伊伐布雷定对心肌梗死兔心肌细胞白介素10表达的影响

戴伟

【摘要】目的：探讨伊伐布雷定（Iva）对心肌梗死（MI）兔心肌细胞白介素10表达的影响及其改善心室重构的作用。

方法：新西兰大白兔46只，采用结扎左冠状动脉前降支的方法建立心肌梗死模型，将模型制备成功的36只新西兰大白兔随机分成4组，每组各9只。假手术组（S组）、心肌梗死组（MI组）、比索洛尔治疗组（B组）和伊伐布雷定治疗组（Iva组）。B组和Iva组在心肌梗死模型制备成功后12小时，分别给予比索洛尔1.25mg/d和伊伐布雷定17mg/（kg.d）治疗4周；S组和MI组在同时间点给予等量生理盐水，持续4周。4周后称取体质量、左右心室质量；取兔心肌组织，采用免疫组织化学染色法检测心肌细胞白介素10的表达。

结果：术后4周，与S组相比，MI组心室的相对质量增加（P<0.01）；与MI组相比，B组和Iva组心室的相对质量降低（P<0.05）。术后4周，与MI组相比，B组和Iva组的白介素10水平显著升高（P<0.01），cha差异有显著性（P<0.01）。

结论：Iva对心肌梗死兔治疗4周后，可以通过增加心肌细胞抗炎因子白介素10表达改善心室重构，对心肌有保护作用。

心肌梗死（MI） 后心肌细胞产生众多炎症因子，其中IL-10是重要的抗炎细胞因子，主要抑制Th细胞产生的IFN，抑制中性粒细胞等炎性细胞的浸润、游走、增殖及活化，具有抵抗炎症反应的作用。

伊伐布雷定是首个特异性超极化激活通道（1f）阻滞剂，以剂量依赖性方式抑制If电流降低窦房结节律，对心内传导、心肌收缩力或心室复极化无明显影响[2]。Berdeaux A等的研究表明[3]，伊伐布雷定和β受体阻断剂比较在降低心率相同水平的情况下，伊伐布雷定提供的心脏舒张期灌流时间更长。

动物模型的建立[4]

动物分组

心梗模型制备成功后存活36只兔，其中9只开胸，不结扎动脉的为假手术组（S组），剩下27只随机分成三组：①心肌梗死组（MI组）②伊伐布雷定治疗组（Iva组）③比索洛尔治疗组（B组）。

检测方法及指标

（1）计算心脏右室质量与体质量的比值（RVW/BW）及左室质量与体质量的比值L（VW/BW），即相对质量。

（2）白介素10

采用免疫组织化学SP二步法染色[5]。具体步骤（略）每组取9例，每例测5个视野。由计算机计算出所测阳性反应物相对含量的灰度值及面积。

统计学处理

数据均用 ±s表示，使用简明统计软件进行统计学分析，用方差分析进行多个组间比较，用q检验（Student Newman-Keuls法）进行两组间比较。

比较心室的相对质量

与S组相比，MI组心室的相对质量增加（P<0.01）；与MI组相比，B组和Iva组心室的相对质量降低（P<0.05）。

各组心肌细胞中白介素10表达的比较

与MI组相比，B组和Iva组的白介素10水平显著升高（P<0.01），差异有显著性（P<0.01）。与S组相比，B组和Iva组之间没有统计学差异。

讨论

越来越多的研究表明炎症反应在冠状动脉粥样硬化的发展过程中发挥着重要作用。目前可以认为冠状动脉粥样硬化是一种慢性炎症性疾病，聚集在动脉内膜的低密度脂蛋白可在血管壁中启动炎症反应。 白介素10主要抑制Th细胞产生的IFN，抑制中性粒细胞等炎性细胞的浸润、游走、增殖及活化，在免疫反应中起抗炎作用。

本实验研究结果显示，与S组相比，MI组心室的相对质量增加（P<0.01）；与MI组相比，B组和Iva组心室的相对质量降低（P<0.05）。说明心梗后心室发生重构，心室质量增加；而比索洛尔和伊伐布雷定可以改善心梗后心室重构，使心室的相对质量降低。

发生心肌梗死后，炎症反应在心室重构方面扮演着重要的角色。炎症细胞因子的增多和生成过多的活性氧族参与了心肌重构。心肌梗死后产生的炎症反应和释放的细胞炎症因子是机体对抗组织损伤的一种重要的保护性反应，它可以促进胶原形成以及血管与细胞的再生，有利于心肌梗死后受损心肌组织的修复和心肌功能的恢复。但是炎症反应和细胞炎症因子又可以刺激氧自由基的释放，介导氧化应激，而氧化应激引起的心肌损伤又可以刺激更多的细胞因子的释放，由此形成恶性循环，加重心肌损伤，同时，细胞炎症因子的细胞毒作用还可以直接介导心肌细胞的凋亡、肥大及心室重构。MI后在非梗死区由于I型胶原大量沉积和I/Ⅲ型胶原比例升高，使非梗死区心肌僵硬度增高而顺应性降低，从而引起心脏舒张功能不全或衰竭。

给予药物治疗4周后，B组和Iva组心肌细胞组织白介素10的表达高于MI组（P<0.05），说明伊伐布雷定和比索洛尔可以升高心梗后心肌细胞白介素10的表达，增强抗炎效应，减轻炎症反应；炎症反应中炎症因子作用的分子机制及改善心肌梗死后心室重构的作用机理尚不完全明确，其可能是通过增加心肌细胞抗炎因子白介素10表达，减轻间质的纤维化，减少I、Ⅲ型胶原纤维的含量及其构成比，改善心肌梗死后心室重构。

结论

1.伊伐布雷定可以影响心肌梗死兔心肌细胞炎症因子的表达，降低心肌梗死后的炎症反应。

2.伊伐布雷定可以通过增加心肌细胞抗炎因子白介素10表达而改善心肌梗死兔的心室重构。

3.伊伐布雷定与比索洛尔相比，在改善心梗后心室重构方面相对一致。

【参考文献】

[1]廖玉华，心肌梗死免疫机制[J].心脏病学，2009，101（1）： 21-

26.

[2]陈莹，丁文惠.白细胞介素10基因转染对大鼠心肌梗死后心室纤维化重构的影响[J].中华老年心脑血管病，2008，10（9）： 31-

33.

[3]Di Francesco D. If inhibition：a novel mechanism of action[J]. J Eur Heart，2010，121（2）： 19-21.

[4]刘斌，于海初.冠状动脉结扎法与双极电凝法制备兔急性心肌梗死模型的对比[J].齐鲁医学杂志，2011，26（6）：52-53.

[5]王映梅.白细胞介素17对小鼠心肌成纤维细胞胶原表达的研究[J].细胞与分子免疫学，2011，27（8）：801-803.