转录因子SOX2、OCT4在卵巢上皮性癌组织中的表达及临床意义

梁家彬，孟跃进（郑州大学第二附属医院妇产科，河南 郑州 450014）

转录因子SOX2、OCT4在卵巢上皮性癌组织中的表达及临床意义

梁家彬，孟跃进*
（郑州大学第二附属医院妇产科，河南 郑州 450014）

目的 探讨转录因子SOX2和OCT4在卵巢上皮性癌组织中的表达及临床意义。方法 采用免疫组化SP法检测卵巢上皮性癌组织45例（恶性组）、良性卵巢上皮性肿瘤组织20例（良性组）、正常卵巢上皮组织15例（正常组）中SOX2、OCT4蛋白的表达，分析两蛋白的表达与卵巢上皮性癌临床病理参数的关系及二者表达的相关性。结果 SOX2、OCT4蛋白在恶性组中的阳性表达率分别为77.8%和66.7%，显著高于良性组的45%和30%和正常组的0%和0%，差异有统计学意义（P＜0.05） 。SOX2、OCT4蛋白的表达与临床分期、分化程度及淋巴结转移有关，而与病理类型无关。SOX2、OCT4蛋白在卵巢上皮性癌组织中的表达呈正相关，差异有统计学意义（rp=0.468，P＜0.05）。结论 SOX2和OCT4在卵巢上皮性癌组织中高表达，两者可能协同参与卵巢上皮性癌的发生发展。

SOX2；OCT4；卵巢上皮性癌

卵巢上皮性癌（Epithelial ovarian cancer，EOC）是妇科常见的恶性肿瘤之一，虽然临床上能够采用手术、放化疗等综合治疗方法进行治疗，但其死亡率仍居妇科肿瘤首位，其发病率也呈逐年上升趋势，因此，寻找新的诊疗方法势在必行。肿瘤干细胞是一类具有自我更新、多向分化、高致瘤性等特点的特殊类型的细胞，与肿瘤侵袭、转移、复发密切相关，近年来在乳腺癌、前列腺癌、卵巢癌等恶性肿瘤中已成功分离出了肿瘤干细胞[1]。性别决定区Y框蛋白2（SOX2）是SOX家族的成员之一，研究表明该基因在维持干细胞的多能性方面起着重要作用[2]。八聚体结合转录因子4（OCT4）在胚胎细胞中表达，是细胞分化全能性的标记，表达OCT4的细胞可能是引起肿瘤发生的起始细胞[3]。本研究通过检测SOX2、OCT4在卵巢上皮性癌中的表达变化，分析二者的相关性，探讨二者在EOC发生发展中的作用，为临床治疗寻找新的靶点。

1 材料与方法

1.1 一般材料

选取2011年8月～2015年7月我院患者的手术标本80例，患者年龄21～79岁，平均年龄53.5岁，所有患者术前均未行放化疗或激素治疗，经病理证实正常卵巢上皮组织15例，良性卵巢肿瘤20例，卵巢上皮性癌45例，其中浆液性囊腺癌27例，黏液性囊腺癌11例，子宫内膜样癌7例。按国际妇产科联盟（FIGO）分期：Ⅰ～Ⅱ期11例，Ⅲ～Ⅳ期34例；低分化25例，高、中分化20例；淋巴结转移29例，无淋巴结转移16例。

1.2 方法

1.2.1 试剂

兔抗人SOX2多克隆抗体、兔抗人OCT4多克隆抗体均购自北京博奥森生物技术有限公司。二抗及显色剂购自北京中杉金桥生物有限公司。操作步骤按说明书进行，用已知的阳性切片作阳性对照，用PBS代替一抗作阴性对照。

1.2.2 结果判定

SOX2和OCT4蛋白均表达于细胞核，以细胞核呈棕黄色或 棕褐色颗粒为阳性。在400倍光镜下随机选择5个高倍视野进行观察，按染色强度计分：无色为0分，浅黄色为1分，棕黄色为2分，棕褐色为3分；再按阳性细胞率计分，阳性细胞百分数＜10%为1分，10%～50%为2分，＞50%为3分；以上两种方法结果的乘积，积分＜3分为阴性（-），≥3分为阳性（+）。结果判定在双盲下进行，每张切片分别由3名病理科医生计数。

1.3 统计学方法

采用SPSS 17.0统计学软件对数据进行处理，计数资料采用x2检验，相关性分析采用Spearman法，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 SOX 2和OCT4蛋白在三组不同组织中的表达

SOX2和OCT4蛋白阳性染色均位于细胞核，SOX2蛋白在正常组、良性组、恶性组中的阳性表达率分别为0% （0/15）、45.0%（9/20）、77.8%（35/45），差异有统计学意义（x2=28.575，P＜0.05）；组间两两比较，差异均有统计学意义（P＜0.05)。OCT4蛋白在以上三组中的阳性表达率分别为0%（0/15）、30.0%（6/20）、66.7%（30/45），差异有统计学意义（x2=22.626，P＜0.05）；组间两两比较，差异均有统计学意义（P＜0.05）。见图1、表1。

图1 SOX2和OCT4在不同卵巢上皮组织中的表达（SP×400）注：A：SOX2；B:OCT4；1：正常组； 2：良性组；3：恶性组

表1 SOX4和OCT4在不同卵巢上皮组织中的表达 [n（%）]

2.2 SOX2和OCT4蛋白的表达 与EOC临床病理参数的关系

SOX2和OCT4蛋白的表达均与临床分期、分化程度和淋巴结转移有关（P＜0.05）；与病理类型无关（P＞0.05）。见表2。

表2 SOX2 和OCT4蛋白的表达与EOC临床病理参数的关系 [n（%）]

2.3 SOX2、OCT4蛋白表达的相关性分析

45例EOC患者中SOX2和CyclinD1蛋白表达均阳性者28例，均阴性者8例，SOX2表达阳性、OCT4表达阴性者7例，SOX2表达阴性、OCT4表达阳性者2例，两者呈正相关，差异有统计学意义（x2=10.045，P=0.002，rp=0.468）。

表3 在EOC组织中SOX2和OCT4蛋白表达的相关性

3 讨 论

SOX2是SOX（SRY-related HMG-box）家族成员之一，是胚胎干细胞表面标志物之一，在调控胚胎及组织发育，干细胞分化、增殖和决定细胞命运等方面起着重要作用[2]。近年研究发现SOX2在乳腺癌、前列腺癌、肺癌等多种实体瘤中异常表达，并与肿瘤的侵袭、转移密切相关[4]。Fang 等[5]的研究结果显示，结肠癌组织中SOX2的表达明显高于癌旁正常组织，且在结肠癌细胞系SW620中敲除SOX2基因不仅能够抑制肿瘤细胞的生长，也能够抑制小鼠异体移植模型中肿瘤的生长。Sanada Y等[6]发现，在胰腺癌的发展过程中Sox2的表达逐渐增强，尤其在分化差和浸润转移的癌组织中表达更加明显。本研究结果显示，SOX2蛋白在恶性组中的表达明显高于良性组及正常组，进一步研究发现，SOX2蛋白的表达与FIGO分期、组织分化程度及淋巴结转移有关，该结果与上述肿瘤中的研究结果相似，提示SOX2不仅参与了卵巢上皮性癌的发生，也与卵巢上皮性癌的侵袭转移密切相关。

干细胞标志物的另一重要指标OCT4基因是POU转录因子家族中的一员，不仅能够调控正常细胞的分化，也在维持胚胎干细胞的多潜能性和自我更新方面发挥极其重要的作用。目前，不仅在生殖细胞瘤中检测到OCT4的表达，也在一些上皮性肿瘤如胃癌、口腔癌、乳腺癌等许多肿瘤中检测到OCT4高表达，并与肿瘤的转移、复发、预后密切相关。本研究结果显示，OCT4蛋白在恶性组中明显高表达，与正常组及良性组比较差异有统计学意义，说明OCT4参与了卵巢上皮性癌的发生，进一步研究显示，OCT4蛋白的表达与FIGO分期、组织分化程度及淋巴结转移有关，提示OCT4还参与了卵巢上皮性癌的侵袭转移过程。

两种转录因子并不是孤立发挥作用，两者之间存在复杂的前馈调节、反馈调节和自身调节。据报道，SOX2可以同OCT4结合为异二聚体，调节Nanog、Utfl、Fbx15等转录因子的转录。本研究通过对两者的相关性进行研究发现，卵巢上皮性癌组织中两者的表达呈正相关，说明两者可能是通过协同作用促进肿瘤的发生及发展。

综上所述，SOX2和OCT4在卵巢上皮性癌中表达明显

上调，两者与卵巢上皮性癌的发生发展密切相关，可能是卵巢上皮性癌恶性程度高，呈侵袭性生长的原因之一，联合监测两者在卵巢上皮性癌中的表达，可以为临床判断卵巢上皮性癌恶性程度提供有效参考，为卵巢癌的发病机制及靶向治疗提供了新思路。

[1]Duarte S,Momier D,BaquéP,et al.Preventive cancer stem cell-based vaccination reduces liver metastasis development in a rat colon carcinoma syngeneic model[J].Stem Cells,2013,(3):423-432.

[2]Popowski M,Templeton TD,Lee BK,et al.Bright/Arid3A Acts as a Barrier to Somatic Cell Reprogramming through Direct Regulation of Oct4,Sox2,and Nanog[J].Stem Cell Reports,2014,2(1):26-35.

[3]Van Den Berg DL,Snoek T,Mullin NP,et al.An Oct4-centered protein interaction network inembryonic stem cells[J].Cell stem cell,2010,6(4):369-381.

[4]张光杰.转录因子SOX2在常见肿瘤研究中的新进展[J].重庆医学,2012,41(21):2221-2223.

[5]Fang X,Yu W,Li L,et al.ChIP-seq and functional analysis of the SOX2 gene in colorectal cancers[J].OMICS,2010,14(4):369-384.

[6]Sanada Y,Yoshida K,Ohara M,et al.Histopathologic evaluation of stepwise progression of pancreatic carcinoma with immunohistochemical analysis of gastric epithelial transcription factor SOX2: comparison of expression patterns between invasive components and cancerous or non-neoplastic intraductal components[J].Pancreas,2006,32(2):164-170.

R735.2

B

ISSN.2095-8803.2016.03.028.03

孟跃进，男，主任医师，E-mail：13838001776@163.com

梁家彬（1978-），男，黑龙江哈尔滨人，本科，主治医师，研究方向：妇产科临床与科研工作

吴玲丽

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