注射用左旋泮托拉唑钠杂质D/F方法学研究

朱玲（杭州华东医药集团新药研究院有限公司 浙江杭州 310011）

注射用左旋泮托拉唑钠杂质D/F方法学研究

朱玲（杭州华东医药集团新药研究院有限公司 浙江杭州 310011）

建立高效液相色谱方法测定注射用左旋泮托拉唑钠的杂质D/F，并进行了杂质定量检测的方法学研究。经过验证，此方法的精密度、稳定性及线性回归均良好，平均回收率为99．98%，操作简便，可以准确的对研制样品中的杂质D/F进行控制。

左旋泮托拉唑钠；方法学研究；杂质检测

【DOI】10．19312/j．cnki．61-1499/c．2016．07．090

泮托拉唑钠（pantoprazole sodium）化学名为5-二氟甲氧基-2-｛[3,4-二甲氧基-2-（吡啶基）甲基]亚磺酰基｝-1H-苯并咪唑钠盐，是一种新型的抗溃疡药，直接作用与胃壁内质子泵，抑制胃酸分泌，可治疗胃溃疡、十二指肠溃疡等，与传统的抗酸剂和H2受体阻断剂相比具有疗效高，起效快，副作用小，治疗周期短等优点。根据文献，泮托拉唑在弱酸性的环境下，比奥美拉唑以及兰索拉唑均稳定，其生物利用度比奥美拉唑提高7倍，对胃的壁细胞的选择性更专一。其抗溃疡作用优于雷尼替丁，而与奥美拉唑相似，但与其他药物的相互作用那个少于奥美拉唑和兰索拉唑。左旋泮托拉唑钠为我国创新的新药，尚未见其制剂上市。与消旋体泮托拉唑钠相比，左旋泮托拉唑制成的制剂不但可以使剂量减半，而且具有更高的药效。为确认制剂成品中杂质D/F的限度，并且对其含量进行控制，故建立一套研究杂质D/F的外标法方法学。

一、实验部分

1.主要仪器与色谱柱

Agilent 1260高效液相色谱仪，DAD检测器；

METTLER TOLEDO XS105 DualRange 电子天平；

Waters X Bridge C18 （250×4．6mm ，5μm）色谱柱。

2.试剂

乙腈（色谱纯），NaOH（分析纯），磷酸氢二钾（分析纯），纯化水。

3.试验样品

杂质D/F，来源：USP REFERENCE STANDARD， 泮托拉唑钠，批号：G0L326。

4.色谱条件

用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱，磷酸氢二钾溶液为A相[0．01mol/L的磷酸氢二钾溶液（用磷酸调pH至7．0±0．1）]，乙腈为B相，进行梯度洗脱，0～40min：80∶20（A;B）→20∶80（A;B）；40～45min： 20∶80（A;B）→80∶20（A;B）45～55min：80∶20（A;B）。

二、实验结果

1.杂质D/F的检测限

取杂质D/F样品，通过逐级降低浓度，进样测定，以信噪比S/N＞10计，杂质D/F的最低检出浓度为26．1ng/ml，最低检出量为0．52ng。

2.杂质D/F的线性

表1 杂质D/F的线性

图1 杂质D/F的线性

杂质D/F在0．41-1．31μg/ml浓度范围内与峰面积线性良好。

3.杂质D/F的回收率

精密称取杂质D/F对照品10．25mg，于50ml量瓶中，加溶剂（0．001mol/L NaOH：乙腈=50∶50）溶解，超声，并用溶剂稀释至刻度，摇匀，再精密量取1．0ml于10ml量瓶中，用溶剂稀释至刻度，摇匀，作为贮备液；精密量取0．8、1、1．2ml于100ml量瓶中，同时称取约40mg的左旋泮托拉唑钠原料于同一量瓶中，然后用溶剂稀释至刻度，摇匀，取20μl注入液相色谱仪，另取杂质E对照品同法测定，按外标法计算回收率，结果见表2。

表2 杂质D/F回收率测定

结果：由以上数据显示杂质E的平均回收率为99．98%，RSD为0．75 %。

4.杂质D/F溶液的稳定性

取杂质D/F的对照品溶液，分别在0、1、4、11、19、22小时进样检测，结果见表4。

表3 杂质D/F溶液的稳定性

结论：样品在溶剂中22小时内稳定。

5.杂质D/F的精密度

按照所述方法对样品中杂质D/F的含量进行测定，六批样品检测结果如下。

表4 杂质D/F的精密度

结论：该方法测定中杂质D/F的精密度良好。

6.杂质D/F的归属以及分析

杂质D/F在本品及原研制剂中均检出，并在湿热条件中会加速增长，因此在检测中根据杂质对照品以及系统适应 性溶液来确定杂质D/F的相对保留时间。

表5 杂质E的归属

三、结论

根据以上实验结果可知杂质D/F在溶剂（0．01mol/LNaOH：乙腈=50∶50）中稳定性良好，精密度良好，平均回收率为99．98%，杂质线性良好，可以准确的对研制样品中的杂质D/F进行控制。

[1] Pantoprazole sodium USP34