刘尧 魏立君 杨凤军
白鹤芋组织培养快繁及生产技术
刘尧1魏立君2杨凤军1
(1黑龙江八一农垦大学;2大庆油田矿区服务事业部园林绿化公司,黑龙江大庆163000)
我国地大物博,花类品种众多,不同的地方盛产不同的花种。随着我国植物组织培养相关技术的不断进步,大大提高了花卉的成活率与繁殖速度。本文以白鹤芋的花序为外植体,在MS基本培养基中加入不同类别且不同浓度的激素,进行组培快繁试验,进而探讨快速繁殖白鹤芋的有效途径。
白鹤芋;组培快繁;生产技术
白鹤芋一般采用种子以及分株法进行繁殖,繁殖系数往往过低,这就明显限制了发展速度,同时,也影响了白鹤芋规模化和商品化的进程。经过多年的摸索与经验积累,目前,快速繁殖白鹤芋的主要有效途径是对其进行组织培养,在已有的相关资料中,运用白鹤芋的茎段、茎尖、叶片以及顶芽为外植体都有成功的先例。
在试验中,我们所选用的是已经引进的白鹤芋属观赏植物的新品种,例如,绿巨人、白掌等,进行以下组织培养的相关试验。
1.1使用茎段中的顶芽培养
首先,剥掉外层的叶片,待用自来水冲洗过后,再用70%酒精浸泡大约3min,之后用10%的灭菌净消毒30min,并用无菌水对其冲洗4~5次即可。用刀切取茎顶部位,放入到MS+NAA 0.2mg/L+6-BA3~5mg的培养基中,进行诱导丛生芽操作。
1.2丛生芽的相关增殖培养
对丛生芽进行增殖培养时,首先,把已经诱导形成的丛生芽切成0.2cm的小块,切好后分别放入不同浓度NAA的MS培养基中进行培养,1个月后统计其所产生的增殖倍数。
1.3幼花序培养
用刀切取绿巨人带花序长3~5cm的植株,同时,将其外部的叶片去除,取出带有苞叶的幼肉穗花序。首先,用70%的酒精浸泡1min,之后用0.1%HgCl2消毒大约15min,再用无菌水冲洗5次,去除苞叶,并将花序切成一个个薄片,最后放入到含有不同NAA浓度的MS培养基中形成诱导胚状体。在40天后统计其胚状体的诱导概率,并将诱导出的胚状体放入含有不同NAA浓度的MS培养基中进行植株的再生。
1.4组培苗的生根培养
将在增殖培养过程中再生出的无根植株切出,放入到含有不同NAA浓度的MS中进行诱导生根的操作,所用的培养基一般都含有0.5%的活性炭。待培养进行到1个月时,统计具体的生根率和每株生根数的平均值。
2.1不同品种的茎顶芽培养效果
在众多的白鹤芋品种中,可以快速诱导并得出丛生芽的品种有:香水白掌、神灯白掌和洪拉斯白掌,大约经过50d的诱导,可以出现我们想要的丛生芽。香水白掌经过诱导所形成的植株比较容易诱导出丛生芽;绿巨人属中等速度,大约需要2个月;大汉白掌就要更慢一些,大约要4个月,且诱导难度明显加大。
2.2不同品种的白鹤芋增殖培养中的具体表现
经过一系列的摸索试验得知,绿巨人、大汉白掌在培养中所适宜的增殖培养基应为MS+NAA0.2mg/L+6-BA3mg/L,增殖倍数高的同时其可再生性也大大加强。香水白掌与神灯白掌在MS+NAA 0.2mg/L+6-BA 2mg/L的培养基中所取得的效果是最好的。
2.3不同品种的花序在培养过程中所表现出的差异
通常情况下,绿巨人与大汉白掌幼花序的培养需在NAA 0.5mg/L+6-BA3mg/L的培养基中,可以得到高频率的胚状体诱导,大约分别可以达到87%和82%。随着相关培养基浓度的不断提高,绿巨人花序所表现出来的相关胚状体诱导率明显下降,然而大汉白掌花序的胚状体诱导率并无变化。使用同样的培养基,不同品种的培养效果具有明显差异,在对绿巨人花序胚状体的诱导起到促进作用的同时,却抑制了大汉白掌花序胚状体的诱导。
在相关的组织培养过程中,白鹤芋花序组培中较容易实现分化出芽这一目的,经组织培养所产生的幼苗生长旺盛,进行继代接种后,不久幼苗就可以长满整个瓶,一般增殖苗的生长高度在2cm以上即可收获壮苗。在进行花序的初代培养时,所使用的营养液以MS+6-BA5mg/L+NAA0.2mg/L为宜,在进行继代增殖培养的过程中,所使用的营养液以MS+6-BA4~5mg/L+NAA0.1~0.2mg/L为宜;诱导生根所使用的培养基最好为1/2MS+IAA0.5mg/L。由于白鹤芋具有易栽培与观赏价值高等特点,因此,高效运用组织培养技术进行育苗,不仅能够在一定程度上提高其自身的数量,而且对于带动其它观赏植物进行组培种苗的发展也有重大意义。本文探究的主要是白鹤芋花序的组织培养繁殖技术,旨在为我国的相关研究项目添砖加瓦。
1陈碧华.‘香水’白鹤芋组织培养快速繁殖的研究[J].福建林学院学报,2000(3)
2高天霞,郝昀.白鹤芋的组织培养和快速繁殖[J].生物学通报,1999(8)
3朱根发.白鹤芋属观赏植物的组织培养和快速繁殖技术研究[J].中国农学通报,2003(3)
(责任编辑舒丹丹)