FQ-PCR技术定量检测HBV-DNA与乙型肝炎病毒免疫学标记物的相关性

王华

FQ-PCR技术定量检测HBV-DNA与乙型肝炎病毒免疫学标记物的相关性

王华

目的探讨荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)技术定量检测乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸(HBV-DNA)的效果, 并分析HBV-DNA与乙型肝炎病毒免疫学标记物的相关性。方法198例乙型肝炎患者, 分别采用FQ-PCR技术和酶联免疫吸附实验(ELISA)对患者血清行HBV-M定性检测和HBVDNA定量检测。结果HBsAg(+)HBeAg(+)HBcAb(+)HBV-DNA阳性率为93.24%, 病毒量为(6.89±1.85)copies/ml显著高于HBsAg(+)HBeAb(+)HBcAb(+)、HBsAg(+)HBcAb(+)、HBsAb(+)HBeAb(+)HBcAb(+)、HBeAb(+) HBcAb(+)、HBcAb(+), 其中HBcAb(+)最低, 差异具有统计学意义(P＜0.05)。结论血清HBV-DNA与HBV复制程度具有显著相关性, 能够反映患者发病程度、传染性等, 对临床制定治疗方案有指导意义。

乙型肝炎；荧光定量聚合酶链反应；免疫学标记物；乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸；相关性

乙型肝炎是由HBV感染引发的疾病, 会诱发肝脏损害,若治疗不当可进展为肝硬化, 严重威胁着人们的身体健康。近年来, 乙型肝炎病毒的发生率明显升高。因此, 临床应加强对乙型肝炎的防治, 提高患者的预后生活质量。定量检测HBV-DNA能够反映血清HBV病毒的复制情况, 对确定治疗方案具有指导意义。有研究指出, 加强对HBV-DNA及乙型肝炎病毒免疫的检测, 在临床评估乙型肝炎的病毒传染性、疾病严重程度中具有重要意义［1］。对此, 本文探讨了HBVDNA及乙型肝炎病毒免疫学标记物的相关性, 为临床治疗乙型肝炎提供客观依据, 现报告如下。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取2012年9月～2014年9月医院收治的乙型肝炎患者198例作为研究对象, 男82例, 女116例, 年龄20～76岁, 平均年龄(42.06±9.68)岁；根据乙型肝炎病毒血清HBV-M模式：74例HBsAg(+)HBeAg(+)HBcAb(+), 63例HBsAg(+)HBeAb(+)HBcAb(+), 16例HBsAg(+)HBcAb(+), 17例HBsAb(+)HBeAb(+)HBcAb(+), 10例HBeAb(+)HBcAb(+), 18例 HBcAb(+)。

1.2方法 198例受试者均行空腹静脉采血6 ml, 置于2支抗凝试管中(3 ml/支), 置入血液离心机中行血清分离, 转速为3000 r/min, 10 min后取出。采用ELISA检测HBV-M水平；采用FQ-PCR技术检测HBV-DNA水平, ＞1.0×102copies/ml提示为阳性。检测期间严格按照实际说明书操作。

1.3统计学方法 采用SPSS19.0统计学软件对数据进行统计分析。计量资料以均数±标准差(±s)表示, 采用t检验；计数资料以率(%)表示, 采用χ2检验。P＜0.05表示差异具有统计学意义。

2 结果

HBsAg(+)HBeAg(+)HBcAb(+) HBV-DNA阳性率为93.24%, 病毒量为(6.89±1.85)copies/ml, 均显著高于HBsAg(+)HBeAb(+) HBcAb(+)、HBsAg(+)HBcAb(+)、HBsAb(+)HBeAb(+)HBcAb (+)、HBeAb(+)HBcAb(+)、HBcAb(+), 其中HBcAb(+)病毒量最低,差异具有统计学意义(P＜0.05)。见表1。

表1 HBV-M模式与HBV-DNA结果分析［n(%),±s］

表1 HBV-M模式与HBV-DNA结果分析［n(%),±s］

注：与其他HBV模式相比,aP＜0.05

HBV模式 例数 HBV-DNA阳性率 病毒量(copies/ml) HBsAg(+)HBeAg(+)HBcAb(+) 74 69(93.24)a6.89±1.85aHBsAg(+)HBeAb(+)HBcAb(+) 63 31(49.21) 5.97±1.20 HBsAg(+)HBcAb(+) 16 7(43.75) 5.21±1.13 HBsAb(+)HBeAb(+)HBcAb(+) 17 3(17.65) 4.01±0.62 HBeAb(+)HBcAb(+) 10 1(10.00) 3.91±0.79 HBcAb(+) 18 3(16.67) 3.86±0.82

3 讨论

两对半(HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb)是临床检查HBV病毒感染的常见指标, 若检查结果显示为大三阳, 则提示HBV病毒处于活跃状态, 传染性较强；若检查结果显示为小三阳, 则提示病毒复制能力弱, 传染性降低。然而,有研究指出, 该检查方案无法反映HBV的复制水平, 尤其在准确反映器官移植、医源性感染等患者HBV病毒感染中存在局限性［2］。近年来, FQ-PCR技术定量检测HBV-DNA逐渐用于临床诊断中, 取得满意效果。

HBV-DNA为完整的HBV颗粒内核核心表达, 能够显示病毒复制、减少、转阴等情况, 在临床确定抗病毒方案中具有指导意义［3］。本组研究中, HBsAg(+)HBeAg(+)HBcAb(+) HBV-DNA阳性率为93.24%, 病毒量为(6.89±1.85)copies/ml,显著高于HBsAg(+)HBeAb(+)HBcAb(+)、HBsAg(+)HBcAb(+)、HBsAb(+)HBeAb(+)HBcAb(+)、HBeAb(+)HBcAb(+)、HBcAb(+),其中HBcAb(+)病毒量最低, 差异具有统计学意义(P＜0.05)。由研究结果可看出, 大三阳患者HBV-DNA的复制能力较强。有文献指出, HBV-DNA与HBeAg阳性表达具有显著相关性［4］, 本研究结果与此一致。HBsAg(+)HBeAb(+)HBcAb(+)、HBsAg(+)HBcAb(+)的HBV感染力无差异, 可能与前区C序列基因表达, 抑制HBsAg表达, 造成HBsAg呈阴性有关, 但该模式HBV感染的病毒传染性仍较高［5］。

综上所述, 人体一旦明确存在HBV感染, 应联合HBV免疫学标记物及HBV-DNA, 便于临床明确乙型肝炎患者HBV病毒复制能力、传染性及临床治疗效果, 在防治乙型肝炎中具有重要意义。

［1］郑卫东, 田彩霞, 左万超, 等.1427例乙型肝炎患者PreS1、HBV DNA和HBV-M相关性分析.国际检验医学杂志, 2012, 33(7):802-803, 805.

［2］彭强, 杨彩霞.乙型肝炎血清免疫学标志物与HBV DNA定量检测的相关性.国际检验医学杂志, 2011, 32(15):1770-1772.

［3］蔡叶琴, 孙彦, 黄黎, 等.血清HBV-DNA与HBV免疫学标志物的相关性研究.河北医学, 2011, 17(2):153-155.

［4］张蕾, 周玉妮, 董景云, 等.血清HBV-DNA载量、乙肝免疫学标志物定量与老年慢性乙肝患者肝功能的关系.中国老年学杂志, 2014, 34(13):3563-3564.

［5］张庆安.乙肝患者血清免疫学标志物检测结果与HBV-DNA定性、定量关系的分析.山东医药, 2012, 52(22):74-76.

10.14164/j.cnki.cn11-5581/r.2016.03.011

2015-09-30］

453000 新乡市第一人民医院检验科