由肠道致病菌污染饮用水引起的腹泻事件

●甘映群

由肠道致病菌污染饮用水引起的腹泻事件

●甘映群

2015年11月上旬，我县石塘镇石塘糖厂连续一个月出现两百多名腹泻病人，我中心即派出人员到现场进行调查防治。在流行病学追踪传染源中，针对患者无年龄、性别、工种之分，我检验科对饮用水的水样及腹泻大便进行了病原学的分离鉴定实验。确定出现腹泻人群是由于饮用水被伤寒沙门氏菌污染引起的。现报告如下：

1 流行病学调查

1.1 中毒发生经过

2015年11月3 日上午十点半，，该糖厂近10人因腹痛腹泻到厂卫生室看医生。横县疾病预防控制中心接到厂卫生室请求，要求前往石塘镇石塘糖厂，近一个月多以来，已断断续续出现两百多名腹泻患者就医，这两百多名腹泻患者无年龄、性别、工种之分，针对这种情况，依照流行病的特征，采取流行病学的方法开展调查，对腹泻病人大便、糖厂饮用水进行肠道致病菌实验室检验。

1.2 现场调查

2015年11月3 日上午，该糖厂厂区环境卫生良好，空气清新，无垃圾乱堆放蚊虫苍蝇乱飞的现象。厂食堂环境卫生干净整齐，从业人员均按照卫生标准要求，每年度通过健康体检，符合食品卫生法的要求。水源为抽取的地下水，水源的周围是池塘、溪水，农田，饮用水是通过地下水抽取到水塔，经沉淀澄清后供应，往年每季度的卫生检测抽查工作中，饮用水中的微生物指标细菌总数和大肠菌群数均符合饮用水卫生指标。

2 临床表现

这两百多名腹泻的患者，无性别、工种之分，年龄不等，各年龄段均有发生，最小4岁，最大63岁，大多数患者初感腹中不适，一天2次黄绿色水样便，后次数增加便变稀、隐隐腹痛、全身乏力，低烧等病状，有少数一天腹泻6、7次，有恶心、呕吐、畏寒等症状，有的经过服用几天的抗生素等治疗，可以痊愈一个星期左右，但之后会又反复出现便变稀、腹痛等腹中不适的病状。

3 实验室检验

分别采样腹泻病人大便、糖厂饮用水，进行肠道致病菌实验室检验。

3.1 水样前增菌

用无菌瓶采集400ml水样三份，各吸取20ml水样放入盛有225ml缓冲蛋白胨水的无菌均质杯中，于37℃培养18h.

3.2 增菌

轻轻摇动培养过的样品混合物，各移取1ml，转种于10ml四硫磺酸钠煌绿增菌液内，经过42℃培养24h。同时，另取1ml，转种于10ml亚硒酸盐胱氨酸增菌液内，于37℃培养24h。

3.3 水样的病原学分离

分别用接种环取增菌液1环，划线接种于一个亚硫酸铋（BS）琼脂平板和一个木糖赖氨酸脱氧胆盐（XLD）琼脂平板，于36±1℃分别培养24h或48h,观察各个平板上生长的菌落。

3.4 生化鉴定

自BS琼脂上挑取菌落为黑色有金属光泽，菌落周围培养基有显棕色的可疑菌落和自XLD琼脂上挑取菌落粉红色，带黑色中心的可疑菌落。分别接种三糖铁琼脂，，先在斜面划线，再于底层穿刺，于36±1℃培养24h。在产酸、产气、产硫化氢，产碱变红斜面上，挑取菌苔作下列实验，按《肠杆菌科细菌生化鉴定编码手册》接种，11种生化结果：硫化氢+丙氨酸-尿素-侧金盏花-山梨醇+丙二酸钠-赖氨酸-鸟氨酸+靛基质-VP-枸橼酸盐+注：赖氨酸、鸟氨酸均作对照实验，检索编码手册2131，得到鉴定结果为伤寒沙门氏菌，符合机率0.7894，鉴定值100%。

3.5 血清学分型鉴定

挑取菌苔。被A-F多价血清凝集（+++）后，依次O2、O3、O7、O9和O11因子血清作凝集，试验结果被O9凝集（+++），判定D群。再用H洗源，第一相d因子血清凝集（+++）。按照《考夫梦伤寒沙门氏菌属抗原表解》报告分离出的病原菌是伤寒沙门氏菌。

3.6 腹泻病人大便的病原学分离

我们对患者50人采用肛拭取便，按常规肠道致病菌增菌后，与水样的化学及血清学实验方法一样进行病原学分离。从26人大便中分离培养出伤寒沙门氏菌。结果如下表：

检查人数年龄 分离出伤寒沙门氏菌人数 备注4岁-12岁12人 6人50第二次大便28岁-63岁38人 20人

通过病原学分离，诊断血清鉴定实验，生化实验，水样与患者大便分离伤寒沙门氏菌的生化特性相同，抗原结构相同，属同型伤寒沙门氏菌。

4 讨论

（1）沙门氏菌是一种常见的食源性肠道致病菌，但是目前饮用水的国家卫生标准里，饮用水中的微生物指标只有细菌总数和大肠菌群数指标作为日常卫生检测，没有把肠道致病菌纳入饮用水卫生指标中。而在自然环境中，肠道致病菌普遍存在，很容易造成污染周围环境，在受到粪便污染的水中，沙门氏菌是可存活1-2个月，沙门氏菌在正常温度的水中不易繁殖，但可生存2-3周。由于糖厂水源地的周围为池塘、溪水、农田，有鸡、鸭、牛、人的粪便污染，再加上此时正值夏秋季节，天气热，沙门氏菌最适繁殖温度为37℃，在20℃以上即能大量繁殖，同时天气热，人们胃肠道屏障功能减弱，抵抗力降低，饮用的水没有经过漂白粉消毒，而是浑水经沉淀澄清后供应的，所以致使沙门氏菌污染了饮用的水，引起了连续一个月出现两百多名腹泻病人的腹痛事件。

（2）该糖厂连续一个月出现两百多名的腹泻病人，均饮用糖厂供应的饮用水，发病时间集中，从患者粪便及饮用水中均检出沙门氏菌，经过一个疗程的抗生素等治疗，患者全部痊愈。通过病原学分离、鉴定、血清学实验、生化实验，所有结果充分说明引起本次病人腹泻的病原菌是伤寒沙门氏菌，其传染源来自水源，被水源周围的污水污染。因此，可以判定本次腹泻事件是由伤寒沙门氏菌污染水源所造成糖厂两百多名职工家属的腹泻现象，从这个事件，是否可以增加饮用水的国家卫生标准中的微生物指标，把肠道致病菌指标作为饮用水日常卫生检测，纳入卫生指标中，值得探讨。

（作者单位：横县疾病预防控制中心检验科）

[1]何晓青.卫生防疫细菌检验[M].北京：新华出版社，1989.

[2]浙江省军区后勤部卫生检验所.肠杆菌科细菌生化鉴定编码手册[M].浙江：浙江省防疫教研所，1997.

[3]中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局.GB4789.4-2010

[4]食品卫生检验方法微生物部分[S].北京：中国标准出版社,2010.