2012～2015年河南省部分地区规模化猪场PRV血清流行病学调查

党占国，庄金山，晋春霞，孙　哲，彭大新(1. 扬州大学兽医学院，江苏 扬州　225009；2. 普莱柯生物工程股份有限公司，河南 洛阳471000；.国家兽用药品技术研究中心，河南 洛阳　471000)



2012～2015年河南省部分地区规模化猪场PRV血清流行病学调查

党占国1,2*，庄金山3，晋春霞3，孙哲3，彭大新1**
(1. 扬州大学兽医学院，江苏 扬州225009；2. 普莱柯生物工程股份有限公司，河南 洛阳471000；3.国家兽用药品技术研究中心，河南 洛阳471000)

摘要：为了解河南省规模化猪场猪伪狂犬病毒(PRV)野毒感染情况，本研究应用IDEXX公司的 PRV gpI抗体检测试剂盒对2012年1月～2015年8月送检的17个地市包括240个规模化猪场的3 342份血清样本进行PRV gpI(gE)抗体的检测。结果显示，送检样本中PRV gpI (gE)抗体阳性率在2012年、2013年、2014年和2015年8月份前分别为40.15 %、63.09 %、62.20 %和70.24 %。对不同生长阶段的猪群检测结果分析表明，不同生长阶段猪群PRV野毒抗体阳性率差异显著，后备母猪、母猪和公猪的PRV gpI(gE)的阳性率偏高；不同季度送检的血清PRV野毒抗体阳性率差异不大。送检样本的规模化养猪场使用的猪伪狂犬疫苗均是gE基因缺失的活疫苗，因此，gE抗体阳性的猪场可以判定为PRV野毒感染阳性场。本研究对指导规模化猪场猪伪狂犬病的控制与净化具有重要的指导意义。

关键词：猪伪狂犬病；血清学调查；ELISA

** 通信作者：彭大新，教授，博导，主要从事动物传染病研究。

猪伪狂犬病(Pseudorabies，PR)曾经在世界上广泛分布，是危害养猪业健康发展的重要疫病之一[1]。其主要引起妊娠母猪产死胎、木乃伊胎和流产，新生仔猪神经症状、呕吐、腹泻，病死率高达80 %～100 %；断奶仔猪和育肥猪表现出呼吸道症状[2]。随着PRV基因缺失疫苗及淘汰野毒感染猪的综合净化措施在规模化猪场的普遍推广，使得该病在世界范围内得到有效控制。但自2011年底以来，我国很多PRV免疫猪场再次发生疫情，病毒分离鉴定结果确诊其为PRV[3-5]。为了更好地了解现有的防疫控制体系下河南省规模猪场伪狂犬感染的状况，为有效控制和消灭猪伪狂犬病提供科学依据，我们于2012年1月～2015年8月间对河南省17地市部分规模化猪场进行猪伪狂犬病的流行病学调查，现将结果报告如下。

1　材料与方法

1.1 材料

1.1.1 试剂盒

美国爱德士公司(IDEXX)PRV gpI(gE)抗体检测试剂盒。

1.1.2 样本

来自2012年1月～2015年8月期间的全国16个省(直辖市)240个规模化猪场的血样。

1.2 方法

1.2.1 血清样本的制备

血清样本是经猪前腔静脉或耳缘静脉采集3 mL～5 mL非抗凝血液，室温静置2 h～6 h后，3 000 r/min离心15 min，取上清置于灭菌EP管中，备用。

1.2.2 PRV gE 抗体检测方法

按照IDEXX公司PRV gpI(gE)抗体检测试剂盒中提供的说明书中所述方法进行。

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1.2.3 结果判定与分析

本研究所检测的样本全部来自使用PRV gE基因缺失疫苗免疫的猪场，因此PRV gE抗体阳性猪可判断其为PRV野毒感染所致。PRV gE抗体检测结果判定参照说明书进行。在进行猪场结果判定和统计时，只要猪场有一个样本判定为阳性，则该场判定为伪狂犬野毒阳性场。

针对样本背景信息，按照不同年份、不同地区、不同季节、不同猪群等进行结果统计与分析，根据分析结果评估PRV野毒的流行特点和猪伪狂犬病防控过程中存在的问题和可能的有效措施。

2　结果

2.1 不同年份规模化猪场PRV野毒感染情况

2012年1月～2015年8月送检的164家规模化猪场PRV血清PRV gpI(gE)抗体检测结果显示：2012年1月～2015年8月共检测3 342份样本，每年检测样本分别为797个，940个、1 111个、494个，其中阳性样本占比分别为40.15 %、63.09 %、62.20 %、70.24 %(表1)。

2.2 不同季节规模化猪场PRV野毒感染情况

由于不同季节的采集样本不同，检测阳性样本在不同季节也有差异 (图1)，第一季度至第四季度样本PRV gE阳性占比分别为53.54 %、55.67 %、57.83 %和57.85 %(图2)。

2.3 不同地区规模化猪场PRV野毒感染情况

2012年1月～2015年8月从河南省17地市164家规模猪场采取血清样本进行伪狂犬gE抗体检测，检测超过100个样本的有洛阳、三门峡、驻马店、开封、济源、周口、漯河等7个地区(图3)。其中PRV gE阳性率超过60 %有9个地市，由于伪狂犬gE阳性不同地区检测样本不一样，结果差异化也很大(图4)。

2.4 规模化猪场不同阶段猪群PRV gE抗体阳性情况

为了方便流行病学调查统计，根据猪的生长状况，我们将猪群分为5个生长阶段，新生仔猪(1周龄～4周龄)、保育仔猪(4周龄～8周龄)、育肥猪(9周龄以上)、后备母猪和成年猪(包括种公猪和生产母猪)。取猪龄明确不同类型的猪群1 410份血清，依据PRV gE抗体检测结果，分析PRV野毒阳性率与不同生长阶段猪群的关系。结果表明，感染率最高为种公猪，阳性率为76.4 %，其次是后备母猪73.8 %和母猪74.6 %，新生仔猪、保育猪、育肥猪的感染率分别为63.3 %、58.3 % 和46.6 %(表2)。

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3　讨论与分析

3.1 河南省各地区 PRV感染情况

本调查范围包括河南省17个地市的164家猪场，调查结果表明河南省猪场猪伪狂犬野毒感染呈逐年上升趋势，感染依然严重。本次共检测了3 342份血清，结果表明猪PRV野毒感染阳性率达58.38 %，与中国农业大学程晶、陈艳红等[6]于2006～2008年进行的调查结果PRV野毒感染阳性率达23.40 %相比，猪PRV野毒感染阳性率呈明显上升趋势。从不同年份PRV野毒感染阳性率的分析，2012年1月～2015年8月的PR流行情况呈逐年递增趋势，说明近3年来在规模猪场疫病防控中PR呈高发态势；从不同季度检测结果来看，一年四季均能发生，且发生率差异不大，该结果与程晶和姜艳芬等研究报道冬春较为多发有些不一致[6,7]。从不同地域的规模猪场PRV野毒感染情况分析，不同地域的PRV野毒感染有差异，这可能与地域采样的多少有一定的关系，但从结果来看豫北区域感染率高于豫南区域。从不同年龄阶段的猪群PRV野毒感染的分布来看，从新生仔猪、保育仔猪、育肥猪、后备母猪和成年猪血清中均有PRV野毒抗体阳性检出，这说明不同年龄、不同性别的猪群对PRV均易感。其中种公猪、后备母猪的检测出率分别高达76.9 %、73.8 %和74.6 %，该结果也说明种猪带毒和引种带毒可能是规模猪场发生PR转阳率提升的关键因素之一。而保育仔猪的检测出率高达58.3 %和育肥猪检测出率高达46.6 %，也说明了带毒猪的散毒可能性和仔猪的免疫制定不合理，有必要对免疫程序进行适当调整[8]。另外，保育和育肥猪舍的消毒卫生和生物安全工作较差，这也是育肥猪感染率居高不下的重要原因[6]。当一部份的生长育肥猪进入后备母猪群，隐性感染PRV的猪也随之进入，因此在猪场中形成循环感染，这也是部分猪场伪狂犬病持续存在、难以净化完全的重要原因之一[9]。

3.2 当前PRV防控的难点

一是猪跨区域流动限制和引种监测难度大。对于猪场来说，本次调查显示伪狂犬感染呈逐年上升趋势，而目前由于全国范围内尚未启动PRV净化方案，多年来又有很多规模猪场跨省销售和引种，对于阳性商品猪及种猪的流动与监测不力也给PRV防控带来困难。二是免疫抑制疫病对疫苗免疫的干扰，PCV2和PRRSV等单一或协同感染，造成免疫抑制而引起PRV疫苗免疫失败或延迟，高峰等[10]证实圆环病毒感染仔猪可以导致PRV疫苗抗体产生推迟，抑制PRV疫苗诱导的体液免疫反应。三是新型PRV毒株出现。新型PRV毒株与Bartha毒株比较毒力基因有6个碱基缺失，而免疫原gB基因比较有9个碱基缺失，毒力基因的变化导致PRV毒株的毒力明显增强[11]，遇秀玲等[12]也证实该病毒的致病性有增强趋势。四是疫苗免疫有效但不能阻止其感染转阳。现有的商用疫苗毒株绝大部分为Bartha K61株，对经典的伪狂犬病毒株有100 %的保护；但对于新的高致病性伪狂犬病毒，仅有50 %的保护率[11]。疫苗免疫可以有效减少病毒载量，但疫苗产生的保护力不足以抵抗强毒的入侵；另外，多数猪场免疫程序不合理，母猪免疫一刀切，仔猪仅在50日龄左右免疫一次，而忽略了滴鼻免疫的重要性，造成产房早期感染很普遍的现象。五是猪场生物安全措施和管理不到位，对于灭鼠、猪群移动、人员和工具流动等切断病原传播途径的猪场生物安全措施在一条龙生产的规模猪场很难实施。

3.3 对PRV防控与净化的建议

从近3年调查结果来看，现阶段伪狂犬在仍呈流行性的态势下，对于规模猪场PRV防控来说，最实际也是最有效的手段是选用优质的伪狂犬活疫苗并采用科学的免疫方案，以保证猪群有足够的免疫力。科学的免疫可以控制伪狂犬的临床症状，减少阳性动物排毒量、缩短排毒时间、降低血清学阳性率，即使周边地区存在伪狂犬感染场，通过努力也可最终成为gE阴性场。对于规模化猪场如何实施PRV净化来说，需要有一套科学合理的实施计划。猪场除了需要加强管理和生物安全措施，还要在免疫前检测gE抗体，确定阳性感染率，制定合理免疫程序，定期监测野毒感染阳性率，适时淘汰阳性种猪，最终实现净化目标。本次调查的规模猪场均接种了PRV gE基因缺失疫苗，但仍存在如此高的PRV野毒感染率，说明近期对PR防疫控制工作目前在规模猪场仍然很重要。□□

参考文献：(12篇，略)

*作者简介：党占国(1981.10- )，男，博士研究生。

中图分类号：S851.31+3

文献标识码：A

文章编号：1001-0769(2016)01-0044-04