奶牛子宫内膜炎病原菌的分离鉴定及药敏试验

魏有芳

(新疆克州畜禽繁育改良站，新疆 克州 845350)



奶牛子宫内膜炎病原菌的分离鉴定及药敏试验

魏有芳

(新疆克州畜禽繁育改良站，新疆 克州 845350)

摘要：为了使奶牛子宫内膜炎病原菌的研究更加细致，在具体研究过程中，选取了某奶牛场的20只患有子宫内膜炎的病牛进行研究。取得这20只病牛的子宫内分泌物，并对这些子宫分泌物进行菌落计数、细菌分离并纯化等技术，同时使用最新的微生物鉴定仪和药敏分析仪对提取出来的子宫分泌物进行鉴定与药敏实验。进行生化鉴定的结果表明：患病奶牛的子宫分泌物中有多种不同的细菌。而随后对这些提取物进行药敏实验的结果则表明：庆大霉素和妥布霉素对从病牛体内采取的子宫分泌物中的细菌起到很好的抑制作用，所以以这两种抗生素为主要原料生产的药物治疗患有子宫内膜炎的奶牛能够收到比较理想的疗效。

关键词：奶牛；子宫内膜炎；病原菌分离；鉴定；药敏试验

1子宫内膜炎的危害

子宫内膜炎是指奶牛身体内的炎症仅仅发生在子宫内膜的一种疾病，这种疾病给整个饲养奶牛的行业都带来了很大的困扰。[1]奶牛在成长的过程中若感染子宫内膜炎，会对生产能力造成非常严重的影响，情况严重的甚至会导致奶牛不孕不育症。而患有子宫内膜炎的奶牛，其产奶量也会受到影响，不仅产奶的数量减少，产奶的质量也因患病而大大降低。以上这些影响都极大地增加了饲养者在饲养过程中所需要投入的成本，与此同时，奶牛因患病而淘汰率也大大提高，给整个饲养奶牛的产业带来非常巨大的损失。按照临床对奶牛患有子宫内膜炎的诊断标准，选取出患病的奶牛进行研究，主要是为了避免在治疗过程中因滥用抗生素类药物而使奶牛体内产生耐药菌株，造成其他不必要损失，同时也为治疗子宫内膜炎提供了更多的理论依据。

2采取样本、细菌鉴定

准备好试验过程中所需要的试剂和设备，对选取的20头患有子宫内膜炎的奶牛提取其子宫的分泌物。在提取之前，应先将患病奶牛的阴部进行彻底的清洗，然后再由专业人士对奶牛进行直肠检察，用手将奶牛的子宫颈部握住，以使患病奶牛子宫内的黏液能够流出阴道。最初流出的黏液因其在取得之前就已与空气接触可能会有些杂质，因而不便于对其进行鉴定，所以应收集在中间或者最后流出的黏液。在收集的过程中为使其污染达到最小，应用事先准备好的青霉素瓶快速的收集，收集完成后及时密封，并迅速将收集到的黏液带到实验室进行分离鉴定。[2]

尽量保持整个实验的过程中取得的黏液不被空气中细菌感染。将取得的黏液取出适量与事先准备好的无菌生理盐水进行1∶9的混合，然后再用一定的方法将混合好的黏液稀释液稀释成1∶100和1∶1000不同的比例。然后取同样数量的1∶1000的稀释液分别涂在普通琼脂培养皿和鲜血琼脂培养皿中，在同样的环境下进行培养、观察和记录。再用显微镜观察，找出不纯的菌落并对其进行进一步的纯化，将纯化后的菌落移入液体培养皿中继续培养，并用甘油对其进行保存。将培养皿中的细菌进行分类和编号，并对这些不同编号的细菌分别进行不同的试验鉴定。例如氢化酶试验、接触酶试验等能鉴定出不同细菌的类型。[3]

3分离培养提取的细菌并进行药敏试验

对2个不同培养皿中的菌落进行了测试和鉴定之后发现，患有子宫内膜炎奶牛的子宫黏液中，主要致病菌为大肠埃希菌，还有一些致病菌为科氏葡萄球菌、干燥棒状杆菌、鲁氏不动杆菌，除此之外患病奶牛的子宫黏液中还有些极少量的其他细菌。药敏试验结果：庆大霉素和妥布霉素能够有效的对抗大肠杆菌，而培氟沙星对大肠杆菌的疗效远远不如前两种抗生素。但是培氟沙星对鲁氏杆菌却有很好的抵制作用，而对黏液中其他细菌的抑制作用最强的是庆大霉素，其次是四环素、左氟沙星和利福平等抗生素。所以，在临床对患病奶牛进行治疗的时候，应该根据其黏液中的细菌情况选择合适的药物，以免病牛造成不必要的伤害。

4结论

在对病牛子宫黏液中的细菌进行分离鉴定和药敏试验的过程中，用2个不同的培养皿对其细菌进行培养、观察和记录，发现2个不同培养皿中细菌的生长数量几乎没有差异，试验结果表明，黏液内的细菌对营养物质没有特殊的要求。在试验的过程中，检测到黏液内有多种不同的致病菌，有的细菌在其他的地区甚至没有被发现和提及过。所以，很可能是不同地区的环境差异造成，奶牛的生长环境由多种不同的因素组成，而这些不同的因素下形成了不同的致病菌。此外，研究人员在进行试验时，采取试验方法的微小差异也可能出现这种情况。随后的药敏试验结果表明，临床上可以用庆大霉素、妥布霉素和培氟沙星等抗生素对患有子宫内膜炎的奶牛进行治疗。

参考文献：

[1] 王爽,和翀翼,刘文,等.黑龙江地区奶牛子宫内膜炎病原菌的分离鉴定与药物敏感性试验[J].中国兽药杂志，2008(05)：65.

[2] 李世宏,杨国林,杨锐乐,等.奶牛子宫内膜炎研究进展[J].中国奶牛，2007(01):22.

[3] 赵红琼,黄燕,陈杖榴,等.新疆地区奶牛子宫内膜炎病原菌的分离鉴定及其对抗菌药的敏感性试验[J].中兽医医药杂志，2005(02)：53.

收稿日期:2016-01-15

作者简介：魏有芳(1971-)，女，大专，畜牧师，主要从事畜牧相关工作。

中图分类号：S858.23

文献标识码：B

文章编号：2095-9737(2016)06-0161-01