胱抑素C和NGAL与先天性心脏病患儿术后急性肾损伤的相关性研究

刘会琼?范太兵?袁心刚

【摘要】 目的 探讨胱抑素C和中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（NGAL）与先天性心脏病患儿术后急性肾损伤的相关性。方法 100例接受先天性心脏病手术的患儿， 根据患儿术后是否发生急性肾损伤分为研究组（发生肾损伤）和对照组（未发生肾损伤）， 各50例。对比两组手术时间、体外循环时间、术中尿量及手术前、手术后NGAL 及胱抑素 C水平。结果 两组手术时间、体外循环时间及术中尿量比较， 差异无统计学意义（P>0.05）。两组手术前NGAL 及胱抑素C水平比较， 差异无统计学意义（P>0.05）；两组手术后NGAL 及胱抑素 C水平比较， 差异有统计学意义（P<0.05）。结论 胱抑素C和NGAL水平的测定对预测先天性心脏病患儿术后急性肾损伤有较好的诊断价值。

【关键词】 胱抑素C；中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白；肾损伤

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2016.10.023

急性肾损伤是围手术期一种常见的并发症， 主要原因与肾脏血流低灌注氧供减少有关。病理上可以看到近端小管刷状缘脱失， 导致管型形成、小管梗阻， 肾小球滤过率下降。目前还有学者指出急性肾损伤有炎症机制、凝血功能异常的参与。急性肾损伤患者预后差， 死亡率高达24%～70%。有学者指出NGAL、胱抑素C是预测急性肾损伤理想的生物标志物[1]。因此作者拟收集接受先天性心脏病手术的患儿， 探讨胱抑素C和NGAL测定的价值。现报告如下。

1 资料与方法

1. 1 一般资料 收集2009年2月～2013年2月接受先天性心脏病手术的100例患儿， 手术类型为室间隔或房间隔缺损修补术、动脉导管封堵术等。根据患儿术后是否发生急性肾损伤分为研究组（发生肾损伤）和对照组（未发生肾损伤）， 每组50例。研究组年龄5个月～2岁， 男24例， 女26例。对照组年龄5个月～2岁， 男29例， 女21例。两组患儿一般资料比较差异无统计学意义（P>0.05）， 具有可比性。

1. 2 入选及排除标准 纳入标准： ①术前经多普勒超声心动图检查确诊为先天性心脏病， 年龄<14周岁；②心功能Ⅰ～Ⅲ级。排除标准：研究时脑、肝、肾等重要脏器功能不全者。

1. 3 观察方法 对比两组手术时间、体外循环时间、术中尿量及两组手术前、手术后NGAL 和胱抑素 C水平。

1. 3. 1 NGAL 的测定方法 用纯化的人NGAL抗体包被微孔板， 制成固相抗体， 加入TMB底物、酶标试剂50 μl， 酶标仪测定450 nm波长下的吸光度， 通过计算机测定NGAL浓度。

1. 3. 2 胱抑素C的测定方法 用纯化的人半胱氨酸蛋白酶抑制蛋白C抗体包被微孔板， 制成固相抗体， 加入HRP酶、稀释液50 μl， 在酸的作用下转化成最终的黄色。用酶标仪在450 nm波长下测定吸光度， 通过计算机测定胱抑素 C浓度。

1. 4 统计学方法 采用 SPSS15.0统计学软件进行统计分析。计量资料以均数±标准差（ x-±s）表示， 采用t检验；计数资料采用χ2检验。 P<0.05表示差异具有统计学意义。

2 结果

2. 1 两组手术时间、体外循环时间及术中尿量比较 两组手术时间、体外循环时间及术中尿量比较， 差异无统计学意义（P>0.05）。见表1。

2. 2 两组手术前、手术后NGAL 及胱抑素 C水平比较 两组手术前NGAL 及胱抑素 C水平比较， 差异无统计学意义（P>0.05）；手术后两组NGAL 及胱抑素C水平比较， 差异有统计学意义（P<0.05）。见表2。

3 讨论

急性肾损伤是心脏手术和心肺体外循环一种常见的严重并发症。如果在刚出现肾损伤时即进行干预， 则可防止向肾损伤发展并延缓其发展速度， 因此早对急性肾损伤诊断非常重要。

有研究在1981年检测了人胱氨酸蛋白酶抑制剂C的氨基酸系列， 经过20多年的研究， 人胱氨酸蛋白酶抑制剂家族目前已有明确11种蛋白组成。胱抑素C是一个13 kD的半胱氨酸蛋白酶抑制剂， 可在肾小球自由过滤。正常情况下胱抑素C通过肾小球滤过膜， 几乎完全被肾小管重吸收且不被分泌。有学者指出胱抑素C比血肌酐能更敏感地反映肾功能受损的情况。还有学者指出胱抑素C是反映肾小球滤过率的主要标志， 在肾小球滤过率开始下降时胱抑素C血药浓度会明显上升[2]。当肾小球出现轻微损伤时血中胱抑素C浓度即可出现升高。一项荟萃分析显示血清胱抑素C对临界值各不相同（0.80～2.04 mg/L）。还有人应用免疫染色与免疫杂交法发现急性肾损伤的患者体内胱抑素C水平升高后， 可通过氧化应激诱导血管内皮细胞、单核细胞表达趋化因子， 而趋化因子在炎症反应中起重要作用。目前胱抑素C的测定方法主要采用改良免疫比浊分析法， 其优势为整个分析过程只需2～3 min， 而且不受标本是否溶血和脂血的影响。

NGAL是 lipocalin 超家族的一员， 分子量为25 kD， 其有类似于转铁蛋白的铁转运功能， 可被早期的原始肾小管上皮细胞摄取， 不受年龄、性别、摄食和炎症等的影响。从中性粒细胞内提纯出的低分子蛋白。有学者指出在早期急性肾功能损伤时血、尿NGAL浓度通常会迅速升高， 2 h最为明显（ 比临界值升高几十至几百倍） ， 血清肌酐、尿酶等传统指标往往要在24～72 h后才明显升高， 因而NGAL可用于急性肾功能的早期诊断。还有学者指出尿NGAL 每升高100 ng/ml， 肾移植患者发生肾功能延迟恢复的几率就增加20%。研究显示在急性肾损伤时NGAL会大量地出现在髓袢升支粗端和集合管[3]。除此之外还有学者指出心脏手术后， 静脉注入造影剂后， 尿NGAL升高比血肌酐提前1.2 d， 而且术后2 h尿NGAL的受试者工作曲线为0.998。美国辛辛那提研究组发现心脏手术2 h尿中NGAL增加与体外循环时间、主动脉阻断时间之间显著相关[4]。还有学者认为儿童心脏术后发生急性肾衰竭的患儿在术后2 h血、尿NGAL水平可明显升高， 表明血清NGAL水平与尿白蛋白排泄率相关， 与肾损害的严重程度相一致。

综上所述， 胱抑素C和NGAL水平的测定对预测先天性心脏病患儿术后急性肾损伤有较好的诊断价值。

参考文献

[1] 梁馨苓， 叶智明， 史伟， 等. 急性肾衰竭453例病因治疗与预后关系分析. 新医学， 2011， 36（9）：533-534.

[2] 徐美英， 朱文忠. 心脏手术中的肾脏保护. 国际麻醉学与复苏杂志， 2000（2）：80-83.

[3] 王怀斌， 甄文俊， 佟宏峰， 等， 两种冠状动脉旁路手术方式对老年患者肾功能的影响. 中华老年医学杂志， 2013， 25（6）：438-442.

[4] Pak O， Aldashev A， Welsh D， et al. The effects of hypoxia on the cells of the pulmonary vasculature. Eur Respir J， 2012， 30（2）：364-372.

[收稿日期：2015-11-25]