撑条件。此外，在一些人类重大传染病的研究，如艾滋病以及肝炎的防治研究，食蟹猴作为非人灵长类动物更是不可缺少的实验动物[1]。

本研究初步探讨了单笼饲养与群养雌性食蟹猴对其生理指标的影响，以便建立更为合理的饲养管理模式，在保证动物福利的基础上，为医学实验研究提供健康、可靠的实验动物奠定一定的基础。

1 材料与方法

1.1 实验动物

4～6岁普通级雌性食蟹猴9只, 购于海南金港生物技术股份有限公司[SCXK(琼)2010-0001]，体质量3～5 kg, 以1～9号不锈钢彩色颈牌进行编号识别。

1.2 饲养条件

群居饲养于环境开放的, 有憩息架、秋千、岩洞等设施的露天阳光棚, 其规格为10 m×4.2 m× 3.5 m, 单笼饲养于不锈钢笼具内, 笼具规格65 cm× 70 cm×80 cm，笼具安置在环境开放的露天阳光棚里。温度26 ℃左右，相对湿度40%～70%。饲喂全价猴专用饲料, 定时加喂水果, 饮水经煮沸灭菌。单笼适应性饲养2个月后开始试验[SYXK(沪) 2009-0081], 前5个月单笼饲养, 后5个月群居饲养。

1.3 检测仪器

常用电子体重秤(感量0.1 kg), 华佗佳人PG-900电子体温计，日本Sysmex xt-2000i全自动血液分析仪，Thermo-legend RT+冷冻离心机，日立-7180型全自动生化分析仪，Uritest 500B尿分析仪。

1.4 测定方法

本实验所有指标均为隔夜禁食16 h后在每月中旬某日上午测量，单笼与群居阶段各连续测量5个月数据。

1.4.1 体质量的测定 用放置在坚实的水平地面的电子体重秤进行称量, 先称量人重量, 再将食蟹猴抓出, 人与猴一同站上电子体重秤，获得人与猴的总重量，以总重量减去人重量得到食蟹猴的体质量。

1.4.2 体温的测定 在室温下，把动物用手固定后，动物在相对比较安静的情况下，用电子体温计测直肠温度(温度计在直肠内放置约60 s)，直至“℃”闪烁停止即记录体温[2]。

1.4.3 血常规指标测定 上肢静脉采血1 mL, 全血用EDTA-K2抗凝，采集后的血液在碎冰中保存，全自动血液分析仪测试如下项目: 红细胞数(RBC)、血红蛋白浓度(HGB)、红细胞压积(HCT)、平均红细胞体积(MCV)、平均血红蛋白(MCH)、平均血红蛋白浓度(MCHC)、血小板总数(PLT)、血小板平均体积（MPV）、血小板比容(PCT)、白细胞数(WBC)、淋巴细胞数(LYMPH)、单核细胞数(MONO)、嗜中性粒细胞数(NEUT)、嗜酸粒细胞数(EO)、嗜碱粒细胞数(BASO)、淋巴细胞百分率(LYMPH%)、单核细胞百分率(MONO%)、嗜中性粒细胞数百分率(NEUT%)、嗜酸粒细胞百分率(EO%)、嗜碱粒细胞百分率(BASO%)。

1.4.4 血生化指标测定 用促凝剂真空采血管采集血液，采血量为1 mL，采集后的血液置于碎冰中保存。用Thermo-legend RT+冷冻离心机2 500 g，4 ℃，离心15 min，分离血清，用全自动生化分析仪测定如下项目: 天门冬氨酸转氨酶(AST)、丙氨酸转氨酶(ALT)、碱性磷酸酶(ALP)、总胆固醇(CHOI)、总胆红素(T-BIL)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、钠离子(Na+)、钾离子(K+)、钙离子(Ca2+)、甘油三脂(TG)、磷(P)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)、肌酐(CREA)、血糖(GLU)、胆碱酯酶(CHE)。

1.4.5 尿常规异常情况检查 测定当日清晨将洁净干燥的托盘放置在猴笼下方，用一次性5 mL注射器收集猴尿液，放置于已编号的15 mL离心管中。尿分析仪及配套试纸测定如下指标，判定异常标准见标注: pH值、相对比重(SG)、隐血(BLD，≥10细胞/μL)、酮体(KET，≥0.5 mmol/L)、尿糖(GLU，≥0 mmol/L)、尿蛋白(PRO, ≥0.15 g/L)、尿胆红素(BIL, ≥8.6 μmol/L)、尿胆原(URO，≥33 μmol/L)、亚硝酸盐(NIT, 测定结果为“+”)、白细胞计数(WBC，≥15细胞/μL)、维生素C (≥0.6 mmol/L)。

1.5 统计学方法

2 结果

2.1 体质量、体温

群居饲养的体质量均值明显高于单笼饲养。体温的组间差异不显著(表1)。

表1 雌性食蟹猴体质量、体温测量值

2.2 血液指标

血常规中，单笼阶段的W B C、N E U T、NEUT%极显著高于群居阶段(P＜0.01); 单笼阶段的MONO、MONO%极显著低于群居阶段(P＜0.01);单笼阶段的LYMPH%显著低于群居阶段(P＜0.05)。血液生化中，单笼阶段的TBIL极显著低于群居阶段(P＜0.01); 单笼阶段的AST、TG显著高于群居阶段(P＜0.05)(表2)。

2.3 尿常规异常情况

单笼阶段的尿蛋白质阳性较多。其余指标无显著差异(表3)。

表2 雌性食蟹猴血常规、血生化变化值

表3 雌性食蟹猴尿常规测定值

3 讨论

实验表明, 单笼饲养的食蟹猴体质量持续下降,在单笼饲养的第5个月降到最低，均值为3.4 kg; 群居饲养后，体质量立即回升，在群居饲养第1个月均值就上升到4 kg，其后略有升高后企稳。经验表明，成年食蟹猴的体质量会随着时间缓慢增加，但在半年内变化幅度不大。本实验的结果说明饲养环境对其体质量有影响，并且单笼饲养的5个月中体质量变化的幅度比群居的明显，这说明单笼饲养造成的体质量下降快，幅度大。

关于食蟹猴的血液生理和生化值已有较多报道，但大多没有特别关注研究对象是单笼还是群居饲养[3-8]。本文探讨了单笼饲养与群养对食蟹猴的血液生理和血液生化是否产生不同影响。结果表明，单笼饲养的食蟹猴血常规和血生化值与已报道的文献值基本一致，群居的则存在某些不同。血常规中的白细胞、中性粒细胞计数，单笼饲养阶段的测量值比群居饲养的显著升高。林健等对雌性SD大鼠进行单笼与群居的实验，结果显示单笼组白细胞、中性细胞计数高于群养组，与本实验中雌性食蟹猴的表现一致，虽物种不同，但结果类似[9]。血生化中的AST、TG，单笼饲养阶段的测量值比群居饲养的显著升高。TBIL单笼饲养阶段的测量值比群居饲养的显著降低。尿常规中的蛋白质单笼饲养阶段的测量值比群居饲养的显著升高，单笼饲养的尿蛋白阳性较多，说明长期单笼饲养可能导致肾脏损伤，而群居后尿蛋白基本正常，说明本实验中该损伤是可修复的。从以上结果可以看出，食蟹猴在单笼和群居的不同饲养条件下，在体质量和部分血常规、血生化、尿常规的指标上存在差异。这些差异应当引起关注。

本实验的群居阶段通过使食蟹猴饲养房间内增设憩息架、秋千、假山、岩洞等设施使环境更加丰富，使猴群生活的环境有更多的趣味，让食蟹猴在其中生活展现更多的自然习性，满足食蟹猴娱乐、躲避惊吓和运动的需求。这样既可以确保实验动物健康，满足其生活习性，也可以为科学实验提供更可靠、更稳定、更接近正常反应的实验数据。但在实际操作中，日常的人工饲养繁殖可以采用群养，而在动物实验时却因各种实验要求难以群养。因此，单笼饲养时，应尽可能采用足够大的笼具及其相关的福利设施(如，动物玩具、采食器及方式、大自然的音乐、录像等)提高食蟹猴的福利，减少因低福利对其生长发育、生理生化指标的影响[10]。

[1] 田朝阳, 杨守凯. 非人灵长类动物在医学科学实验中的应用[J]. 中国比较医学杂志, 2009, 19(6):74-77.

[2] 韦祝梅, 黄俊华, 陈健东, 等. 食蟹猴体温、呼吸率、血压值和脉搏数的测定[J]. 广西畜牧兽医, 2009, 25(5):265-266.

[3] Schuurman HJ,Smith HT.Reference values for clinical chemistry and clinical hematology parameters in cynomolgus monkeys[J].Xenotransplantation, 2005, 12(1):72-75.

[4] 刘仕刚, 谢亮华. 东地区人工饲养食蟹猴血液常规和血清生化值的测定[J]. 实验动物科学, 2012, 29(2):34-37.

[5] Bonfanti U, Lamparelli D,Colombo P, et al.Hematologyand serum chemistry parametersin juvenile cynomolgus monkeys (Macaca fascicularis) of Mauritius origin: comparison between purpose-bred and captured animals [J]. J Med Primatol, 2009, 38(4):228-235.

[6] Wang H, Niu YY, Si W, et al. Reference data of clinical chemistry,haematology and blood coagulation parameters in juvenile cynomolgus monkeys (Macaca fascicularis)[J]. Vet Med, 2012, 57(5):233-238.

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[8] 石巧娟, 初明明, 田朝阳, 等. 人工饲养食蟹猴血液常规和生化指标测定[J]. 实验动物与比较医学, 2012, 32(4):344-347.

[9] 林健, 黄宗锈, 陈冠敏, 等. 单笼与合笼饲养大鼠血液生理及生化指标差异的比较[J].中国卫生检验杂志, 2015, 25 (17):2869-2871.

[10] 高建峰, 滕利, 郭铭, 等. 环境丰容对长期单笼圈养食蟹猴行为的影响[J]. 四川动物, 2016, 2,243-248.

Comparison on Effects of Single Caged and Social Group on Physiological Indexes of Female Macaca Fascicularis

LI Wei1,2, JIN Yi1,2, BAI Xiong1,2, WANG Xiao-dong1,2, XING Zheng-hong1,2, WANG Xiao-quan3
(1. Sino-British SIPPR/BK Laboratory Animal LTD., Co, Shanghai 201203, China; 2. Shanghai Laboratory Animal Research Center,Shanghai 201203, China; 3. Shanghai Benzhuang Bioscience LTD., Co, Shnaghai 201403, China)

ObjectiveTo understand the differences on physiological indexes of single caged and social group female macaca fascicularis.MethodsNine female cynomolgus monkeys at the age of 4-6 years old were singly raised in cage at the first 5 months,and group raised in next 5 months.The body weight, body temperature, blood routine, urine routine, blood biochemistry were measured in single caged rearing and group breeding, repeated measures analysis of variance was used to compare whether there were differences between the two stages.ResultsBody weight in single caged stage was significantly lower than that in group phase (P＜0.05). In blood routine, white blood cell count (WBC), neutrophil count (NEUT), neutrophil percentage (NEUT%) in single caged stage were significantly higher than that in group stage (P＜0.01); monocyte count (MONO), the percentage of mononuclear cells (MONO%) in single caged stage were significantly lower than that in group stage (P＜0.01); lymphocyte percentage(LYMPH%) in single caged stage was significantly lower than that in group stage (P＜0.05). In blood biochemistry, total bilirubin(TBIL) in single caged stage was significantly lower than that in group stage (P＜0.01); aspartic acid amino transferase (AST), triglyceride (TG) in single caged stage were significantly higher than that in group stage (P＜0.05). The positive rate of urine protein in single caged stage is higher than that in the group stage(P＜0.05). Other indexes between the groups had no statistical difference.ConclusionThe macaca fascicularis was more suitable for the breeding of group, if the long-term single caged feeding, it could have a greater impact on body weight, hematology and urine routine of some indicators.

Macaca fascicularis; Female; Physiological index; Hematology; Urine routine

Q95-33

A

1674-5817(2016)05-0369-05

10.3969/j.issn.1674-5817.2016.05.009

2016-02-18

上海市科委实验动物研究专项(13140901200)

李 伟(1980-),男,助理研究员。

E-mail: tianshixz@126.com

邢正弘, E-mail: zhxing57@163.com