攀茎钩藤化学成分的研究

张俊杰，杨敏超，彭 伟，陈业高

（云南师范大学 化学化工学院，云南 昆明 650500）

攀茎钩藤化学成分的研究

张俊杰，杨敏超，彭 伟，陈业高*

（云南师范大学 化学化工学院，云南 昆明 650500）

攀茎钩藤（Uncaria scandens（Smith）Hutchins）枝干用甲醇提取，利用硅胶柱层析、Sephadex LH-20柱层析和反相柱层析进行化学成分分离纯化，从中分离得到6个化合物.根据现代波谱技术和理化性质对化合物结构进行鉴定，鉴定结构为：乌索酸（1）、奎诺酸（2）、β-谷甾醇（3）、环桉烯醇（4）、东莨菪亭（5）、香草酸甲酯（6）.其中化合物（2）、（4）、（5）、（6）为首次从该植物中分离得到.

攀茎钩藤；化学成分；结构鉴定

图1 化合物1～6的结构Fig.1Structures of compounds 1～6

攀茎钩藤（Uncaria scandens（Smith）Hutchins）为茜草科钩藤属植物，产于广东、海南、广西、云南四川及西藏，生于山地疏林.钩藤为中医常用药，具有清热平肝、息风定惊、降血压之功效［1］.迄今为止，已从该属植物中分离出数百个化合物，有黄酮类、香豆素类、生物碱类、单苯环类等［2］.钩藤属中主要有攀茎钩藤、白钩藤、毛钩藤、云南钩藤、大叶钩藤、北越钩藤.前人从攀茎钩藤分离得到钩藤碱E、喜果苷、cadambine和pteropodine等生物碱及熊果酸、对羟基肉桂酸甲酯和邻苯二甲酸二丁酯［3-4］.为了进一步寻找新的活性天然产物，我们对云南西双版纳产攀茎钩藤的化学成分进行了分离鉴定.采用各种分离方法包括硅胶柱层析、Sephadex LH-20柱层析和反相柱层析等分离方法，从中分离得到6个6个化合物.经过波谱分析鉴定为乌索酸（1）、奎诺酸（2）、β-谷甾醇（3）、环桉烯醇（4）、东莨菪亭（5）、香草酸甲酯（6）.其中化合物2、4、5和6为首次从该植物中分离得到.

1 药材和仪器

1.1 仪器

Bruker DRX-500 MHz超导核磁共振仪（瑞士Bruker公司）；ZF-II型紫外分析仪（上海顾村中实仪器厂）；Sephadex LH-20：20-80μm（Pharmacia Fine Chemical Co.，Ltd.）；反相色谱硅胶RP-C18：（40-63 μm德国Merck公司）；EYELA IV-1100型旋转蒸发仪（上海爱朗仪器有限公司）.

1.2 试剂

高效薄层层析硅胶板GF25（烟台化工研究院）；层析硅胶（青岛海洋化工厂）；显色剂为10%浓硫酸-乙醇溶液；所用溶剂为工业纯，重蒸，其它试剂为化学纯或分析纯.

1.3 药材

攀茎钩藤采自云南，由中国医学科学院药用植物开发研究所云南分所彭朝中先生采集，并鉴定为Uncaria scandens（Smith）Hutchins.

2 提取与分离

攀茎钩藤带钩茎枝5.0 kg，粉碎后用工业甲醇浸提，浸出液减压浓缩得甲醇提取物.甲醇提取物（150 g）将甲醇提取物溶于水中，再用乙酸乙酯萃取8次，得到水部分和乙酸乙酯部分（70 g）.乙酸乙酯部分用110 g硅胶（80-100目）拌样，再用石油醚-乙酸乙酯（1∶0～0∶1）梯度洗脱，经薄层层析检测，分为8部分Pj-1（11.8 g）、Pj-2（12.2 g）、Pj-3（10.7 g）、Pj-4（11.4 g）、Pj-5（8.0 g）、Pj-6（4.6 g）、Pj-7（6.7 g）、Pj-8（3.5 g）.将以上部分分别经过硅胶层析，Sephadex LH-20柱层析和反相硅胶柱层析反复分离纯化得到纯的化合物.其中从Pj-4部分得到β-谷甾醇（3）（10 mg），环桉烯醇（4）（9 mg），香草酸甲酯（6）（7 mg）.Pj-5部分得到乌索酸（1）（8 mg），奎诺酸（2）（7 mg），东莨菪亭（5）（8 mg）.

3 结构鉴定

化合物1：白色固体，分子式为C30H48O3，溶于甲醇.1H-NMR（500 Mz，C5D5N）：δ 5.49（1H，brs，H-12），3.59（1H，d，J=7.0 Hz，H-3），1.23（3H，d，J=6.5 Hz，H-29），1.19（3H，s，H-27），1.04（3H，s，H-25），1.03（3H，s，H-24），1.02（3H，s，H-26），1.01（3H，s，H-23），0.88（1H，d，J=6.5 Hz，H-30）；13C-NMR（125 Mz，C5D5N）：δ 39.1（t，C-1），27.8（t，C-2），77.9（d，C-3），39.7（s，C-4），55.6（d，C-5），18.5（t，C-6），33.3（t，C-7），39.1（s， C-8），47.8（d，C-9），37.2（s，C-10），23.4（t，C-11），125.4（d，C-12），139.0（s，C-13），42.2（s，C-14），28.5（t，C-15），24.6（t，C-16），47.8（s，C-17），53.3（d，C-18），39.2（d，C-19），38.8（d，C-20），30.8（t，C-21），37.0（t，C-22），28.4（q，C-23），15.4（q，C-24），16.9（q，C-25），17.2（q，C-26），23.6（q，C-27），179.7（s，C-28），17.3（q，C-29），21.1（q，C-30）.以上数据与文献中的乌索酸一致［5］，故鉴定化合物1为乌索酸（ursolic acid）.

化合物2：白色晶体，分子式为C30H46O5，溶于甲醇.1H-NMR（500 MHz，C5D5N）：δ 3.30（1H，dd，J= 10.8，5.1 Hz，H-3），6.04（1H，d，J=2.7 Hz，H-12），1.15（3H，s，H-23），1.08（3H，s，H-24），1.00（3H，s，H-25），0.94（3H，s，H-26），1.24（1H，d，J=6.0 Hz，H-29），0.82（1H，d，J=6.3 Hz，H-30）；13C-NMR（125 MHz，C5D5N）：δ 181.4（s，C-28），179.2（s，C-27），135.3（s，C-13），130.2（d，C-12），79.2（d，C-3），58.0（s，C-14），57.0（d，C-18），56.2（d，C-5），50.0（s，C-17），48.5（d，C-9），41.2（t，C-1），40.6（s，C-4），40.5（s，C-8），40.4（d，C-20），38.9（d，C-19），38.8（s，C-10），38.6（t，C-7），38.3（t，C-22），31.8（t，C-21），29.8（q，C-23），29.4（t，C-15），27.6（t，C-2），26.7（t，C-16），24.6（t，C-11），22.5（t，C-6），20.2（q，C-30），20.1（q，C-29），19.5（q，C-26），17.8（q，C-25），17.8（q，C-24）.以上数据与文献［6］中的奎诺酸一致，故鉴定化合物2为奎诺酸（quinovic acid）.

化合物3：白色晶体，分子式为C29H50O，溶于甲醇.1H-NMR（500 Mz，C5D5N）δ 5.36（1H，s，H-6），3.59（1H，m，H-3），1.06（3H，s，H-19），0.70（3H，s，H-18）；13C-NMR：（125 Mz，C5D5N）δ 36.7（t，C-1），31.9（t，C-2），71.1（d，C-3），42.3（t，C-4），141.7（s，C-5），121.0（d，C-6），32.0（t，C-7），32.4（d，C-8），50.3（d，C-9），36.2（s，C-10），21.1（t，C-11），39.8（t，C-12），43.1（s，C-13），56.1（d，C-14），24.3（t，C-15），29.2（t，C-16），56.7（d，C-17），11.2（q，C-18），11.9（q，C-19），37.6（d，C-20），19.0（q，C-21），26.2（t，C-22），23.2（t，C-23），45.8（d，C-24），28.3（q，C-25），19.4（d，C-26），19.8（q，C-27），34.0（t，C-28），18.8（q，C-29）.以上数据与文献［7］中β-谷甾醇的一致，故鉴定化合物3为β-谷甾醇（β-sitosterol）.

化合物4：白色固体，分子式为C30H50O，溶于氯仿.1H-NMR（500 MHz，CDCl3）δ：4.74（1H，s，H-30a），4.69（1H，d，J=.0 Hz，H-30b），3.24（1H，m，H-3），1.06（3H，d，J=2.80 Hz，H-26），1.05（3H，d，J=2.80 Hz，H-27），1.01（3H，d，J=6.19 Hz，H-29），1.00（3H，s，H-18），0.93（3H，s，H-21），0.92（3H，s，H-28），0.40（1H，d，J=4.1 Hz，H-19a），0.17（1H，d，J=4.1 Hz，H-19b）；13C-NMR（125 MHz，CDCl3）δ：30.8（t，C-1），34.8（t，C-2），76.6（d，C-3），44.6（d，C-4），43.3（d，C-5），24.7（t，C-6），28.1（t，C-7），46.9（d，C-8），23.6（s，C-9），29.5（s，C-10），25.2（t，C-11），35.4（t，C-12），45.4（s，C-13），48.9（s，C-14），32.9（t，C-15），27.3（t，C-16），52.2（d，C-17），17.8（q，C-18），27.0（t，C-19），36.1（d，C-20），18.4（q，C-21），35.0（t，C-22），31.3（t，C-23），157.0（s，C-24），33.8（d，C-25），21.9（q，C-26），22.0（q，C-27），19.1（q，C-28），14.4（q，C-29），105.9（t，C-30）.以上数据与文献中的环桉烯醇一致［8］，故鉴定化合物4为环桉烯醇（cycloeucalenol）.

化合物5：白色固体，分子式为C10H8O4，溶于吡啶.1H-NMR（500 MHz，CDCl3）：δ 7.63（1H，d，J=14.5 Hz，H-4），6.94（1H，s，H-8），6.87（1H，s，H-5），6.30（1H，d，J=5 Hz，H-3），3.98（3H，s，OCH3-6）；13C-NMR（125 MHz，CDCl3）：δ 161.4（s，C-2），150.2（s，C-7），149.6（s，C-9），143.9（s，C-6），143.2（d，C-4），113.4（d，C-3），111.5（s，C-10），107.5（d，C-5），103.2（d，C-8），56.4（q，OCH3）.以上数据与文献［9］中的东莨菪亭一致，故鉴定化合物5为东莨菪亭（scopoletin）.

化合物6：白色粉末，分子式为C9H10O4，溶于吡啶.1H-NMR（500 MHz，CDCl3）：δ 3.91（3H，s，3’-OCH3），3.97（3H，s，7’-OCH3），6.97（1H，d，J=8.0 Hz，H-5），7.58（1H，d，J=2.0 Hz，H-2），7.65-7.67（1H，dd，J=1.5 Hz，11.5 Hz，H-6）；13C-NMR（CDCl3，125M）：δ 51.9（q，OCH3-7’），56.1（q，OCH3-3’），111.7（d，C-2），114.0（d，C-5），122.2（s，C-1），124.2（d，C-6），146.1（s，C-4），150.0（s，C-3），166.8（s，C-7）.以上数据与文献［10］中的香草酸甲酯一致，故鉴定化合物6为香草酸甲酯（vanilic acid methyl ester）.

4 结论

从攀茎钩藤带钩茎枝中分离得到6个化合物，并通过波谱数据和理化性质对其结构进行了鉴定，分别鉴定为乌索酸（1）、奎诺酸（2）、β-谷甾醇（3）、环桉烯醇（4）、东莨菪亭（5）、香草酸甲酯（6）.其中化合物2、4、5和6为首次从该植物中分离得到.

［1］邓美彩，焦威，董玮玮.钩藤化学成分的研究［J］.天然产物

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责任编辑：刘 红

Chemical Constituents of Uncaria Scandens（Smith）Hutchins

ZHANG Junjie，YANG Minchao，PENG Wei，CHEN Yegao*

（School of Chemistry and Chemical Engineering，Yunnan Normal University，Kunming 650500，China）

Six compounds were obtained by silica gel chromatography，Sephadex LH-20 chromatography and reversedphase chromatography from the methanol extract of the twigs of Uncaria scandens（Smith）Hutchins of Yunnan.The chemical structures of these compounds were identified by modern spectroscopic analysis combined with their physico-chemical data.These compounds were identified to be ursolic acid（1），quinovic acid（2），β-sitosterol（3），cycloeucalenol（4），scopoletin（5），and vanilic acid methyl ester（6）.Among them，compounds 2，4，5 and 6 were isolated from U.scandens for the first time.

Uncaria scandens；chemical constituents；structure identification

R 248.1

A

1674-4942（2016）02-0189-03

2016-01-22

云南省重点项目（2009CC018）

*通讯作者