橘红总黄酮凝胶剂的制备工艺研究

徐　晓　郭国领（1.丽珠集团丽珠制药厂　珠海　51900；.丽珠医药集团股份有限公司　珠海　51900）



橘红总黄酮凝胶剂的制备工艺研究

徐晓1郭国领2（1.丽珠集团丽珠制药厂珠海519020；2.丽珠医药集团股份有限公司珠海519020）

摘要：目的：研究橘红总黄酮凝胶剂最优制备工艺。方法：以凝胶剂的涂展性和光泽度等为指标，通过正交实验法考察卡波姆940、氮酮、丙二醇、甘油的用量，优选橘红总黄酮凝胶剂的制备工艺。结果：橘红总黄酮凝胶剂的最优工艺处方为：橘红总黄酮/卡波姆940/氮酮/丙二醇/甘油=1.3%/0.8%/2%/15%/10%。结论：经过试验研究得出的制备工艺简单、稳定、可行，为橘红总黄酮凝胶剂的实际生产提供参考。

关键词：橘红总黄酮凝胶剂正交试验制备工艺

橘红，别名为芸皮、芸红、川橘红[1]，为芸香科植物橘Citrus reticulata Blanco及其栽培变种的干燥外层果皮，性温，味辛、苦，归肺、脾经[2]，有散寒燥湿、理气化痰、宽中健脾之功效。橘红含有橙皮苷、新橙皮苷等多种黄酮类化学成分[3]，黄酮类化合物（Flavonoids）是一种广泛分布于自然界中的多酚类化合物，因为结构的多样性，此类化合物具有多种生物活性[4]，例如抗氧化[5]、降血压[6]、降血脂[7]、抗癌[8]等，现代药理研究表明，橙皮苷具有维持渗透压等作用，可用于心血管系统疾病的辅助治疗[9]。但有研究发现，黄酮类化合物有水溶性差和生物利用度较低等问题[10]。中药凝胶剂是新发展起来的一种中药外用制剂，它将传统中药与现代医药技术有机结合起来，具有涂展性好、无油腻感、易于清洗、透皮吸收好等特点[11]。将黄酮类化合物制成凝胶剂，可以改变给药方式，也可以解决生物利用度低等问题。因此，本文以橘红总黄酮为主药，以卡波姆940为基质，制备成凝胶剂，并采用正交实验法优选其制备工艺，为橘红总黄酮凝胶剂的实际生产提供参考。

1　仪器与材料

1.1实验仪器：Sartorius LE225D型电子分析天平（苏州赛恩斯仪器有限公司）；BUG40-12超声波清洗器（必能信超声（上海）有限公司）；TGL-16B型台式离心机（上海安亭科学仪器厂）；Spectrum-752型紫外分光光度计（上海光谱仪器有限公司）；XM70-4000型电热恒温水浴锅（北京市永光明医疗仪器厂）。

1.2实验药品：橘红药材（安国市天草药业有限公司，经鉴定为芸香科植物橘的干燥外层果皮）；橙皮苷标准品（上海源叶生物科技有限公司）；卡波姆940（上海精诚化工有限公司）；氮酮（天津市科密欧化学试剂有限公司）；丙二醇（广东省光华化学厂有限公司）；甘油（国药集团化学试剂有限公司）；试验用水均为蒸馏水；其他试剂均为分析纯。

2　方法及结果

2.1橘红总黄酮的制备：参照文献方法[12]。取橘红药材粉末（过60目筛网），石油醚脱脂，用60%乙醇提取，大孔树脂纯化，干燥，即得。

2.2黄芩总黄酮凝胶剂中总黄酮含量测定：以橙皮苷为标准品，采用紫外分光光度法测定。

2.2.1对照品溶液的配制：精密称取橙皮苷标准品2.725g，加70%乙醇20mL溶解，转移至50mL容量瓶中，加70%乙醇稀释至刻度，即得浓度为54.5μg/mL的标准品溶液。

2.2.2标准曲线的绘制：分别量取6份“2.2.1”项下橙皮苷标准品溶液0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2mL置10mL比色管中，均加入70%乙醇稀释至刻度，测定278nm处吸光度。以浓度（C）为纵坐标，吸光度（A）为横坐标，绘制标准曲线，得回归方程为Y= 10.843X－0.716，r=0.9993，线性范围为1.09～6.54μg/mL。

2.2.3总黄酮的测定方法：取一定量的供试品，将其捣碎，用70%乙醇溶液提取，测定278nm处所得溶液的吸光度。根据“2.2.2”项下标准曲线计算样品中总黄酮的浓度C。总黄酮含量（mg/g）计算公式：

总黄酮含量（mg/g）=[（C×V）/（1000·m）]

式中：C为一定取样量下所得总黄酮的浓度（mg/mL），V为70%乙醇的用量（mL），m为样品取样量（g）。

2.3橘红总黄酮凝胶剂的制备：称取0.6g卡波姆940撒于25mL蒸馏水中，轻微搅拌，放置过夜，得Ⅰ相；称取丙二醇12g、甘油8g，磁力搅拌器搅拌条件下加入Ⅰ相，得Ⅱ相；精密称取“2.1”项下所得橘红总黄酮1.3g，溶于25mL蒸馏水中，加入Ⅱ相，搅拌均匀，得Ⅲ相；称取1.5g氮酮加入Ⅲ相，搅拌均匀，用适量三乙醇胺调pH值为6～7，加蒸馏水至100g，充分搅匀，脱气泡，装入避光容器，存放于阴凉处。

2.4评分标准：按照以下评分标准对凝胶剂做出综合评分，满分10分，详见表1。

表1　橘红总黄酮凝胶剂的评分标准Table 1 Scoring criteria of the Red Tangerine Peel total flavones gel

备注：1.均匀度考察：取6个不同部位凝胶剂各5g，考察样品中总黄酮含量差异，最大值与最小值间差异越小越均匀；

2.湿度稳定性考察：取样品5g，密封于玻璃瓶中，湿度为75%，恒温25℃条件下放置10d，每隔2d测定样品中总黄酮含量，总黄酮含量最大值与最小值间差异越小温度稳定性越好。

3.热稳定性考察：取样品5g，密封于玻璃瓶中，恒温50℃条件下放置10d，每隔2d测定样品中总黄酮含量，总黄酮含量最大值与最小值间差异越小热稳定性越好。

2.5正交实验优化橘红总黄酮凝胶剂制备工艺：根据“2.2”项设定的制备工艺分析可知，卡波姆940、氮酮、丙二醇、甘油等四种物质的用量对橘红总黄酮凝胶剂的质量评分会有一定的影响，为得到最佳制备工艺，选用正交实验法同时考察上述四个因素对实验结果的影响，正交实验水平与因素设计见表2所示，实验结果如表3所示。

表2　正交实验水平与因素设计Table 2 Factors and levels of the orthogonal test

由表3的极差分析可知，各考察因素对橘红总黄酮凝胶剂综合评分的影响程度不同，按由大到小的次序排列为：A＞C＞B＞D，即卡波姆940的用量＞甘油的用量＞丙二醇的用量＞氮酮的用量。最佳的制备工艺为A2C2B3D2，即卡波姆940的用量为0.8g，丙二醇的用量为15g，甘油的用量为10g，氮酮的用量为2g。

表3　正交实验结果及分析Table 3 Results and analysis of the orthogonal test

对正交实验所得结果进行方差分析，结果见表4。四个因素对实验结果卡波姆940的用量影响具有显著性，其他均无显著性，这与极差分析的结果相同。

表4　正交实验方差分析结果Table 4 Results of the squared analysis of the orthogonal test

2.6最佳制备工艺的验证：按“2.2”项方法，平行制备3份凝胶，加入卡波姆940的量为0.8g，丙二醇的量为15g，甘油的量为10g，氮酮的用量2g，静置观察并按“2.3”项对所得凝胶剂进行评分，综合评分结果分别为9.4、9.7、9.4，平均为9.5，RSD%= 1.82%，表明该制备工艺条件得出的橘红总黄酮凝胶剂质量最好且工艺稳定。

3　讨论

卡波姆是一种在凝胶剂制备过程中比较常用的基质，具有对黏膜无刺激、皮肤耦合效果好、制备方法简单、透皮性好、治疗效果好等优点[13]。本文选择橘红总黄酮为主药，卡波姆940为基质，制备一种黄酮类化合物的凝胶剂。实验中发现，作为基质的卡波姆940对凝胶剂的质量综合评分影响较大，用量过多和过少都会影响凝胶剂的成型性，为此在该凝胶剂的制备过程中应当以此为考虑的重点。另外，还发现卡波姆940与橘红总黄酮有一定的相容性，能形成比较光滑、均匀的凝胶。

本文对正交实验优选出的最佳制备工艺进行了验证，验证结果显示该工艺条件合理、稳定。本文研究内容为橘红总黄酮凝胶剂的工业化生产提供参考。

参考文献

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·综述·

Study on the preparation process of the Red Tangerine Peel total flavones Gel

Xu Xiao1Guo Guoling2（1.Livzon（Group）Pharmaceutical Factory，Guangdong Zhuhai 519020，China；2.Livzon Pharmaceutical Group Co.，Ltd.，Guangdong Zhuhai 519020，China）

Abstract：Objective：To study and optimize the preparation process of the Red Tangerine Peel total flavones Gel. Methods：Taking the gel spread stretchability and glossiness as investigation indexes，the amount of carbomer-940，azone，propylene glycol，glycerine was chosen as investigating factors by orthogonal test to optimize the preparation process of the Red Tangerine Peel total flavones Gel. Results：The optimum preparation process were as follows：the total flavones/carbomer-940/azone/propylene glycol/glycerine = 1.3%/ 0.8%/2%/15%/10%. Conclusion：The optimum preparation process selected by orthogonal test was stable and simple，which provide the reference for the production of the Red Tangerine Peel total flavones Gel.

Key words：Red Tangerine Peel total flavones Gel Orthogonal test Preparation process

中图分类号：R283.6

文献标识码：B

文章编号：1672-8351（2016）04-0103-02