HCV RNA、HCVAb及HCVcAg对丙型肝炎的诊断价值

涂业桃，温先勇，黄　丽

(泸州医学院附属医院:1.输血科；2.检验科，四川泸州 646000)



·临床研究·

HCV RNA、HCVAb及HCVcAg对丙型肝炎的诊断价值

涂业桃1，温先勇2，黄丽2

(泸州医学院附属医院:1.输血科；2.检验科，四川泸州 646000)

摘要:目的通过检测丙型肝炎(丙肝)患者丙肝病毒(HCV) RNA、HCVAb及HCVcAg 3项指标，评估三者在丙肝诊断中的价值。方法对临床诊断为丙肝的80例患者以及50例非丙肝感染者的血清进行HCV RNA、HCVAb以及HCVcAg检测。结果80例丙肝患者中，HCV RNA、HCVAb、HCVcAg 阳性率分别为87.5%、81.3%、30.0%；试验组中，HCV RNA、HCVAb以及HCVcAg三种检测项目之间检测结果差异具有统计学意义(P<0.05)；HCV RNA、HCVAb、HCVcAg三项实验敏感性分别是87.5%、81.3%、30.0%，特异性分别是98.0%、92.0%、96%，阳性预测值分别是98.6%、94.2%、93.2%。结论在诊断丙肝的三项检测指标中，HCV RNA 检测对丙肝诊断的敏感性、特异性及准确度最好；HCVAb检测次之，HCVcAg检测较差。

关键词:丙型肝炎；HCV RNA；HCVAb；HCVcAg

据WHO统计，自1989年丙型肝炎(丙肝)被发现以来，全球约1.7亿至2.0亿人感染丙肝病毒(HCV)，感染率为3%[1]。丙肝是严重威胁人类健康的传染病之一，主要经血或血制品传播，与乙型肝炎相比早期的临床症状较轻，但是其较乙型肝炎易早期出现肝硬化，导致肝癌，病死率高，预后不良，目前尚无理想的特效药物和治疗措施，因此HCV的检测对HCV感染的早期诊断和临床治疗显得尤为重要。同时HCV作为献血筛查的主要项目，在保证临床输血和血液制品安全方面有着重要作用。本文旨在通过对HCV抗体(HCVAb)、HCV RNA以及HCV核心抗原(HCVcAg)的评估，为丙肝的临床诊治提供依据。

1资料与方法

1.1一般资料选取2013年1月至2014年4月泸州医学院附属医院门诊及住院部通过HCV RNA、HCVcAg或HCVAb检测阳性确诊为丙肝的患者80例(试验组)，年龄18～80岁，其中男57例、女23例，排除甲、乙、丁、戊等其他病毒性肝炎及其他免疫性疾病。50例健康对照(健康对照组)来自同期体检人员，其中男27例、女23例，年龄18～80岁，体检生化指标无明显异常，无其他感染或免疫性疾病。

1.2仪器与试剂

1.2.1仪器DR-200BS酶标仪(无锡华卫德朗仪器有限公司)，CFX960荧光定量分析系统(美国 BIO RAD)。

1.2.2试剂HCVcAg试剂盒(山东莱博)，HCVAb试剂盒(北京万泰生物药业)，HCV RNA试剂盒(深圳凯杰生物工程公司)。具体操作严格按说明书进行。

1.3方法分别检测各组血清HCV RNA、HCVAb及HCVcAg。HCVAb及HCVcAg采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测，HCV RNA采用PCR检测。

1.4统计处理采用SPSS20.0软件进行相关统计学分析，计数资料以率表示，两两比较采用χ2检验，以P<0.05为差异有统计学意义。

2结果

2.180例丙肝患者中，HCV RNA、HCVAb、HCVcAg阳性率分别为87.5%、81.3%、30.0%。80例患者及50例健康对照HCVcAg、HCVAb、HCV RNA检测结果见表1。

表1　　HCVcAg、HCVAb、HCV RNA检测结果

表2　　试验组HCVcAg与HCVAb检测结果分析比较*1(n)

*1:χ2=28.07,P<0.05,试验组与HCVcAg与HCVcAb检测结果比较。

表3　　试验组HCVcAg与HCV RNA检测结果分析比较*1(n)

*1:χ2=43.58，P<0.05,试验组与HCVcAg与HCVcRNA检测结果比较。

表4　　试验组HCV RNA与HCVAb 检测结果分析比较*1(n)

*1:χ2=10.45，P<0.05,试验组与HCV RNA与HCV Ab检测结果比较。

2.280例丙肝患者中HCVcAg、HCVAb、HCV RNA三种检测项目之间检测结果差异具有统计学意义(P<0.05)。其中，HCVcAg与HCVAb比较，χ2=28.07，P<0.05；HCVcAg与HCV RNA比较，χ2=43.58，P<0.05；HCVAb与HCV RNA比较，χ2=10.45，P<0.05。见表2～4。

2.33项试验的方法学评价见表5。

表5　　3项试验方法学评价

3讨论

HCV是多变异病毒，在同型各株间，甚至同一患者不同时期分离的克隆之间亦有差异，基因序列的差异将导致编码产物抗原的不同[2-4]。目前临床用于检测HCV感染的指标主要有HCVAb、HCVcAg及HCV RNA检测。这3种指标在HCV感染的临床诊断、指导治疗和疗效监测等方面起到关键作用，但都存在一定的局限性。目前，各研究结果表明，HCVcAg与HCVAb、HCV RNA在联合诊断丙肝上有互补作用[5]。

HCVAb检测是目前各级医院最早、最常用的检测方法，HCVAb检测筛查和对疾病的诊断，使输血后丙肝的发生率大大降低。本研究表明：在HCVAb阳性的患者中，具有病毒复制(病毒RNA阳性)的约为55/65(84.6%)，部分并没有病毒血症的存在，同时，在HCVAb阳性的人群中其HCVcAg检测阳性的比例为24/65(36.9%)，表明在抗体检测阳性的人群中全部进行核酸定量检测可能会浪费大量的医疗资源。因此，对于HCVAb阳性的人群，可以选择先进行HCVcAg的检测，在有必要的基础上再进行核酸的定量分析[6]。本试验检测结果分析显示：HCV RNA、HCVAb阳性率分别为87.5%、81.3%，说明有6.25%的HCV感染者为HCV RNA阳性，HCVAb阴性。对于这种情况，分析其可能原因如下：(1)HCV感染后，HCVAb产生前存在一个较长的窗口期，如果检测在窗口期的话，则可能为HCV RNA阳性，HCVAb阴性。(2)在一些免疫缺陷患者或在使用免疫抑制剂治疗的患者则不能检测出HCVAb[7]。(3)在某些HCV感染恢复期的患者或者免疫功能低下的HCV感染者中，HCVAb可能会逐渐下降到检测限以下或持续阴性，这时HCV RNA的检测是感染HCV的唯一证据[8]。(4)由于HCV具有高度的变异性，加上我国应用ELISA进行HCV检测的试剂盒及试剂抗原来源各异，致使HCVAb阳性率有较大差别[6]。

HCVcAg是HCV感染后最早出现在血清中的，它的检测能更早地发现HCV的感染，为患者争取更早的诊断和治疗时间[6]。部分文献结果显示HCVcAg检测与HCV RNA符合率为92.85%[2]，说明了HCVcAg检测间接反映了HCV复制，可有效预防窗口期感染。本试验HCVcAg阳性率较低，为30.0%，HCVcAg与HCV RNA检测经χ2检验其差异有统计学意义(P<0.05)，与国外的报道结果稍有差异。其可能原因分析如下：(1)HCV感染后患者体内产生的抗体可与游离的HCVcAg形成抗原抗体复合物，HCV核心抗原抗体复合物在预处理时解离不完全可影响HCVcAg的检出[4]。(2)由于HCV在机体复制增殖时，存在HCVcAg和HCVAb浓度相互主导转换的一个过程。感染初期，机体内存在一定浓度的HCVcAg，刺激机体产生HCVAb，几乎所有的游离HCVAb与HCVcAg结合成免疫复合物，此时抗原过量，而酶联免疫法只能检测游离状态的HCVAb或HCVcAg，因此HCVAb检测为阴性，HCVcAg为阳性。随着病程的进展HCVAb浓度增高，游离HCVcAg浓度下降，抗体和抗原结合，机体内仍存在一定浓度游离的HCVAb，可被酶联免疫法检测出来，此时HCVAb和HCVcAg的检测均为弱阳性。随着病程的进一步发展，HCVAb继续升高，体内的绝大部分HCVcAg与HCVAb结合形成免疫复合物，游离的HCVcAg低于检测下限转为阴性，而HCVAb的浓度进一步升高，HCVAb检测才为阳性[7]。(3)抗原出现较早者或与抗体结合而检测不出抗原存在。抗体出现及消失均晚，恢复期患者抗原消失而抗体仍然存在[8]。(4)HCV是一种极易发生突变的RNA病毒，由于其基因突变率高，导致丙肝的抗原变异性大[7]。5) HCV RNA阳性血清中还有髙滴度的HCV抗体，干扰HCVcAg的检测而导致假阴性结果[5]。

HCV RNA检测可以反映病毒的复制和传染性，是诊断HCV的“金标准”，可以缩短感染后血清阳转前的检测窗口期，以实现HCV感染的早期诊断。对于本研究中的80例丙肝患者，有12.5%的患者为HCV RNA阴性。分析其可能原因如下：(1)部分患者在进行抗病毒治疗时，干扰和抑制了HCV RNA的复制。(2)HCV RNA易被血细胞中的RNA酶降解，降低检出率[4]。(3)部分标本中HCV RNA水平低于试剂盒的检出限。(4)血液中存在高浓度的蛋白酶和RNA酶，可能引起标本RNA有降解。

本次研究中，HCV RNA的特异性和敏感性均好，已能够满足临床对丙肝的诊断要求；HCVcAg检测敏感性稍差，并且在体内存在的时间较短，单项检测对于非早期HCV感染者的漏诊率较高。因此HCVAb、HCVcAg两者联合检测对于丙肝诊断的价值更大。

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(收稿日期：2016-01-20)

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.06.038

文献标识码：A

文章编号：1673-4130(2016)06-0805-02