217对不良孕产史夫妇细胞遗传学分析

何淑贞，蒲育栋，曹金如，陈美玲，苏焕厚，邓汉钊，莫丽芳

(东莞市第三人民医院产科暨产前诊断中心，广东 东莞 523326)

217对不良孕产史夫妇细胞遗传学分析

何淑贞，蒲育栋，曹金如，陈美玲，苏焕厚，邓汉钊，莫丽芳

(东莞市第三人民医院产科暨产前诊断中心，广东 东莞 523326)

目的 探讨不良孕产史与外周血染色体核型之间的关系，为遗传咨询提供依据。方法 采集2013年1月至2015年11月来我院就诊的217对不良孕产史患者的外周血，分别进行外周血淋巴细胞培养、制做玻片和G显带后核型分析。结果 217对不良孕产史夫妇中共发现染色体异常的核型9例，异常染色体核型检出率为2.07%，多态性核型55例，检出率为12.67%。结论 染色体异常是造成患者发生不良孕产史的主要原因之一，因此应对存在不良孕产史的夫妇常规开展细胞遗传学检查及适时的遗传咨询。

核型分析；不良孕产史；多态性

优生遗传咨询门诊主要对象是具有不良孕产史的患者，咨询的主要原因包括自然流产、死胎、死产和胎儿发育畸形等。造成上述现象的原因很多，除了夫妇双方受到外界环境因素的影响及感染因素、孕妇自身的解剖结构异常等因素外，染色体异常是一个主要的原因。为了更好的对不良孕产史与染色体核型异常之间的关系进行分析，笔者对217对不良孕产史夫妇的染色体核型分析结果进行了系统的总结，以便为进一步做好患者的遗传咨询，探讨不良孕产史与染色体核型异常的相关性提供参考。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择2013年1月至2015年11月来我院产前诊断中心和生殖中心进行遗传咨询及临床相关检查的夫妇217对，其不良孕产史涉及自然流产、死胎、生育先天缺陷儿等，经妇科和男科常规检查排除解剖性结构异常。患者年龄20～45岁，平均(30.08±4.68)岁。

1.2 染色体核型分析 无菌条件下采用肝素钠抗凝管分别抽取夫妇双方静脉血3～5 mL，然后用两个不同厂家的外周血淋巴细胞培养液(广州拜迪和达晖生物有限公司)进行淋巴细胞培养，37℃培养70 h后加入20 μg/mL秋水仙素50 μL继续培养1.5～2 h，常规收获并制片、G显带进行处理。显微镜下计数20个核型，经国联在线染色体核型分析系统详细分析3～5个核型。嵌合体则需要加倍计数核型。按照《人类细胞学国际命名体制(ISCN2013)》的相关规范对核型结果进行命名。

1.3 数据分析 所有数据录入EXCEL表格，数据采用频数和率表示。

2 结果

2.1 异常核型分析 217对不良孕产史夫妇当中共检出9例染色体异常的核型，异常染色体核型检出率为2.07%。其中包括4例罗伯逊易位，4例平衡易位，1例倒位。具体核型描述见表1。

2.2 多态性分析 217对不良孕产史夫妇中共检出55例多态性核型，检出率为12.67%。其中次缢痕增长10例，D/G组随体变异37例，9号染色体倒位7例，Y染色体增大1例。具体核型描述见表2。

表1 异常核型分布情况

表2 多态性核型分布情况

3 讨 论

本研究结果显示，在217对具有不良孕产史的夫妇当中，异常染色体核型检出率为2.07%，高于余元勋等[1]报道的我国一般人群异常染色体核型0.5%～1%的检出率。

本次研究发现，染色体易位的检出率为1.84%，其中平衡易位和罗伯逊易位各为4例，且不良孕产史均表现为配偶自然流产或复发性流产。易位主要包括平衡易位和罗伯逊易位。平衡易位理论上没有遗传物质的增减，只是引起片段的位置发生改变，由于易位染色体不能与同源染色体进行正常配对，从而形成不平衡的配子，产生不平衡配子的概率(16/18)远远大于产生正常(1/18)的配子和平衡易位(1/18)的配子的概率，从而在受精后形成三体性或单体性的合子而造成流产[2]。罗伯逊易位是指由两条近端染色体(D/D、D/G、G/G)通过着丝粒融合成一条衍生的染色体，包括非同源罗伯逊易位和同源罗伯逊易位。非同源罗伯逊易位携带者的后代只有1/4的机会，1/4的机会是携带者，而成为三体型或单体型的机会则占了一半。同源罗伯逊易位携带者可以产生两种类型的不平衡配子，从而造成患者不能够生育正常的后代[3]。

染色体倒位分为臂间倒位和臂内倒位。臂间倒位携带者从遗传学角度分析可以形成4种不同的配子，包括1种正常的染色体，1种倒位携带者，其余两种是带有部分重复或部分缺失的重排染色体[4-5]。从理论上讲，非平衡的片段越小，胎儿存活的几率就越大。若倒位的片段越短，则倒位两侧重复和缺失的部分越大，患者表现为月经期延长、流产、死胎或不孕不育的比例将会越高[6]。本研究发现1号染色体臂间倒位1例，临床表现为复发性流产。

染色体多态性表现为同源染色体结构和染色体的着色强度的细小差别。通常指D/G组染色体随体区的变异、1、9、16号染色体着丝粒和次缢痕增加或缺失等，传统观点认为上述异染色质区域不会引起表型效应也无功能。但是，目前越来越多的研究表明，染色体多态性与不良孕产史之间可能存在着一定的关联[7-9]。

次缢痕异染色质区是容易发生断裂的地方，次缢痕的增加或缺失可能影响细胞的减数分裂，从而形成不平衡的配子而导致流产。随体的增大或减小可能导致染色体不分离或者发生重排的概率增加，从而在早期引起死胎或者流产等生殖异常[10]。本研究发现37例存在随体柄增长，10例存在次缢痕增长，其临床表现主要是自然流产、复发性流产、畸胎生育史等。

inv(9)被认为是一种多态性，它不涉及遗传物质的丢失和产生相应的遗传效应。但近年来也有报道认为，inv(9)在复发性流产、不育症、出生缺陷的人群中发生率明显的增高[11]。9号染色体pter-q12片段上存在松弛素(RLX)基因，该基因在生殖调节中发挥着重要的作用，它不仅能够影响女性的卵泡发育和子宫内膜的分化，还对男性的精子运动和穿卵能力有一定的影响。9号染色体臂间倒位，使其发生位置效应导致携带者RLX作用减弱从而引起不孕不育。本研究发现inv(9)患者7例，占总受检人群的1.61%，略高于罗小金等[3]报道的1.20%。

近年来越来越多的研究发现，Y染色体异质性与不良孕产史之间有一定的相关性[3，9-10]。研究发现Yqh+具有一定的遗传效应，且与流产、智力低下、无精子症、畸形儿等有关。大Y可能是由于异染色质区域DNA序列的高度重复，导致在早期细胞分裂的时候发生异常，从而影响胚胎的正常发育而导致流产。

综上所述，不良孕产史与染色体核型异常之间有着密切的联系，因此对于有不良孕产史的夫妇双方应进行外周血淋巴细胞染色体检查，结合其他检测指标和临床指征进行综合的分析，从而指导他们进一步做好遗传咨询及产前诊断，为预防出生缺陷，提高出生人口素质服务。

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[2]余蕾,夏曙华,杨国珍,等.男性生殖异常与染色体异常关系的探讨[J].中国计划生育和妇产科,2015,7(2):22-26.

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[4]李聪敏,郝戈芳,焦倩谦,等.349例遗传咨询者染色体异常核型分析[J].中国计划生育学杂志,2009(2):115-117.

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Cytogenetic analysis of 217 couples with adverse pregnancy history.

HE Shu-zhen,PU Yu-dong,CAO Jin-ru,CHEN Mei-ling,SU Huan-hou,DENG Han-zhao,MO Li-fang.Obstetrics and Prenatal Diagnosis Center,the Third People's Hospital of Dongguan,Dongguan 523326,Guangdong,CHINA

Objective To investigate the relationship between abnormal pregnancy and peripheral blood karyotype,and provide the basis for genetic counseling.Methods The peripheral blood of 217 couples with adverse pregnancy history were collected in our hospital from January 2013 to November 2015.Then the peripheral blood lymphocytes were cultured,and karyotype analysis of G banding was carried out.Results Among 217 couples,9 cases were found with abnormal karyotype(with the detection rate of 2.07%),and 55 cases were found with polymorphic karyotype(with the detection rate of 12.67%).Conclusion Chromosomal abnormality is an important reason that leads to adverse pregnancy history.Therefore,the couples with adverse pregnancy history should receive routine prenatal cytogenetic examination and consultation to prevent birth defects,and improve the quality of the birth service.

Karyotype analysis;Adverse pregnancy history;Polymorphism

R394.2

A

1003—6350（2016）15—2542—02

10.3969/j.issn.1003-6350.2016.15.047

2016-01-21)

莫丽芳。E-mail：478974155@qq.com