姜春霞,李 欣,李艳艳,周丽雅*
(1.长春中医药大学,长春 130117;2.长春中医药大学基础医学院,长春 130117)
宣痹汤对胶原性关节炎模型小鼠抗炎镇痛作用
姜春霞1,李欣2,李艳艳1,周丽雅2*
(1.长春中医药大学,长春 130117;2.长春中医药大学基础医学院,长春 130117)
摘要:目的探讨宣痹汤对胶原性关节炎模型小鼠的抗炎镇痛作用。方法取150只小鼠,随机分成5组,模型组、西药对照组、宣痹汤高、中、低剂量组,每组30只。采用小鼠醋酸扭体实验观察宣痹汤止痛作用,采用二甲苯致耳肿胀实验观察宣痹汤抗炎机制。通过建立胶原性关节炎模型,观察宣痹汤对关节炎模型小鼠足肿胀影响。结果宣痹汤高、中、低剂量组均能降低醋酸扭体次数,与对照组比较有统计学意义(P<0.05),宣痹汤可缓解耳肿胀程度,宣痹汤高、中、低剂量组均能缓解胶原性关节炎小鼠足肿胀程度,与模型组比较有统计学意义(P<0.05)。结论宣痹汤方具有较好的抗炎镇痛作用。
关键词:宣痹汤;关节炎;抗炎;镇痛
宣痹汤是《温病条辨》中的重要方剂之一[1-4],具有宣痹通络,清化湿热之功,主治湿热痹证[5-7]。研究[8-9]表明,本方具有很好的抗炎、解热作用,能麻痹骨骼肌,有镇痛功效,对改善微循环,分解关节黏连,促进组织液回流、吸收具有一定作用,能降低血尿酸,调整免疫功能。本研究对宣痹汤的抗炎镇痛作用机制进行研究。报道如下。
1材料
1.1实验动物健康7~8周ICR小鼠150只,SPF级,雄性,体质量18~22 g。购自吉林大学白求恩医学院动物实验中心,清洁级,许可证号SYXK (吉)2007-0011。采用随机数字表法,将小鼠随机分为模型组、西药组、中药高剂量组、中药中剂量组、中药低剂量组。1.2药物与试剂宣痹汤:防己15 g,杏仁15 g,滑石15 g,连翘9 g,栀子9 g,薏苡仁15 g,半夏(醋炒)9 g,晚蚕沙9 g,赤小豆皮9 g。加水浸泡30 min,先加药量8倍的水,沸腾后煎40 min,过滤取汁,再加6倍的水,沸腾后煎20 min,合并滤液,浓缩至含生药1 g/mL,4 ℃冰箱冷藏备用。弗氏完全佐剂:由百金生物公司提供。牛Ⅱ型胶原由sigma公司提供。
1.3实验仪器AEL200电子天平(日本岛津),足容积测量仪(YLS-7C),游标卡尺。
2方法
2.1动物分组、给药及造模
2.1.1醋酸扭体实验ICR小鼠50只,随机均分为5组:正常组(用10 mL/kg蒸馏水灌胃),宣痹汤高(20 g/kg)、中(10 g/kg)、低剂量(5 g/kg)组(用浓度400、200、50 g/L宣痹汤10 mL/kg灌胃),布洛芬阳性对照组(0.6 g/kg)(布洛芬颗粒水溶液10 mL/kg灌胃),正常组等量蒸馏水,灌胃给药1次/d,连续4 d,于第4天宣痹汤给药后60 min,布洛芬给药后30 min,各组灌胃0.6%醋酸溶液,以小鼠扭体反应次数为指标,记录15 min内小鼠扭体反应的次数。
2.1.2二甲苯致耳肿胀实验 ICR小鼠50只,随机均分为5组:正常组,宣痹汤高、中、低剂量组,强的松阳性对照组(0.01 g/kg),按照各个剂量组的浓度,以0.1 mL/10 g为小鼠灌胃给药,给药1次/d,连续7 d。第7天给药1 h后,在小鼠左耳均匀涂抹0.05 mL二甲苯,右耳做空白对照,不做处理。涂抹2 h后将小鼠颈椎脱臼法处死,沿耳廓基线剪下双耳,用直径8 mm的打孔器分别在小鼠左右耳同一部位各打下圆耳片,称重。
2.1.3胶原性关节炎模型将牛Ⅱ型胶原溶解于0.05 mol/L冰醋酸中,浓度为2 mg/mL,将溶解的胶原与弗氏完全佐剂等体积混合,冰浴中使用注射器将其充分乳化。在小鼠尾根部沿脊柱多点皮内注射混合乳剂0.1 mL。初次免疫后第21天以同样方法加强免疫1次,尽量避开初次免疫部位。正常组小鼠以同样方法皮内注射同体积生理盐水。按照建立模型成功指标确定模型建立成功后,检测宣痹汤对关节炎模型足肿胀的影响。
3结果
3.1宣痹汤对胶原性关节炎足肿胀的影响见表1。
表1 宣痹汤对胶原性关节炎足肿胀的影响±s,n=10)
注: 与模型组比较,#P<0.05
3.2宣痹汤对醋酸扭体的影响见表2。
表2 宣痹汤对醋酸扭体的影响±s,n=10)
注:与模型组比较,#P<0.05
3.3宣痹汤对耳肿胀的影响见表3。
表3 宣痹汤方对小鼠耳肿胀的影响±s,n=10)
注:与模型组比较,#P<0.05
4小结
宣痹汤中以防己为主药,配用于片姜黄、海桐皮宣络用于提高止痛效果,入经络而祛经络之湿,薏苡仁则具有行痹止痛之功,辅主药除痹之功;配伍杏仁开宣肺气、通调水道,助水湿下行,通痹止痛;滑石利湿清热,赤小豆、薏苡仁淡渗利湿,引湿热从小便而解,使湿行热祛;半夏、蚕砂和胃化浊,制湿于中,蚕砂尚能祛风除湿、行痹止痛;栀子、连翘消除体内火气、清热解毒,助解骨节热炽烦痛。全方通络、祛湿、清热,分消走泄,配伍周密严谨[10-13]。本实验结果显示宣痹汤具有抗炎镇痛作用,对实验性胶原性关节炎具有明显疗效。
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Xuanbi Decoction on anti-inflammatory and analgesic effects of collagen induced arthritis model
JIANG Chunxia1,LI Xin2,LI Yanyan1,ZHOU Liya2*
(1.Changchun University of Chinese Medicine,Changchun 130117,China;2.Basic Medical College,Changchun University of Chinese Medicine,Changchun 130117,China)
Abstract:ObjectiveTo investigate the effect of Xuanbi Decoction on anti-inflammatory and analgesic effects in mice.MethodsThe 150 mice were randomly divided into five groups,model group,western medicine control group,Xuanbi Decoction high,medium and low dose group,30 rats in each group.The analgesic effect of Xuanbi Decoction was observed by mice acetic acid twisting test,and the anti-inflammatory mechanism of Xuanbi Decoctionwas observed by mice ear edema which was caused by dimethylbenzene.Through the establishment of collagen induced arthritis model,to observe the effect of Xuanbi Decoction of arthritis model mouse foot swelling effect.ResultsXuanbi Decoction high,medium and low dose group can reduce the frequency of acetic acid twisting,compared with the control group,the difference is significant (P<0.05).Xuanbi Decoction can ease the extent in mice ear edema.Xuanbi Decoction high,medium and low dose group can ease the collagen of joint inflammation in mice hind paw edema,compared with the model group,the difference is significant (P<0.05).ConclusionXuanbi Decoction has a better therapeutic effect on anti-inflammatory and analgesic effects.
Keywords:Xuanbi Decoction;arthritis;anti-inflammatory;analgesia
收稿日期:(本栏责任编辑:张海洋2015-10-26)
文章编号:2095-6258(2016)02-0250-03
中图分类号:R285.5
文献标志码:A
*通信作者:周丽雅,女,教授,硕士研究生导师,电话-(0431)81672305,电子信箱-1084261366@qq.com
作者简介:姜春霞(1989-),女,硕士研究生,主要从事中药抗风湿研究。
基金项目:吉林省教育厅课题(吉教科合字[2015]第347号 );吉林省中医药管理局课题(2014-ZC20);吉林省卫生计生委科研计划项目(2012Z014)。
DOI:10.13463/j.cnki.cczyy.2016.02.010