首乌补肾胶囊对糖皮质激素致肾阳虚模型小鼠的影响*

王粉侠　郭　冬　杜　霞　孟　雪　任　慧　李彤晖

陕西省友谊医院(西安 710068)



首乌补肾胶囊对糖皮质激素致肾阳虚模型小鼠的影响*

王粉侠郭冬△▲杜霞△孟雪△任慧△李彤晖△

陕西省友谊医院(西安 710068)

摘要目的：探讨首乌补肾胶囊治疗肾阳虚的中药药理学基础。方法：采用糖皮质激素制作“阳虚”动物模型，观察该药对此模型小鼠一般体征、体重、体温、自主活动、低温游泳存活时间、胸腺指数、睾丸指数和附睾指数等指标的影响。结果：剂量为2.28、1.14g生药/kg能缓解模型小鼠的体重下降，提高体温；增加自主活动，延长低温游泳存活时间，增强耐寒耐疲劳能力；能升高胸腺指数；增加睾丸指数和附睾指数。结论：此药对糖皮质激素阳虚模型小鼠有治疗作用，能明显改善氢化可的松致肾阳虚模型小鼠的阳虚体征，增强机体生理功能，提高对外界不良刺激的耐受力，这些药理作用可能与其补肾壮阳功效有关。

主题词肾阳虚@首乌补肾胶囊动物，实验小鼠

首乌补肾胶囊为我院院内制剂，已在临床使用十年，疗效好，副作用小，生物利用度高，治愈了许多患者。目前已完成该制剂制备工艺、质量标准及中试生产研究工作。处方由何首乌、山茱萸、女贞子等组成，具有滋补肝肾，填精生子功能，用于腰膝酸软，眼目干涩，情志抑郁，性功能差，精液量少，精子活动力差。本文报道为该制剂药效学研究部分，为申报新药奠定基础。

1材料1.1实验动物KM种小鼠，雄性，体重18～22g，由西安交通大学医学院实验动物中心提供，实验动物质量许可证号：SCXK(陕)2007-001。

1.2仪器与材料 首乌补肾胶囊，我院自制(批号：20150101)；氢化可的松注射液(批号：120426)。精子固定液(碳酸氢钠5g，福尔马林1mL，蒸馏水加至100mL，4℃保存)。甲睾酮片(批号110802)。AL104型-电子天平，METTLER TOLEDO生产；MC-106B-电子体温计；普通光学显微镜，olympus；YLS-1A-多功能小鼠自主活动记录仪。

2实验方法取KM种小鼠60只，除空白对照组(去离子水10mL/kg)10只小鼠肌注生理盐水外，其余小鼠按参考文献[1-2]方法，每天肌注氢化可的松0.25mg/10g，连续10d，复制“阳虚证”动物模型。将成模动物随机分为模型组(去离子水10mL/kg)、首乌补肾胶囊大、中、小剂量组(2.28、1.14、0.57g生药/kg)和甲睾酮组(1mg/kg)，每组10只。其余各组造模第11天各组动物灌胃给药，每天1次，给药容积10ml/kg，连续10d，观察动物一般状态。给药第9天，于给药后0.5h将各组小鼠置于YLS-1A型-多功能小鼠自主活动记录仪中先适应15min，再按说明书方法计10min内的自主活动次数。末次给药前禁食12h，末次给药后0.5h，各组小鼠分别依次称取体重，用欧姆龙电子体温计测量肛温，测冰水游泳时间。处死动物，摘取胸腺、脾脏、肾脏、睾丸、附睾、精囊腺、前列腺等器官，称重，计算脏器系数。

统计学方法 统计学软件SPSS11.0进行数据分析，计量资料以均值±标准差表示，采用t值法检验。以P<0.05为差异有显著性意义，结果如下。

3结果3.1一般状态的影响小鼠肌注氢化可的松造模10d，小鼠出现体重下降，活动减少，反应迟钝，眯眼，拱背少动，竖毛少泽、消瘦畏寒、颤抖蜷缩，尾冷肢凉，肛温降低，少饮少食等类似临床“肾阳虚”状态，与空白对照组有明显差异，说明造模成功。首乌补肾胶囊大、中、小剂量组动物一般状态较模型组明显改善。

3.2体重的影响结果表明，造模后动物体重较空白对照组降低(P<0.01)，用药治疗后，首乌补肾胶囊2.28、1.14g生药/kg剂量组体重高于模型组(P<0.01，P<0.05)，见表1。

3.3首乌补肾胶囊对肾阳虚模型小鼠体温和小鼠自主活动的影响结果表明，模型组小鼠体温明显低于空白对照组(P<0.01)，自发活动少于空白对照组(P<0.01)。治疗后首乌补肾胶囊2.28g生药/kg、1.14g生药/kg组小鼠体温均显著高于模型组 (P<0.05)，自发活动多于空白对照组(P<0.05)。提示：首乌补肾胶囊可明显提高肾阳虚小鼠体温，增加肾阳虚小鼠的自发活动,见表2。

3.4对肾阳虚小鼠低温低温游泳存活时间的影响通过对肾阳虚小鼠进行低温游泳存活时间实验，结果对照组为12.86±2.79min；模型组为9.09±2.44min；甲睾酮组(药量1mg/kg)为12.55±2.10min；首乌补肾组三个剂量(2.28g、1.14g、0.57g生药/ kg)分别为12.75±2.86min、12.41±3.59min、11.77±3.03min。表明模型组小鼠低温游泳存活时间较空白对照组明显缩短(P<0.01)，首乌补肾胶囊2.28g生药/kg、1.14g生药/kg、0.57g生药/kg组及甲睾酮组能明显延长阳虚证小鼠低温游泳存活时间，与阳虚模型组比较差异有显著性意义(P<0.05)。提示，首乌补肾胶囊能增强阳虚证小鼠的耐寒耐疲劳能力。

3.5对肾阳虚小鼠免疫器官脏器指数的影响模型组胸腺指数与空白对照组比较显著降低(P<0.01)，首乌补肾胶囊2.28g生药/kg、1.14g生药/kg能显著升高阳虚小鼠胸腺指数 (P<0.05)。首乌补肾胶囊2.28g生药/kg、1.14g生药/kg、0.57g生药/kg能提高肾阳虚模型小鼠睾丸指数和附睾指数，与模型组比较差异有显著性意义(P<0.05)，但对阳虚模型小鼠的脾指数、肾脏指数和前列腺+精囊腺指数无明显影响。见表3、4。

4讨论肾阳虚与现代医学的神经内分泌免疫系统有关，表现为不同程度的下丘脑-垂体-靶腺轴功能紊乱[1]。本文采用氢化考的松复制小鼠“阳虚证”动物模型，表现为体重下降、自发活动减少、肛温降低以及低温游泳时间缩短、胸腺指数、睾丸指数和附睾指数降低，与临床“肾阳虚”的部分症状相似，与文献报道结果基本一致[2-4]。

本文观察了首乌补肾胶囊对糖皮质激素致肾阳虚模型小鼠一般体征、体重、体温、自主活动、低温游泳存活时间、胸腺指数、睾丸指数和附睾指数等指标的影响。结果表明本品可明显改善氢化可的松致小鼠肾阳虚证体征，增强机体生理功能，提高对外界不良刺激的耐受力。首乌补肾胶囊对小鼠的起效剂量约为1.14g生药/kg，是临床人日用剂量的15倍。验证了该制剂的功能，也为开发此制剂为新药奠定了基础。

具文献报道TGFβR1在睾丸表达异常与肾阳虚不育模型大鼠精子质量提高和血清性激素水平改变有关[5]。因此下一步计划观察首乌补肾胶囊对肾阳虚不育模型大鼠血清性激素水平、精子质量以及细胞色素P-19表达的影响。

参考文献

[1] 陈栋炜，蒙一纯，方湘娟，等.肾阳虚证本质的现代医学研究进展和展望[J]. 现代中西医结合杂志，2005，14(23)：3175-3177.

[2] 刘欣，张冰，刘小青，等.氢化可的松诱导大鼠类阳虚状态的动态观察[J].中华中医药杂志，2011，26(1)：126-128.

[3] 何帮剑，肖鲁伟，童培建.肾阳虚证动物模型的研究进展[J].中国中医急症，2012，21(8)：95-96.

[4] 惠爱武，董银兰，赵岗，等. 骨质糖浆对肾阳虚模型小鼠的实验研究[J].陕西中医，2010，31(11)：1547-1549.

[5] 李浩, 赵娇, 宋欢欢, 等. TGFβR1对肾阳虚不育大鼠睾丸精子及CYP1表达的影响[J]. 陕西中医，2014，35(6)：758-759.

(收稿2015-12-20；修回2016-02-20)

Effects of Shouwu Bushen capsule on kidney-yang deficiency mice induced by glucocorticoids

Shaanxi Province Friendship Hospital (Xi’an 710068)

Wang FenxiaGuo DongDu Xiaet al

KEY WORDSKidney-yang deficiency@Shouwu Bushen capsuleAnimal experimentationRats

ABSTRACTObjective: To discuss the pharmacology foundation of Shouwu Bushen capsule against kidney-yang deficiency. Methods: Making the yang deficiency animal model with glucocorticoids. Observing the effects of this drug on the models, including signs, body weight, body temperature, locomotor activity, swimming in cold water survival, thymus index, testis and epididymis index and so on. Results: The drug can relieve weight loss of models, increase body temperature, increase locomotor activity, prolong the survival time of swimming in cold water, enhance the cold and fatigue resistances, increase the thymus index, testicular index and epididymal index, when the dose was 2.28, 1.14g crude drug/kg. Conclusion: The drug can treat the glucocorticoid yang deficiency mice, improve the model’s signs of kidney-yang deficiency induced by the hydrocortisone, enhance the body’s physiological function and improve tolerance to adverse external stimuli. These pharmacological effects may be related with the function of reinforcing kidney-yang.

通讯作者▲

【中图分类号】R563

【文献标识码】A

doi:10.3969/j.issn.1000-7369.2016.06.048

*西安市科技计划项目[2012-SF1205-(5)]

△陕西省中医药研究院(西安710003)