非免疫鸡禽流感、新城疫感染情况检测方法

宋迎春

（新疆巴州动物疾病控制与诊断中心，新疆库尔 841000）

非免疫鸡禽流感、新城疫感染情况检测方法

宋迎春

（新疆巴州动物疾病控制与诊断中心，新疆库尔 841000）

目前全国各省、市、县动物疾控中心所做的血凝（HA）及血凝抑制（HI）试验 所需的红细胞均需自己配置，饲养非免疫鸡是获取红细胞的主要途径，红细胞是否感染特定病毒直接影响试验结果，本实验方法就是为大家提供非免疫鸡，是否感染禽流感、新城疫鉴别诊断最简单有效的方法。

无特定疫病鸡；红细胞；血凝（HA）及血凝抑制（H1）试验；感染抗体

巴州动物疾病控制与诊断中心为完成家禽禽流感、新城疫抗体监测任务所需的红细胞，2015年4月特从新疆库尔勒兴宏孵化场购进200只青脚麻鸡（又称铁脚鸡）公鸡，该鸡特征是：乌脚、黑嘴，羽毛生长快，毛色有麻黄、麻黑等不同颜色。公鸡为红羽黑尾，皮肤浅黑色，脚矮，单冠。性成熟早，公鸡一般为50日龄左右鸡冠鲜红，并开始打鸣。按我中心要求孵化场未对雏鸡进行任何疫苗免疫，经49d室内育雏完成后，放入库尔勒兰干路骆驼风情园内饲养，该风情园林地空间大，空气好，有利于鸡的健康；林地有丰富的野草、昆虫，给鸡补充一些食物，能减少饲料成本。在风情园中饲养62d时，饲养员打来电话说一天内有15只鸡出现死亡，询问症状鸡突然倒地死亡，部分鸡食欲不振，喜欢喝水，羽毛松乱，闭目缩颈，象昏睡状，头下垂或伸入翅下，鸡冠及肉髯渐渐变成暗紫色部分鸡晚上咳漱、呼吸困难、流鼻液、常伸头颈，张口呼吸并发出“咕噜”、“咯咯”的喘鸣声。鸡粪便呈黄绿色，疾控中心实验室人员对5鸡进行了剖检，发现其中一只腺胃乳头有点状出血，对剩余活鸡随机抓了20只进行了采血，将鸡血带回巴州动物疾控中心分离血清后，对20份血清通过血凝抑制试验（HI）方法进行了新城疫、禽流感各型的抗体检测，监测结果如下：

新城疫、禽流感血凝抑制试验（HI）结果

1 结论

孵化场未对雏鸡进行任何疫苗免疫，检出抗体为感染抗体，本群鸡有5只出现抗体反应，说明感染了新城疫病毒；禽流感各亚型均未检出抗体，本群鸡未感染禽流感。

2 结论分析

血凝和血凝抑制试验是目前我国各地开展疫病诊断、流行病学调查、免疫程序制定及免疫效果监测等的主要手段之一。由于其涉及红细胞凝集及抗原抗体的特异性反应，目前全国各省、市、县动物疾控中心所做的血凝（HA）及血凝抑制（H1）试验所需的红细胞均需自己配置，饲养非免疫鸡是获取红细胞的主要途径，非免疫鸡的饲养环境要求隔离、无疫源，一般很难做到，许多时候感染了某些特定病原，由于症状较轻或隐性经过，未被发现，仍然用来提取红细胞，从而影响实验结果，特别是免疫抗体水平的判断结果，导致对监测样本的不科学的结论，即影响以监测促防疫的效果，又使各动物疾控中心的名誉受到影响。巴州地区某县兽医站实验室人员就出现过使用感染非免疫鸡进行血凝（HA）实验，无法测出是抗原的现象。

本实验就是为大家提供非免疫鸡，是否感染禽流感、新城疫鉴别诊断最简单有效的方法，该实验原理是没有经过疫苗免疫的动物，检出抗体即是感染抗体，州级以上的动物疾控部门一般可以开展PCR实验，可对感染病毒直接定性分析，但需要2d时间才能完成，而且费用不菲。采用血凝抑制（H1）试验仅需要3h，就可完成，而且经济简便。为保证血凝（HA）及血凝抑制（H1）试验准确性，建议大家先对非免疫鸡进行检测。

[1] 蔡文杰，邱立新，邱美珍，等.血凝和血凝抑制试验常见问题及解决方法[J].湖南畜牧兽医，2012，（5）：39-41.

[2] 柳纪宵.免疫鸡群非典型新城疫概述[J].中国兽医科学，1990，（5）：18-20.

宋迎春（1971—），男，大学学历，高级兽医师，从事重大动物疫病监测工作。