尿液胱抑素C和NGAL联合检测在IgA肾病诊断中的应用*1

张春雷，曾学辉，李忠新

(深圳市中医院检验科，广东深圳 518083)



·临床研究·

尿液胱抑素C和NGAL联合检测在IgA肾病诊断中的应用*1

张春雷，曾学辉，李忠新

(深圳市中医院检验科，广东深圳 518083)

摘要:目的探讨尿胱抑素C(Cys C)和嗜中性粒细胞明胶酶相关脂质转运蛋白(NGAL)联合检测在IgA肾病诊断中的应用。方法选择IgA肾病患者71例，Lee氏分级为Ⅰ级12例、Ⅱ级20例、Ⅲ级17例、Ⅳ级13例、Ⅴ级9例；同时选取65例健康体检者为健康对照组。酶联免疫吸附试验(ELISA)测定尿NGAL水平，免疫比浊法检测尿Cys C水平。结果IgA肾病早期患者尿Cys C及NGAL水平升高，与健康对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05)；随着IgA肾病的进展，尿Cys C及NGAL水平逐渐增高，且各组间差异均有统计学意义(P<0.05)；尿Cys C水平与血液肌酐水平呈正相关(r=0.782，P<0.01)；尿NGAL水平与血液肌酐水平呈正相关(r=0.701，P<0.01)。结论尿Cys C和NGAL水平不但可以早期诊断IgA肾病的发生，还可以监测IgA肾病的进展。

关键词:IgA肾病；胱抑素C；嗜中性粒细胞明胶酶相关脂质转运蛋白

IgA肾病是最为常见的一种原发性肾小球疾病，典型IgA肾病患者的临床表现为反复发作性肉眼血尿或镜下血尿，可伴有不同程度蛋白尿，部分患者可以出现严重高血压或者肾功能不全，但大部分患者早期并没有表现出相应的临床症状，造成了临床IgA肾病的漏诊，其真实发病率可能更高[1]。IgA肾病患者预后差，20%～40%的患者在10～20年的时间内会进行性发展为终末期肾病，IgA肾病患者病死率约是正常人群死亡率的2倍[2-3]，早期准确的诊断对于临床治疗和患者预后有重要意义。

为探讨IgA肾病的实验诊断手段，本文通过对尿液中胱抑素C (Cys C)和嗜中性粒细胞明胶酶相关脂质转运蛋白(NGAL)的检测，对其在IgA肾病早期诊断中的应用价值进行探讨。现报道如下。

1资料与方法

1.1一般资料选取2010年6月至2013年11月在本院诊治并经肾活检确诊的71例IgA肾病患者，其中男45例，女26例；年龄22～65岁，平均(46.2±12.5)岁；Lee 氏分级：Ⅰ级12例，Ⅱ级20例，Ⅲ级17例，Ⅳ级13例，Ⅴ级9例。排除各种原发性及继发性肝病、病毒性肝病、急性肾衰竭和肾移植术后患者。同时选取65例健康人为健康对照组,其中男42例，女23例；年龄27～65岁，平均(41.4±9.5)岁。健康对照组与各组研究对象在性别、年龄差异无统计学意义(P>0.05)。

1.2试剂与仪器检测NGAL的酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒购于美国R&D公司；检测Cys C采用北京利德曼生化股份有限公司试剂；血肌酐(SCr)、尿肌酐(Ucr)检测采用Roche原装试剂，检测仪器为Roche-cobas6000全自动生化分析仪检测。

1.3方法留取清晨研究对象的新鲜尿液标本，以1 000×g离心15 min，取上清液置于-80 ℃冰箱保存集中检测。采用ELISA检测尿液NGAL的浓度，实验步骤严格按试剂盒说明书进行操作；尿液Cys C免疫比浊法检测；SCr、Ucr采用酶法检测。尿NGAL和Cys C检测结果同步Ucr校正后表示。

2结果

2.1尿Cys C和NGAL水平与IgA肾病进展关系IgA肾病Ⅰ级患者尿液Cys C和NGAL水平出现升高，且与健康对照组相比差异均有统计学意义(P<0.05)；随着IgA肾病病情的发展，Cys C和NGAL逐步升高，各组间相比差异均有统计学意义(P<0.05)。表明尿液Cys C和NGAL是肾脏早期损害的标志物，并随着病情的进展而进行性的升高。结果见表1。

表1　　尿Cys C和NGAL水平与IgA肾病进展关系

a：P<0.05，与健康对照组比较；b：P<0.05，与IgA肾病Ⅰ级比较；c：P<0.05，与IgA肾病Ⅱ级比较；d：P<0.05，与IgA肾病Ⅲ级比较；e：P<0.05，与IgA肾病Ⅳ级比较。

2.2尿Cys C和NGAL水平与SCr相关性分析Spearman相关性分析显示，尿Cys C水平与SCr呈正相关(r=0.782，P<0.01)；尿NGAL水平与SCr呈正相关(r=0.701，P<0.01)。

3讨论

IgA肾病诊断的金标准是肾穿刺活检，但肾活检为一项有创性检查，重复肾活检患者较难接受，不便于经常性检测，其临床应用受到限制，也是部分早期无典型临床症状患者漏诊的主要原因[1]，影响了临床早期诊断和疗效监控。因此寻找能反映IgA肾病病变程度和预后的无创生物标志物具有重要意义。

Cys C是一种小相对分子质量的胱氨酸蛋白酶抑制剂，在所有有核细胞表达并持续性分泌，不依赖任何外来因素如性别、年龄、饮食的影响。循环中的Cys C仅经肾小球滤过而被清除，并在近曲小管重吸收，但重吸收后被完全代谢分解，无肾小管分泌，是一种反映肾小球滤过率变化的内源性标志物[4]。尿液中Cys C的浓度不仅与血清Cys C和SCr具有良好的相关性，而且测定尿液中Cys C方便、快捷、无创伤，适合反复取样检查。本研究结果显示，IgA肾病各组尿液Cys C水平与健康对照组相比显著升高，并随着病程的进展而进行性升高。表明尿液Cys C水平对IgA肾病患者早期肾损害有重要的诊断价值，并且其水平与血液肌酐水平有着良好的相关性，同时检测可为临床肾功能的评估和治疗方案的确定提供更可靠的诊疗依据。

NGAL又被称为脂质运载蛋白-2，为一种分泌性糖蛋白，NGAL基因位于常染色体9q34上，全长5 869 bp，NGAL蛋白由一条多肽链构成，含有178个氨基酸残基，相对分子质量为25×103。有研究发现NGAL与肾脏关系密切，其主要表达于近端小管[5]。在肾脏急、慢性病变过程中，NGAL因肾小管上皮细胞受到损伤性刺激大量分泌，通过诱导肾小管间质中浸润的中性粒细胞发生凋亡以保护肾组织免受炎性细胞的侵害，同时可诱导肾小管上皮细胞再生修复。多项研究表明NGAL可以作为急性肾损伤早期可靠的诊断指标[6-8]，其正常情况下肾脏组织很少表达，在肾脏急性缺血再灌注后,肾小管上皮细胞产生并分泌一系列与免疫反应相关的物质，其中NGAL 浓度迅速升高，可能与肾小管间质中浸润的中性粒细胞发生凋亡有关[9-10]。本研究结果显示：尿NGAL水平在IgA肾病Ⅰ级开始升高，并随着IgA肾病的进展而逐步增加，组间差异有统计学意义(P<0.05)，并且其水平与SCr水平有着良好的相关性，同时检测可为临床肾功能的评估和治疗方案的确定提供更可靠的诊疗依据。

综上所述，尿Cys C和NGAL作为新型肾脏疾病生物标记物，与肾小管损伤有密切联系，在IgA肾病的早期诊断、监测进展方面有良好的应用前景。

参考文献

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(收稿日期：2015-12-26)

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.06.027

文献标识码：A

文章编号：1673-4130(2016)06-0783-02

基金项目：广东省深圳市科技计划项目(201402076)。