尿RBP、NAG联合血清CysC检测在2型糖尿病早期肾损伤中的诊断价值

鲁 丹，陈丽芳，蔡洁丹

(深圳市龙岗区人民医院检验科，广东深圳 518172)

·论 著·

尿RBP、NAG联合血清CysC检测在2型糖尿病早期肾损伤中的诊断价值

鲁 丹，陈丽芳，蔡洁丹

(深圳市龙岗区人民医院检验科，广东深圳 518172)

目的 探讨尿视黄醇结合蛋白(RBP)、β-N-乙酰葡萄糖苷酶(NAG)联合血清胱抑素C(CysC)检测在2型糖尿病早期肾损伤中的诊断价值。方法 抽取该院T2DM糖尿病肾病患者58例(A组)，T2DM单纯糖尿病患者54例(B组)，健康体检者52例(C组)。利用免疫比浊法检测3组受试者尿RBP、NAG和血清CysC水平，比较其差异，探讨单项及联合检测诊断糖尿病早期肾损伤的阳性率。结果 A组尿RBP、NAG和血清CysC水平均显著高于B、C组，差异具有统计学意义(P<0.05)；B组RBP、NAG和血清CysC水平均高于C组，差异具有统计学意义(P<0.05)。RBP、NAG、CysC单项检测阳性率分别为87.93%、86.21%、84.48%，联合3项指标检测的阳性率为94.83%，高于单项检测的阳性率，差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 尿RBP、NAG及血清CysC是2型糖尿病早期肾损伤的灵敏指标，且联合3项指标检测的综合敏感性更好，具有较高的临床应用价值。

糖尿病； 肾脏损伤； 视黄醇结合蛋白； β-N-乙酰葡萄糖苷酶； 胱抑素C

糖尿病性肾病(DN)是糖尿病引起的严重和危害性最大的一种慢性并发症，由糖尿病引起的微血管病变而导致的肾小球硬化，是本症的特点，后期可出现慢性肾功能不全和肾功能衰竭，对患者生命健康造成威胁[1]，亦是患者主要死因。然而，糖尿病肾病起病隐匿，缓慢进展，早期的肾脏病有关症状不多，肾病初期肾脏增大，肾小球滤过功能亢进和微量蛋白尿可持续多年，也不容易被注意，因此大多数糖尿病肾病患者是在出现明显蛋白尿或显著水肿时方被觉察。之前临床上用于检测的BUN,Cr作为诊断糖尿病肾病的敏感性较差[2]。而根据糖尿病早期肾损伤的结构和功能变化，发现新型标志物尿视黄醇结合蛋白(RBP)、β-N-乙酰葡萄糖苷酶(NAG)、血清胱抑素C(CysC)在糖尿病早期肾损伤中具有较高的灵敏性和诊断价值。

1 资料与方法

1.1 一般资料 (1)T2DM糖尿病肾病患者58例(A组)：男32例，女26例。年龄42～74岁，平均年龄58岁；(2)T2DM单纯糖尿病患者54例(B组)：男28例，女26例，年龄40～72岁，平均年龄56岁；(3)健康体检者52例(C组)：男28例，女24例，年龄38～70岁，平均年龄54岁。病例纳入标准：(1)所有患者均符合1999年WHO关于糖尿病的诊断及分型标准；(2)病程1.8～23年；(3)年龄35～77岁；(4)签署知情同意书。病例排除标准：(1)肾脏实质性病变和尿路感染而引起的尿蛋白阳性者；(2)糖尿病酮症酸中毒；(3)急慢性肝炎及其他急慢性炎症者；(4)应激状态；(5)月经期、妊娠期及哺乳期妇女；(6)甲状腺功能异常、活动性结核及心功能衰竭者；(7)糖尿病诊断前已有高血压的患者。

1.2 仪器与试剂 尿RBP、NAG：所用仪器为BECKMAN COULTER UniCel DxC800，试剂购自北京利得曼生化股份有限公司，血清胱抑素C(CysC)所用仪器为OLYMPUS AU640，试剂购自北京利得曼生化股份有限公司。

1.3 方法 所有受试者禁食8～12 h，应用一次性真空釆血管抽取次日清晨空腹静脉血3 mL,3 500 r/min,离心5 min，分离血清，利用免疫比浊法进行血清胱抑素C(CysC)的测定。并留取第一次晨尿标本5 mL,3 500 r/min离心5 min，之后收集上清液利用免疫比浊法进行尿RBP、NAG的测定。各测定项目按照仪器和试剂说明书要求严格进行操作，并保证实验室各项结果均在控。阴性结果判读标准为RBP(0～0.7)μg/mL，NAG(0～11.5)IU/L，血清胱抑素C(CysC)<1.25 mg/L。

2 结 果

2.1 3组尿RBP、NAG和血清CysC水平比较 A组尿RBP、NAG和血清CysC水平均显著高于B、C组，差异具有统计学意义(P<0.05)。B组RBP、NAG和血清CysC水平均高于C组，差异具有统计学意义(P<0.05)，见表1。

表1 3组尿RBP、NAG和血清CysC水平比较

*：P<0.05，与C组比较；#：P<0.05，与B组比较。

2.2 尿RBP、NAG和血清CysC单项及联合3项指标检测的阳性率 RBP、NAG、CysC单项检测阳性率分别为87.93%、86.21%、84.48%，联合3项指标检测的阳性率为94.83%，高于单项检测的阳性率，差异具有统计学意义(P<0.05)，见表2。

表2 单项及联合3项指标检测的阳性率

χ2=13.092、8.923、10.036、9.227，*：P<0.05，与单项比较。

3 讨 论

糖尿病肾病由于受高糖、血液流动力异常、遗传等因素影响，引起体内胰岛素绝对与相对不足以致糖蛋白质和脂肪代谢障碍，引起微血管病变，累及肾脏成为主要病变之一。表现为蛋白尿、高血压、水肿、肾损害、严重者肾衰竭，目前已成为终末期肾脏病的第2位原因。其终末期患者5年生存率仅为20%[3]。糖尿病肾病临床一般分为早期(MA在30～300 mg/d)和临床糖尿病肾病2期(MA>300 mg/d)，糖尿病早期肾损伤阶段进行及时的干预可逆转其进展为临床糖尿病肾病2期[4]。研究认为，约70%的糖尿病早期肾损伤经过合理的治疗是可逆转的，因而，糖尿病早期肾损伤的准确诊断至关重要[5]。

视黄醇结合蛋白(RBP)是肝脏分泌的一种低相对分子质量蛋白(21×103)，由肝细胞合成，受全反式视黄醇刺激并与之特异性结合,主要功能是将视黄醇从肝细胞转运到上皮细胞。血浆中的视黄醇结合蛋白(RBP)约有90%与甲状腺素结合前蛋白结合，形成高分子蛋白复合物，故而不被肾小球滤过膜滤过，当视黄醇被转运到靶细胞后，视黄醇结合蛋白(RBP)便游离到血浆中，迅速被肾小球滤过，几乎全部被肾近曲小管重吸收而分解。正常情况下，在尿中稳定性强，不易分解，不受pH和血压干扰，排量甚微(100 μg/d)[6-7]。但在肾近曲小管损伤时，其尿排量明显增加，故视黄醇结合蛋白(RBP)排量增加可作为肾近曲小管损伤标志[8]。本研究结果表明，A、B组糖尿病患者尿RBP显著高于C组健康体检者。单独检测尿RBP诊断糖尿病早期肾损伤的阳性率为87.93%。

NAG是一种广泛存在于各组织溶酶体中的高相对分子质量溶酶体水解酶，在前列腺和肾脏近端肾小管中含量最高，健康人体血清中的NAG不能通过肾小球滤过膜达到尿液中，而当糖尿病患者出现早期肾损伤时，随着肾小管细胞的损害，出现溶酶体增殖的自溶反应，表现为尿NAG显著升高[9-10]。本研究结果也发现，A、B组糖尿病患者尿NAG显著高于健康体检者。单独检测尿NAG诊断糖尿病早期肾损伤的阳性率为86.21%。

CysC是一种低相对分子质量、碱性非糖化蛋白质，广泛存在于各种组织的有核细胞和体液中。循环中的胱抑素C具有产生率及释放入血速率恒定，能自由通过肾小球滤过，在近曲小管全部重吸收并迅速代谢分解，不返回血液，不和其他蛋白形成复合物等特点。其血清浓度变化不受炎症、感染、肿瘤及肝功能等因素的影响，与年龄、性别、饮食、体表面积、肌肉量无关[11]。是低相对分子质量蛋白质中与GFR最相关的内源性标志物，分析灵敏度和特异性均优于血肌酐及内生肌酐清除率。其含量变化可以敏感反应肾小球的轻微损伤，能有效的反映肾小球滤过率变化，是一种评价早期肾功能损伤准确性好、特异度高的理想指标[12]。本研究结果发现，A、B组糖尿病患者血清CysC水平显著高于C组健康体检者，单独检测血清CysC诊断糖尿病早期肾损伤的阳性率为84.48%。

糖尿病早期肾损伤症状隐匿，寻找敏感指标，并进行有效干预、阻断、延迟、至关重要。而单一指标虽

都具其优势，但一定程度上也存在局限性，所以联和运用其敏感性和特异性，更能提高诊断的精确性。本研究结果发现，尿RBP、NAG和血清CysC是肾脏肾小管和肾小球细微早期损害的敏感指标，联合检测的阳性率为94.83%，高于单项检测阳性率。能及时准确的诊断糖尿病早期肾损伤，从而逆转糖尿病肾病，提高其临床治愈率，具有重要的临床价值和意义。

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Diagnostic value of urine RBP,NAG combined with serum CysC detection in early kidney damage in type 2 diabetes mellitus

LuDan,ChenLifang,CaiJiedan

(DepartmentofClinicalLaboratory,LonggangDistrictPeople′sHospital,Shenzhen,Guangdong518172,China)

Objective To explore the diagnostic value of urine retinol binding protein (RBP),beta-N-acetyl amino glycosidase enzymes(NAG) combined with serum cystatin C(CysC) detection in early kidney damage of type 2 diabetes mellitus(T2DM).Methods Totally 58 cases of T2DM complicating in our hospital were selected as the group A,54 cases of simple T2DM (group B) and 52 individuals undergoing the physical examination(group C).The urine RBP,NAG and serum CysC were detected in three groups,their differences were compared.The positive rates for detecting early diabetic renal damage were compared between the single index detection and combined detection.Results The levels of urine RBP,NAG and serum CysC level in the group A were significantly higher than those in the group B and C,the differences were statistically significant(P<0.05); the levels of urine RBP,NAG and serum CysC level in the group B were significantly higher than those in the group C,the differences were statistically significant(P<0.05); The positive rates of single detection of RBP,NAG and CysC were 87.93%,86.21% and 84.48% respectively,the positive rate of 3-index combined detection was 94.83%,which was significantly higher than that of single index detection,the difference was statistically significant (P<0.05).Conclusion Urine RBP,NAG and serum CysC are the sensitive indexes in early diabetic renal damage.The 3-index combined detection has better comprehensive sensitivity and possesses higher clinical application value.

diabetes; kidney damage; retinol binding protein; beta-N-acetyl amino glycosidase enzymes; cystatin C

鲁丹，女，主管检验师，主要从事免疫方面疾病的诊治工作。

10.3969/j.issn.1673-4130.2016.07.023 文献标识码：A 文章编号：1673-4130(2016)07-0928-03

2015-11-20)