綦江木瓜中齐墩果酸和熊果酸含量的HPLC分析

邓才富　谭秋生　罗　舜　罗　川　章文伟　杨永东　徐　广

重庆市药物种植研究所，重庆　南川　408435



綦江木瓜中齐墩果酸和熊果酸含量的HPLC分析

邓才富谭秋生罗舜罗川章文伟*杨永东徐广

重庆市药物种植研究所，重庆南川408435

【摘要】目的：考察綦江木瓜各主产区域不同药材样品中熊果酸与齐墩果酸含量差异。方法：采集綦江木瓜主产乡镇的皱皮木瓜样品，置沸水中烫至外皮灰白色取出，切制为2～4 mm厚片，50 ℃恒温干燥后粉碎，采用高效液相色谱法测定熊果酸与齐墩果酸含量。结果：綦江木瓜11批药材样品中，熊果酸和齐墩果酸的含量总和最高的是打通镇大罗村的样品，含量为0.651%，最低的是三角镇木瓜海棠园的长俊木瓜和渝綦木瓜，分别为0.375%和0.378%；熊果酸含量规律与熊果酸和齐墩果酸的含量总和相一致，齐墩果酸含量则有所差异。结论：不同产区所产木瓜药材在熊果酸和齐墩果酸两个指标成分的含量上有较大的差异，同一区域不同品种间也有一定的差异；同一品种在不同的产地或海拔条件下熊果酸与齐墩果酸比值有较大地差异，同一区域不同品种间也有一定的差异。

【关键词】皱皮木瓜；熊果酸；齐墩果酸；栽培类型

皱皮木瓜为蔷薇科植物贴梗海棠Chaenomeles speciosa (Sweet) Nakai干燥近成熟果实[1-2]。具有平肝和胃，舒筋络，活筋骨，降血压等功效，是治疗高血压、高血脂、风湿等疾病的良药。重庆市为川木瓜的主要产区[3]，以綦江区木瓜种植面积最大[4]，是农业部中国果菜专家委员会授予綦江区“中国优质木瓜之乡”、“中国木瓜科技创新示范区”。由于全区木瓜分布广，各地海拔高度和地质背景有所不同，为了能够整体掌握綦江木瓜的质量状况，项目组通过全区木瓜种植状况的调研后，采集各主产乡镇及主要栽培类型的木瓜样品，开展熊果酸和齐墩果酸的含量的HPLC分析，以期为产区木瓜的质量评价和产业链延伸提供科学依据。

1仪器与材料

1.1试剂和试药熊果酸(批号：110742-201421)、齐墩果酸(批号：110709-201206)购自中国食品药品检定研究院。甲醇为色谱纯，水为超纯水，其余试剂均为分析纯。

皱皮木瓜样品于2015年8月12～13日，采集于重庆市綦江区石角镇、三角镇、石壕镇、打通镇等木瓜主产乡镇，鉴定为贴梗海棠Chaenomeles speciosa(Sweet) Nakai的果实。木瓜样品情况如表1所示。

表1　綦江木瓜样品采集情况

1.2仪器岛津LC-20AT高效液相色谱仪(LC solution色谱管理处理软件、CTO-20A柱温箱、SIL-20A自动进样器、SPD-M20A二极管阵列检测器、CBM-20ALite系统控制器)；METTLER AL104型电子天平；KQ-1000DE型数控超声波清洗器；Molecular标准智能型纯水机。

2方法与结果

2.1样品加工采收鲜木瓜样品，置沸水中烫至外皮灰白色(5min左右)，取出，切制为2～4mm厚片，置50℃恒温干燥箱中干燥后粉碎成细粉待用。

2.2齐墩果酸、熊果酸含量测定

2.21色谱条件色谱柱：SHISEIDO CAPCELL PAK C18 MGⅡ色谱柱(4.6mm×250mm×5μm)；流动相：甲醇-水-冰醋酸-三乙胺(84:16:0.1:0.05)；检测波长：210 nm；流速：0.6ml/min；柱温：30 ℃；理论塔板数按齐墩果酸峰计应不低于5000。

2.2.2对照品溶液的制备取齐墩果酸对照品、熊果酸对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含齐墩果酸0.102mg、熊果酸0.103mg的混合溶液，即得。

2.2.3样品溶液的制备取样品细粉约0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，密塞，称定重量，超声处理(功率400 W，频率40 kHz)20min，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，再用孔径0.45μm微孔滤膜滤过，即得。

2.2.4测定法分别精密吸取对照品溶液与样品溶液各20μl，注入液相色谱仪，测定。取供试11批木瓜样品，分别准确吸取对照品溶液和样品溶液各10μl，在上述色谱条件下采集色谱图，对照品溶液HPLC图见图1，11批木瓜药材HPLC色谱叠加图如图2。

2.3綦江木瓜样品中熊果酸与齐墩果酸含量及比较根据不同批次样品的吸收峰峰面积差异，计算出11批采收期的皱皮木瓜样品中熊果酸与齐墩果酸含量，见表2。

由表2可知，本研究所采集11批木瓜样品中，熊果酸和齐墩果酸的含量总和最高的是采自打通镇大罗村的样品，含量0.651%，品种为綦江木瓜，从调查掌握的资料来看到，该村为綦江木瓜分布较高的区域，海拔1200 m以上，其余分布区域都在500～800 m范围，是否海拔高度影响了指标成分的含量有待进一步探索。熊果酸和齐墩果酸的含量总和最低的是采自三角镇木瓜海棠园的长俊木瓜和渝綦木瓜，分别为0.375%和0.378%，此二种木瓜果型较大，产量较高。熊果酸含量规律与熊果酸和齐墩果酸的含量总和相一致；齐墩果酸含量则有所差异，最高的是打通镇大罗村产的宣木瓜(20世纪70年代引种)，当地农民称为药木瓜，以区别于普遍在近年大面积发展的正安野木瓜。綦江木瓜不同主产乡镇和品种样品中熊果酸、齐墩果酸含量变化趋势如图3所示。

表2　綦江木瓜中熊果酸和齐墩果酸含量分析结果

不同加工方法对木瓜样品中熊果酸和齐墩果酸的含量有所影响，在石角镇强干村采集的样品中，按药典要求烫煮加工后，熊果酸和齐墩果酸含量总和低于直接生切晒干的样品，而熊果酸与齐墩果酸比值则相反；采自打通镇吹角村的样品也以烫煮加工后熊果酸和齐墩果酸含量总和最低，生切后50℃恒温干燥品中熊果酸和齐墩果酸含量总和高于药农生切摊晾样品，表明快速干燥有利于指标成分的稳定。

3讨论

根据对綦江产区的调研后采集各主产乡镇及主要栽培类型的木瓜样品，开展熊果酸和齐墩果酸的含量的HPLC分析，以便对重庆市綦江区木瓜药材的总体情况作一个深入了解，结果表明，不同产区所产木瓜药材在熊果酸和齐墩果酸两个指标成分的含量上有较大的差异；同一区域不同品种间也有一定的差异，在生产中应做好适地适种的合理规划。

本研究就药材样品的熊果酸与齐墩果酸比值做了比较，表明同一品种在不同的产地或海拔条件下熊果酸与齐墩果酸比值有较大地差异；同一区域不同品种间也有一定的差异；同一品种不同的加工处理方式对指标成分的含量也有较大地影响，为了保证药材质量的稳定和可控，产地加工的规范和统一是应该特别受到重视和引导的。

目前，綦江区木瓜种植面积有近10万亩，且多数已达量产水平，若以熊果酸与齐墩果酸为指标成分考察，总体情况不容乐观，应加强其它功能性成分的研究和开发，使木瓜真正成为农民增收致富的持续稳定经济来源。

参考文献

[1]南京中医药大学.中药大辞典(第二版)[M].上册.上海：上海科学技术出版社，2006.

[2]国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[M]..北京：中国医药科技出版社，2010:57.

[3]四川省中医药研究院南川药物种植研究所.四川中药材栽培技术[M].重庆：重庆出版社，1988:566.

[4]罗思源.綦江木瓜资源圃木瓜品种的形态学鉴定和指纹图谱分析[D].重庆：西南大学,2015.

(收稿日期：2015.12.24)

【中图分类号】R284.1

【文献标志码】A

【文章编号】1007-8517(2016)05-0015-03

作者简介：邓才富(1971-)，男，副研究员，主要从事生态环境与药材质量研究。E-mai:dcf0509@126.com通信作者：章文伟(1976-)，男，副研究员，主要从事道地药材质量分析与评价。E-mail:22318023@qq.com

基金项目：重庆市科技攻关项目(CSTC2012gg-yyjs10064)；重庆市基本科研业务费资助项目(2015cstc-jbky-01329)。