丙泊酚与七氟醚麻醉对围手术期患者外周血辅助性T淋巴细胞分化的对比研究

阮振华， 陈　诚， 钱　沂， 沙夕林

1.江苏省如皋市人民医院麻醉科，如皋　226500 2.江苏省如皋市人民医院骨科，如皋　226500 3.江苏省如皋市人民医院感染管理科，如皋　226500 4.江苏省如皋市人民医院胸外科，如皋　226500



·论著·

丙泊酚与七氟醚麻醉对围手术期患者外周血辅助性T淋巴细胞分化的对比研究

阮振华1， 陈诚2， 钱沂3， 沙夕林4*

1.江苏省如皋市人民医院麻醉科，如皋226500 2.江苏省如皋市人民医院骨科，如皋226500 3.江苏省如皋市人民医院感染管理科，如皋226500 4.江苏省如皋市人民医院胸外科，如皋226500

[摘要]目的： 探讨丙泊酚与七氟醚麻醉下辅助性T淋巴细胞(helper T lymphocytes，Th)分化的差异性。方法： 选择2010年10月—2015年1月择期行腰椎间盘突出症手术患者60例，随机分为丙泊酚全凭静脉麻醉组(丙泊酚麻醉组)和七氟醚吸入麻醉组(七氟醚麻醉组)，各30例。所有患者行无创血压、心率、脉搏血氧饱和度、呼气末二氧化碳分压监测。于麻醉前、麻醉后、手术开始前、手术开始后、术后1 d采集外周静脉血，检测各组患者T细胞对γ-干扰素、白细胞介素4的表达，测定外周静脉血中Th1细胞与Th2细胞的百分率，及Th1细胞与Th2细胞的比值。结果： 2组患者无创血压、心率、脉搏血氧饱和度、呼气末二氧化碳分压差异均无统计学意义。丙泊酚麻醉组患者术后1 d外周静脉血Th1细胞百分率明显高于七氟醚麻醉组，差异有统计学意义(P<0.05)；2组患者不同时间点外周静脉血Th2细胞百分率差异均无统计学意义；丙泊酚麻醉组患者术后1 d外周静脉血Th1细胞与Th2细胞比值高于七氟醚麻醉组，差异有统计学意义(P<0.05)。结论： 与七氟醚相比，丙泊酚能够促进Th细胞向Th1细胞分化，对围手术期患者具有一定的免疫保护作用。

[关键词]辅助性T淋巴细胞；分化；麻醉；丙泊酚；七氟醚

围手术期免疫功能的变化对手术患者的预后有着重要的影响。麻醉可以通过降低创伤手术的应激反应，间接影响机体的免疫功能；而麻醉药物也作为一种异物或抗原直接作用于机体的免疫活性细胞，从而使患者机体免疫功能发生改变。手术应激增加了辅助性T淋巴细胞2(helper T lymphocyte 2，Th2)的分化，减少了辅助性T淋巴细胞1(helper T lymphocyte 1，Th1)的分化，从而使Th1/Th2的比例下降，细胞免疫功能受到抑制，不利于患者康复。不同的麻醉方法对应激反应的控制不同[1]，因此，对免疫功能的影响也不同。丙泊酚全凭静脉麻醉是近年来应用较多的麻醉方法。本研究通过观察丙泊酚全凭静脉麻醉对辅助性T淋巴细胞(helper T lymphocyte，Th)分化功能的影响，并与七氟醚吸入麻醉比较，以探讨丙泊酚全凭静脉麻醉对围手术期患者免疫功能的影响。

1资料与方法

1.1一般资料选择2010年10月—2015年1月在江苏省如皋市人民医院择期行腰椎间盘突出症手术患者60例，美国麻醉医师协会(American Society of Anesthesiologists，ASA)分级Ⅰ级。将患者随机分为丙泊酚全凭静脉麻醉组(丙泊酚麻醉组)和七氟醚吸入麻醉组(七氟醚麻醉组)，各30例。丙泊酚麻醉组男性18例，女性12例，年龄25～60岁，中位年龄55岁；七氟醚麻醉组男性18例，女性12例，年龄25～60岁，中位年龄56岁。患者术前均无麻醉前用药，术前无严重的心、肺、肝、肾、脑等系统性疾病，无感染、肿瘤及免疫系统等疾病，近期无输血史，未接受免疫制剂治疗。本研究经江苏省如皋市人民医院医学伦理委员会批准，并与患者签署知情同意书。

1.2麻醉方法丙泊酚麻醉组采用丙泊酚靶控输注5 μg/mL，静脉注射舒芬太尼(0.7 μg/kg)、苯磺酸顺式阿曲库铵(0.2 mg/kg)进行麻醉诱导；麻醉维持采用丙泊酚靶控输注4 μg/mL及间断静脉注射舒芬太尼、苯磺酸顺式阿曲库铵。七氟醚麻醉组吸入七氟醚及静脉注射舒芬太尼(0.7 μg/kg)、苯磺酸顺式阿曲库铵(0.2 mg/kg)进行麻醉诱导，麻醉维持采用吸入七氟醚及间断静脉注射舒芬太尼、苯磺酸顺式阿曲库铵。2组舒芬太尼、苯磺酸顺式阿曲库铵的量按照脑电双频指数(bispectral index，BIS)值进行调整，舒芬太尼每次追加量0.3 μg/kg，苯磺酸顺式阿曲库铵每次追加量0.03 mg/kg， 使BIS值维持在50～60。

1.3患者一般情况监测患者手术期间均行无创血压、心率、脉搏血氧饱和度、呼气末二氧化碳分压监测。

1.4免疫指标测定分别于麻醉前(T1)、麻醉后(T2)、手术开始前(T3)、手术开始后(T4)、术后1 d(T5)5个时间点采集外周静脉血5 mL，加肝素抗凝，取1 mL经无血清RPMI 1640培养液以等体积稀释后加PMA及钙离子通道激活剂，于37℃、5%CO2温箱中孵育4 h后，加入藻红蛋白(PE)标记的抗人CD3单克隆抗体(北京同立海源生物科技有限公司)及抗人CD8单克隆抗体(北京同立海源生物科技有限公司)，避光室温孵育30 min，磷酸盐缓冲液(phosphate buffered saline，PBS)清洗2遍后，以1 000 r/min离心5 min，加入红细胞裂解液作用15 min后，用PBS清洗2次，加入PE标记的抗γ-干扰素(interferon-γ，IFN-γ)抗体(美国Sigma公司)及异硫氰酸荧光素标记的抗白细胞介素-4(interleukin-4，IL-4)抗体(美国Sigma公司)，室温孵育30 min后，PBS清洗、重悬后上机检测。以CD3+CD8-IFN-γ+标识Th1细胞，以CD3+CD8-IL-4+标识Th2细胞，计算Th1细胞和Th2细胞所占的百分比，重复检测5次，并计算Th1细胞与Th2细胞的比值。

2结果

2.12组患者一般情况2组患者围手术期血压、心率、脉搏血氧饱和度、呼气末二氧化碳分压比较，差异均无统计学意义。

2.2Th1细胞与Th2细胞百分比及其比值的比较丙泊酚麻醉组患者T5时间点外周静脉血Th1细胞百分比高于七氟醚麻醉组，差异有统计学意义(P<0.05)；2组患者T1～T5时间点外周静脉血Th2细胞百分比差异均无统计学意义；丙泊酚麻醉组患者T5时间点外周静脉血Th1细胞与Th2细胞比值与七氟醚麻醉组比较，差异有统计学意义(P<0.05)，具体数据见表1。

表1　2组患者不同时间点Th1细胞、Th2细胞百分比及Th1细胞与Th2细胞比值的比较 　n=30,

*P<0.05与七氟醚麻醉组比较

3讨论

围手术期免疫功能的变化对外科手术患者的预后有非常重要的影响[2]。外科手术后患者的脓毒血症以及继发的多器官功能障碍综合征，是外科重症监护病房所面临的棘手问题，也是术后患者的主要死亡原因之一[3]。另外，麻醉药物作为一种异物直接作用于患者机体的免疫活性细胞，从而改变了患者的免疫功能。

丙泊酚全凭静脉麻醉和七氟醚吸入麻醉是临床常用的2种全身麻醉方式。丙泊酚起效时间快，而维持时间短，持续输注也无明显蓄积，具有苏醒快而完全，不良反应小等优点，目前广泛应用于临床。丙泊酚对机体免疫系统的调节作用十分复杂。需要指出的是，T淋巴细胞是介导特异性免疫的细胞，活化机制已经成为免疫学研究的热点[4]。CD4+T细胞又称Th细胞，该细胞的表型为CD3+CD4+CD8-，是一种十分受人关注的机体免疫效应细胞。Th细胞在特异性抗原的刺激或在其他细胞因子的作用下会分化成Th1和Th2细胞。Th1、Th2细胞的极化问题是目前研究的热点。患者麻醉后发生的Th1/Th2失衡问题也已受到人们的关注。本研究发现，丙泊酚能增加Th1细胞的百分比，但对于Th2细胞方向分化影响却不明显，结果导致Th1细胞/Th2细胞比值的增大，说明丙泊酚影响Th细胞的分化，并且促使其向Th1方向分化，最终诱发Th2极化效应，机体的这种细胞效应维护了围手术期的免疫功能平衡。Th细胞被激活的信号转导机制比较复杂，目前丙泊酚影响Th细胞分化作用的机制尚不清楚。

麻醉药物能够作为异物或抗原影响患者机体的免疫功能，所以麻醉药物的合理选择对患者免疫功能的维持具有重要的意义。本研究证明，丙泊酚较七氟醚能促进Th细胞向Th1方向分化，对患者的免疫功能具有保护作用。

参考文献

[1]Kalajdzija M,Cero I,Prnjavorac B,et al.Influence of clonidine on the hemodynamic stability and stress response in the course of surgery on general anesthesia[J].Med Arh,2011,65(4):210-212.

[2]毕振华,任波,董刚,等.丙泊酚联合瑞芬太尼麻醉肝硬化患者围手术期免疫功能的观察[J].临床麻醉学杂志,2013,29(3):232-234.

[3]Mariappan P,Smith G,Moussa SA,et al.One week of ciprofloxacin before percutaneous nephrolithotomy significantly reduces upper tract infection and urosepsis:a prospective controlled study[J].BJU Int,2006,98(5):1075-1079.

[4]姜曼,许桂莲,黎万玲,等.脱脂棉及尼龙棉柱分离纯化T淋巴细胞的比较研究 [J] .免疫学杂志,2003,19(4):309-311.

[本文编辑]姬静芳

Comparsion of propofol anesthesia and sevoflurance anesthesia on differentiation of peripheral helper T lymphocytes in perioperative patients

RUAN Zhen-hua1, CHEN Cheng2, QIAN Yi3, SHA Xi-lin4*

1.Department of Anesthesiology, Rugao People’s Hospital, Rugao 226500, Jiangsu, China 2.Department of Orthopedics, Rugao People’s Hospital, Rugao 226500, Jiangsu, China 3.Department of Hospital Infection Management, Rugao People’s Hospital, Rugao 226500, Jiangsu, China 4.Department of Thoracic Surgery, Rugao People’s Hospital, Rugao 226500, Jiangsu, China

[Abstract]Objective： To study the difference regarding differentiation of helper T lymphocytes(Th) between propofol anesthesia and sevoflurance anesthesia.Methods： A total of 60 patients, who received selective lumbar disc herniation surgery during Oct. 2010 and Jan. 2015, were selected and divided into two groups randomly, the propofol group which received total intravenous anesthesia with propofol and the sevoflurance group which received inhalation anesthesia with sevoflurance, with 30 cases in each. The non-invasive blood pressure,heart rate,pulse oxygen saturation,and end-tidal carbon dioxide partial pressure were monitored in all patients.Peripheral venous blood was sampled before and after anesthesia,before and after surgery,and one-day after surgery,respectively.The T cell expression on interferon-γ and interleukin-4, the percentage of Th1 cell and Th2 cell in peripheral blood, and the ratio between Th1 cell and Th2 cell were evaluated in each group.Results： There was no significant difference between the two groups regarding the non-invasive blood pressure,heart rate,pulse oxygen saturation,and end-tidal carbon dioxide partial pressure. The percentage of Th1 cell in peripheral blood in propofol group was significantly higher than that in sevoflurance group one-day after surgery(P<0.05).There was no significant difference regarding the percentage of Th2 cell in peripheral blood between the two groups at different time point. The ratio between Th1 cell and Th2 cell in peripheral blood in propofol group was significantly higher than that in sevoflurance group one-day after surgery (P<0.05).Conclusions： Compared with sevoflurance,propofol can preferably promote Th cell to differentiate into Th1 cell.Propofol may therefore have immunoprotective effect for patients during perioperative period.

[Key Words]helper T iymphocytes; differentiation; anesthesia; propofol; sevoflurance

[中图分类号]R 614.1

[文献标志码]A

[作者简介]阮振华，主治医师.E-mail: jsntrzh@163.com*通信作者(Corresponding author).Tel: 0513-87312708，E-mail: 464246774@qq.com

[收稿日期]2015-10-04[接受日期]2016-02-18