浅析进口饲料中沙门氏菌的分离与鉴定

汪霖

【摘要】动物性饲料很容易滋生繁殖细菌，从而引起饲料的腐败。在饲料的腐败过程中，不仅饲料的营养价值会降低，腐败引起的蛋白质分解往往会导致沙门氏菌的增长。本文将利用常规分离培养鉴定技术来检测进口饲料中沙门氏菌污染情况。

对饲料厂的饲料279份进行沙门氏菌的分离鉴定。共分离出沙门氏菌13株，分离率4.66%。其中配合饲料102份，分离2株，阳性率1.96%；浓缩饲料79份，分离5株，阳性率6.33%；鱼粉33份，分离6株，阳性率18.18%；乳清粉65份，分离0株，阳性率0%。最后对24株沙门氏菌进行鉴定。

【关键词】进口饲料；沙门氏菌；分离鉴定

沙门氏菌：沙门氏菌属是一种寄生于人类和动物肠道内，可以引起禽伤寒、猪霍乱、鼠伤寒沙门氏菌病、猪副伤寒、马流产沙门氏菌等疾病。它是一种需氧或兼性厌氧菌，适合的生长温度是35～37℃，但不耐热，55℃的温度下1h即可以被杀死。在外界的生活力很强，在粪便、土壤、食品中可以存活2个月，更久的能存活2年之久。它对人的致病原理是这样的，当沙门氏菌进入人体后，经淋巴系统进入血液，就会造成过性菌血症。随后沙门氏菌裂解释放出大量的毒素，人就会出现中毒症状。同时会引起不同的病理症状，比如肠热症，即伤寒和副伤寒，继而可发展成慢性带菌者；食物中毒，引起肠胃炎，症状如下：恶心、呕吐、腹泻、肚痛等；还可以引起慢性肠炎、败血症等疾病，危害极大。沙门氏菌的传播途径很广，食品在加工、运输、出售、烹饪、储存过程中被其感染的可能性很大。尤其是动物饲料中沙门氏菌的感染情况对全球的肉类加工厂都是很大的隐患。如何减少病菌的感染，成为重中之重。

研究方法：沙门氏菌的检测方法有很多，有传统的检测法、以抗体为基础的检测法、以核酸为基础的方法。每个方法各有各的特点，本文主要以传统的检测法来分离鉴定饲料中的沙门氏菌。

1、实验材料

1.1样品。配合饲料102份，浓缩饲料，79份鱼粉33份，乳清粉65份，每份样品均100g；1.2培养基。缓冲蛋白胨水前增菌培养基，氯化镁孔雀绿，亚西酸盐胱氨酸增菌液，琼脂，酚红煌绿琼脂。1.3生化试机。三糖铁培养基，微量管，赖氨酸脱羧酶微量管，尿素微量管，V-P和靛基质

2、实验方法

2、1前增菌 无菌称取25g进口饲料样品放入盛有225mL缓冲蛋白陈水的无菌试剂瓶中，搅拌均匀。在36摄氏度的环境下培养18小时。使那些“致伤”的细菌复苏及使所有微生物生长。2、2增菌 取前增菌液体0.1ml转种在15ml氯化镁孔雀绿肉汤内，在42摄氏度的环境下培养24小时。再取15ml转种在150ml亚酸盐胱氨酸增菌液中，36摄氏度培养24小时。2、3分离 用接种环取增菌液1环，分别划线接种在酚红煌绿琼平板、胆硫乳琼脂平板和科玛嘉显色培养基平板上。36摄氏度下培养24小时。然后对平板上肉眼可见的特征性菌落进行确认，并对该菌落分离物进行一系列生化和血清学检测，再观察各个平板上的菌落生长情况，做出鉴定。2、4生化试验 将纯化后的培养物穿刺接种在三糖铁培养基斜面上。典型的沙门氏菌培养物，斜面呈现红色，底部是黄色。当分离到乳糖阳性沙门氏菌，呈现黄色。并将培养物接种在L-赖氨酸脱羧、ONP、尿素微量鉴定管及V-P、靛基质培养基中，2、5血清学试验 取载玻片一片，在酒精灯上烧干冷却后，在玻璃片上滴一滴沙门氏菌血清，再用接种环挑取单个菌落，与血清研磨成悬液。最后得出如下结果，如表1：

沙门氏菌试验鉴定标准

2、6血清学鉴定

A-F多价血清菌体实验结果分类如下：阴性反应：混合物试验不凝集，在盐水对照中也不凝集。

结果与分析：共分离出沙门氏菌13株，分离率4.66%。其中配合饲料102份，分离2株，阳性率1.96%；浓缩饲料79份，分离5株，阳性率6.33%；鱼粉33份，分离6株，阳性率18.18%；乳清粉65份，分离0株，阳性率0%。如表2

进口饲料中沙门氏菌检测结果

根据以上检测见过来判断，动物性饲料很容易受沙门氏菌的污染。其中尤其以鱼粉受污染的情况最严重，浓缩饲料其次。分析原因是因为鱼粉中富含钙、磷等矿物质，而这些物质恰好也是沙门氏菌的赖以生存的食物来源。而国家明确规定饲料中不得检出沙门氏菌，而因沙门氏菌感染饲料导致禽畜大量死亡的事件已经报道很多，给畜牧业及国家经济带来了巨大的损失，因此要严格把控饲料的安全性。

结论

随着对外贸易的不断发展，动物性饲料的进口数量日益增加，出入境检疫部门严格把关，加强进口动物饲料的沙门氏菌监测，对防治国外沙门氏菌感染的传入，保护国内的人畜健康有着十分重要的意义。相关政府部门也应严格立法、执法，保证良好的饲料生产环境、运输环境。凡是发现不合规的饲料加工厂，应立即采取相应的措施，第一要禁止被污染的饲料被不法分子以低价在市场上流通；第二要强制企业工厂改造生产环境；第三要立法重罚不良企业。而相关企业要以持续发展为战略，不能贪图一时利益，保证饲料的安全。而购买饲料的群众，要掌握现代知识，学会鉴别好的饲料，要勇敢的对不良企业说不。而对于肉类的直接消费者，更要明白沙门氏菌的危害性。要正确处理以动物为源头的食物。第一要彻底煮熟肉类视频，第二生和熟的食物要分开处理，第三要保持厨房的干净整洁。

参考文献

[1]张艳红，吴延功，杜元钊，等.沙门氏菌快速检测方法研究进展[J].动物医学进展，2001，22（2）：39-41