光动力学治疗子宫颈持续性HPV感染临床疗效对比

刘　韵，权效珍，覃小敏

(湖北文理学院附属襄阳市中心医院妇产科，湖北 襄阳　441021)



光动力学治疗子宫颈持续性HPV感染临床疗效对比

刘韵，权效珍，覃小敏

(湖北文理学院附属襄阳市中心医院妇产科，湖北 襄阳441021)

摘要：目的探讨在对子宫颈持续性人乳头瘤样病毒(HPV)感染使用光动力学和激光治疗的疗效对比。方法 选取2012年10月—2014年2月在该院妇科通过HPV DNA杂交捕获实验证实其有HPV感染，并且感染持续达6个月以上的148例患者，根据随机数字表将其分为两组，分别采用光动力学法和激光治疗法对对各组患者进行治疗，对比两组患者治疗后的疗效以及不良反应。结果 患者治疗后采用新柏氏液基细胞学检测(TCT)，光动力学组明显优于激光治疗组(P<0.05)；转阴性率以及治愈率上，光动力学组也明显优于激光治疗组(P<0.05)；不良反应方面，两组在治疗后不良反应方面，不存在明显的差异(P>0.05)。结论 与激光治疗方法相比，光动力学治疗方案有着疗效好，治愈率高且可以重复治疗等优点，并且也无明显的不良反应。

关键词：光动力学治疗法；激光治疗；人乳头瘤样病毒；宫颈

目前的研究表明导致子宫颈癌的直接原因之一是人类乳头状瘤病毒(human papillomavirus, HPV)感染。持续性的HPV感染会导致宫颈鳞状上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN),CIN是对子宫颈鳞状上皮发生不同程度的增生向原位癌转变过程中的各种疾病的总称，此种疾病具有连续性。HPV感染的好发人群为处于性活跃期的年轻女性，HPV的感染率与CIN以及宫颈原位癌发病率之间呈正相关，并且呈现出年轻化的趋势[1-2]。各种分型的CIN都存在有转变成为宫颈癌的可能性，因此对CIN以及HPV发生的持续性感染的早期诊断与治疗对预防宫颈癌的发生有着积极的意义。目前为止主要的治疗方案分为药物治疗和物理治疗两种。此两种治疗方案中，以物理治疗效果相对明显，但此种治疗方案会对患者造成局部损伤且不可重复，还会对患者的子宫颈管组织结构造成破坏，而对预后妇女的生育造成影响。目前5-氨基酮戊酸光动力疗法(ALA-PDT)作为一种新的物理疗法已经在在皮肤肿瘤及非肿瘤性疾病中广泛使用，并且取得了良好的治疗效果，而且此种治疗方法具有更加安全、副作用更小、治疗效果明显等优点。光动力疗法是一种联合应用光敏剂及相应光源，通过光动力学反应选择性破坏肿瘤组织的全新治疗技术。其主要原理是将光敏剂输入人体，在一定时间后，以特定波长的光照射病变部位，通过一系列光化学和光生物学反应，在分子氧的参与下，产生单态氧和/或自由基，氧化破坏组织和细胞中的各种生物大分子，使异常增生活跃的细胞发生不可逆的损伤，最终使细胞死亡，达到治疗目的。具体步骤为：(1)由医护人员随用随配新鲜药液，以备治疗时使用。(2)新鲜药液湿敷患处3 h，并根据具体情况进行相应的局部封包。(3)红光照射病灶局部，照射时间通常为20 min。

激光治疗激光治疗宫颈糜烂，具有简便、迅速、疗效高的特点；同时激光刀不接触组织，易于掌握对烧灼组织的深度，因此并发症少。宫颈糜烂常用为CO2激光。多采用凝固炭化或氧化法。对宫颈糜烂用小功率CO2激光器，在糜烂面进行烧灼炭化，一般一次治愈。此治疗方法在手术前需要进行如下准备：(1)详细询问病史，体格检查及妇科检查，包括化验白带，并向病人说明术后注意事项；(2)宫颈刮片或宫颈活检以排除癌变或其他特异性炎症如结核等；(3)手术时间一般在月经净后3～7 d进行。术前3 d内无性生活史。术中注意要点有(1)烧灼过程中所产生的烟雾应及时吸出，否则影响视野及治疗效果，同时避免损伤眼睛。(2)注意烧灼面要均匀，激光头置于距离宫颈1 cm处，不可太近，对准宫颈，避免损伤周围组织。(3)术者应戴防护眼镜，禁止用眼睛直接对着激光。激光治疗术后做如下处理：(1)术后2～3 d宫颈组织坏死脱落，阴道分泌物增加，7～14 d可能出现血性分泌物或少量出血，均为正常反应，不需处理。若分泌物增多且有臭味者，应考虑为感染，需用抗生素治疗。(2)术后6～8周新生的鳞状上皮组织全部覆盖而痊愈。禁止性生活和盆浴2～3个月。

在本次研究中采取此种治疗方案与激光治疗方法进行疗效对比研究，现详细报道如下。

1资料与方法

1.1一般临床资料 选取2012年10月—2014年2月在我院妇科通过HPV DNA杂交捕获实验证实其有HPV感染，并且感染持续达6个月以上的148例患者，按照随机数字表将其分为PDT治疗组和激光治疗组，PDT组78例，年龄跨度为24～54岁，平均年龄为(35.7±15.7)岁，进行活检后，CIN型者有67例，孕此1～6次，平均(3.21±1.59)次；激光组70例，年龄跨度为25～56岁，平均年龄为(37.6±19.5)岁，进行活检后，CIN型者有57例，孕次1～6次，平均(3.16±1.55)次。两组患者在各方面比较，差异均不存在统计学意义(P>0.05)，两组可以进行对比。

1.2HR-HPV DNA检测所有患者均使用购自美国DIGENE公司的检测试剂及相应仪器，在进行治疗前1个月以及治疗后第3个月进行检查；同期进行子宫颈多点活性检验，对其进行定性以及分期检测。

1.3治疗方案光动力学组：使用购自上海复旦张江生物医药股份有限公司的艾拉5-氨基酮戊酸(ALA)(每支118 mg)进行治疗。使用设备为购自桂林兴达公司的艾拉光动力激光治疗仪xd630i型。本组患者均在月经结束后3～7 d进行治疗。照射时间控制在21 min，输出功率为1 W，半导体照射的总能量大致为80～100 J·cm-2。对患者进行光动力学治疗后需要对性生活和盆浴禁止，同时避免使用具有刺激性的食物和重体力的劳动。总共治疗2次，间隔为28 d。

激光治疗组：使用购自上海市激光研究所的号LJL35-CB型CO：激光治疗机，治疗时使用功率为20 W，治疗时间为20～30 min。在月经结束后3～7 d进行治疗。治疗一次，患者治疗后3个月内禁止性生活。

1.4评定疗效治疗后HPV-DNA检测结果为阴性者为完全缓解。合并CIN I者如HPV-DNA检测结果为阴性，细胞学检查结果为未找到恶性细胞或上皮内病变细胞，活检病理结果为慢性宫颈炎，则判为治愈。

使用TCT对患者进行诊断，其中有不明确意义(ASCUS)、低度鳞状上皮内病变(LSIL)以及高度鳞状上皮内病变(HSIL)等。

1.5血清RNA提取及定量早晨空腹静脉采血，离心后将上清液经液氮速冻后，保存待测。使用RNA快速提取试剂盒(德国Invitrogen公司)提取总RNA,后使用Ace-a-cDNA逆转录试剂盒(日本东洋公司)进行逆转录，使用荧光实时定量PCR(q-RT-PCR)进行定量测定。miR-21上游引物：GCCGCTAGCTTATCAGACTGATGT，下游引物：GTGCAGGGTCCGAGGT；miR-31上游引物：GGAGAGGCAAGATGCTGGCA，下游引物：GTGCAGGGTCCGAGGT。

2结果

2.1两组患者在进行治疗前后TCT结果对比 两组在治疗后，子宫颈细胞学病变程度PDT组明显优于激光治疗组(P<0.05)。见表1。

表1　两组患者在进行治疗前后TCT结果对比/例

注：与激光治疗组对比，*P<0.05。

2.2两组HR-HPV转阴率对比 PDT组转阴率明显高于激光治疗组(P<0.05)，见表2。

表2　 两组治疗后HR-HPV转阴率对比/例(%)

注：与激光治疗组对比，*P<0.05。

2.3不良反应对比两组患者在治疗过程中，PDT组未出现过敏等不适应反应，明显优于激光治疗组；在治疗后随访中，子宫颈狭窄、子宫颈质地变硬方面PDT组均明显优于激光治疗组(P<0.05)。见表3。

表3　两组不良反应对比/例(%)

注：与激光治疗组对比，*P<0.05。

2.4两组治愈后RNA对比见表4。

组别例数miR-21miR-31PDT组781.32±0.45*1.51±0.29*激光治疗组701.84±0.362.04±0.49χ23.1452.516P0.0130.005

注：与激光治疗组对比，*P<0.05。

3讨论

目前对于子宫颈HPV感染常规的物理治疗方法有：激光治疗、LEEP术、冷冻以及微波治疗。有报道指出[2]，在使用CO2激光治疗法对患有宫颈上皮内瘤样病变的患者进行治疗后，其第3、6、9个月的hrHPV-DNA转阴率达到59.7%、90.9%以及92.1%。如果采用LEEP术对处于CINⅡ～Ⅲ期的患者进行治疗，结果发现其术后HPV转阴率为67.4%[3]。微波疗法在联合药物治疗后HPV转阴率可以达到98.7%[4]。然而以上治疗方案无论有无药物参与均不能避免出现以下问题：(1)治疗不能将受感染的细胞全部清除，存在复发的风险；(2)由于以上的治疗手段均需要对宫颈组织进行破坏，并且针对性较差，会对正常健康组织造成伤害，使得治疗后的宫颈管发生狭窄、僵硬以及机能下降的问题，有可能会对女性的生育造成影响；(3)且以上的治疗方法，因宫颈组织较小，而无法进行二次治疗[5]。

光动力学治疗法(photodynamic therapy,PDT)光动力疗法(PDT)是一种治疗尖锐湿疣的新方法，目前已在临床广泛使用。光动力疗法是一种联合应用光敏剂及相应光源，通过光动力学反应选择性破坏肿瘤组织的全新治疗技术。其主要原理是将光敏剂输入人体，在一定时间后，以特定波长的光照射病变部位，通过一系列光化学和光生物学反应，在分子氧的参与下，产生单态氧和/或自由基，氧化破坏组织和细胞中的各种生物大分子，使异常增生活跃的细胞发生不可逆的损伤，最终使细胞死亡，达到治疗目的。具体步骤为：(1)由医护人员随用随配新鲜药液，以备治疗时使用；(2)新鲜药液湿敷患处3 h，并根据具体情况进行相应的局部封包；(3)红光照射病灶局部，照射时间通常为20 min。

PDT是细胞吸收光敏剂之后与一定频率的激光发生光化学反应而达到杀死细菌达到治疗的效果的方法。在本次研究中，所使用的是艾拉光动学治疗方法(ALA-PDT)，其进行治疗的主要机制为：增生活跃的组织细胞将优先吸收敷于皮肤表面上的ALA，使得ALA在其细胞内聚集，ALA在细胞内可以转化为原卟啉Ⅸ(PpⅨ)这一强光敏剂，之后由于受到一定波长光的照射，使得其产生大量的活性氧，而导致细胞凋亡乃至坏死，从而发挥其治疗作用[8-9]。ALA-PDT治疗方法已经在临床治疗尖锐湿疣以及其他的皮肤肿瘤中均取得了良好的治疗效果，此种治疗方法相对于其他的治疗方案，具有无创伤性的有点[10-13]，也因此受到了广大患者的欢迎。近些年来，此中治疗方法已开始适用于妇科疾病的治疗中。

激光治疗激光治疗宫颈糜烂，具有简便、迅速、疗效高的特点；同时激光刀不接触组织，易于掌握对烧灼组织的深度，因此并发症少。宫颈糜烂常用为CO2激光。多采用凝固炭化或氧化法。对宫颈糜烂用小功率CO2激光器，在糜烂面进行烧灼炭化，一般一次治愈。此治疗方法在手术前需要进行如下准备：(1)详细询问病史，体格检查及妇科检查，包括化验白带。并向病人说明术后注意事项；(2)宫颈刮片或宫颈活检以排除癌变或其他特异性炎症如结核等；(3)手术时间一般在月经净后3～7 d进行。术前3 d内无性生活史。术中注意要点有(1)烧灼过程中所产生的烟雾应及时吸出，否则影响视野及治疗效果，同时避免损伤眼睛。(2)注意烧灼面要均匀，激光头置于距离宫颈1 cm处，不可太近，对准宫颈，避免损伤周围组织。(3)术者应戴防护眼镜，禁止用眼睛直接对着激光。激光治疗术后做如下处理：(1)术后2～3 d宫颈组织坏死脱落，阴道分泌物增加，7～14 d可能出现血性分泌物或少量出血，均为正常反应，不需处理。若分泌物增多且有臭味者，应考虑为感染，需用抗生素治疗。(2)术后6～8周新生的鳞状上皮组织全部覆盖而痊愈。禁止性生活和盆浴2～3个月。在本次研究设计时，参考了Peter等[14]和Gannon等[15]的实验研究结果，采取使用浓度为1%的5-ALA，孵育时间控制在3～4 h，使得宫颈上皮增生组织可以对ALA有充分的吸收和代谢，增强治疗的针对性，避免对正常组织造成伤害。同时选用波长为630 nm的激发光对其进行照射治疗。本次研究中，使用配置性能良好的浓度为10%的ALA，富裕宫颈皮损表面4 h后进行光动力治疗以增强其光敏性，结果表明，对子宫颈上皮HPV感染使用光动力学治疗，其治愈率可以达到84.6%，明显的优于激光治疗组的61.4%，并且其在治疗后TCT检测以及不良反应方面均明显优于激光治疗组。其原因可能是由于：第一，光动力学治疗法更加具有针对性，其对增生组织的治疗效果更加明显；第二，由于光动力学治疗对机体的不造成机械性的损伤，因此给患者造成的创伤较小；第三，光动力学治疗方法由于其靶向性明确，所以治愈率相对较高，且可以重复治疗，并且由于此种疗法的针对性较强，其治疗后与子宫颈癌发病相关的基因的表达也较传统疗法低，证明其治愈率较高，复发性相对较低。由此可见，光动力学治疗法是治疗子宫颈HPV感染的更好的选择，更加适合对生育有要求的女性进行治疗。

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Comparison of photodynamic therapy for human

papillomavirus infection in cervix

LIU Yun,QUAN Xiao-zhen,QIN Xiao-min

(DepartmentofObstetricsandGynecology,XiangyangCentralHospitalAffiliatedto

HubeiCollegeofArtsandSciences,XiangYang,HubeiProvince441021,China)

Abstract:Objective To compare the photodynamic therapy with laser therapy for human papillomavirus (HPV) infection in cervix.Methods Collecting 148 patients who were used by hybrid capture HPV DNA experiments showed that the HPV infection from 2012.10 to 2014.2 in our hospital, and infected for more than 6 months, according to the random number table, they were divided into two groups, Using photodynamic therapy and laser therapy for the treatment of the patients in each group, comparing the two groups of patients after treatment and adverse reaction.Results New PAT'S detected by liquid based cytology in patients after treatment, photodynamic group was significantly better than the laser treatment group(P<0.05);Negative rate and cure rate, photodynamic group was also better than the laser treatment group (P<0.05); there were no significantly difference in terms of adverse reactions in the two groups after treatment,adverse reactions (P>0.05).Conclusion Compared with laser therapy, photodynamic therapy has a good curative effect, high cure rate and can be repeated treatment etc, and has no obvious adverse reaction.

Key words:photodynamic therapy;laser treatment;cervical human papilloma virus；cervix

收稿日期：(2015-05-07，修回日期：2015-07-10)

通信作者：权效珍，女，副主任医师，研究方向：妇产科疾病诊断与治疗，E-mail:13634198@qq.com

基金项目：襄阳市科技计划研究与开发项目(No 2014-9-17)

doi:10.3969/j.issn.1009-6469.2016.01.028